usp34无水.doc

美国药典USP34 无水柠檬酸分子式：C6H8O7化学名称：2-羟基丙烷-1,2,3三羧酸相对分子量：192.13结构式： 编号：定义：含有99.5%-100.5%的C6H8O7的物质（以无水计算）。鉴定：用红外吸收原理（197k）：样品干燥条件要求为105时间2小时后进行。含量分析：示例：准确称取0.550g无水柠檬酸，将称取的样品溶于50ml水中，加入0.5ml酚酞，用1mol/L的氢氧化钠溶液滴定，每毫升1N前氧化钠相当于64.03mg的无水柠檬酸。验收标准：99.5-100.5%，以无水计算。杂质：一、无机杂质：1、灼烧残渣：0.1%，称样量为1.0g。（方法281）2、重金属：10ppm (方法231)3、硫酸盐：0.015%1）硫酸盐标准溶液A：用30%的酒精配置1.81mg/ml的硫酸钾溶液。在使用之前，取10ml上述硫酸钾溶液用30%的酒精定容至1000ml，充分混匀，此硫酸盐标准溶液的浓度为10微克/毫升。2）硫酸标准溶液B：用蒸馏水配置1.81mg/ml的硫酸钾溶液。在使用之前，取10ml上述硫酸钾溶液用水定容至1000ml，充分混匀，此硫酸盐标准溶液的浓度为10微克/毫升。 3）样品原液：用蒸馏水制备66.7mg/ml的无水柠檬酸溶液。4）样品溶液：取4.5ml标准硫酸盐溶液A加3ml氯化钡的溶液（按1 比4比例配置)振荡,并放置1 分钟,取上述悬浮液2.5ml加入15ml柠檬酸样品原液和0.5 ml 5 N 醋酸溶液, 混匀。5）标准溶液:基本步骤和制备“样品溶液”的一样，除了把15ml样品原液换成硫酸盐标准溶液B以外。分析：标准溶液和样品溶液验收标准：将制备好的样品溶液和标准溶液放置5分钟后，样品溶液的浊度不得大于标准溶液的浊度，即0.015%4、铝浓度的限定：0.2ppm产品计划用于渗析溶液制剂的需要标识铝的限量。铝标准溶液制备称352mg的硫酸铝钾加入少量的水摇匀使其溶解，置于100ml的容量瓶中，继续加入10ml稀硫酸，用水定容到刻度，摇动使其混合均匀。在使用之前，移1.0ml该溶液到100ml的容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀即可。pH为6.0的醋酸缓冲溶液将50g醋酸铵倒入150ml水中，加入醋酸调节ph到6.0后，加水稀释到250ml后摇匀即得。标准溶液制备标准溶液混合物，由2ml上述标准铝溶液，加入10ml的pH为6.0醋酸缓冲液和98ml水组成，与样品溶液配制方法相同，再与有氯仿的的稀释剂混合即得到标准溶液萃取物。样品溶液将20.0g无水柠檬酸放入100ml水中，加入10ml醋酸缓冲溶液，依次制成20ml、20ml和10ml含浓度为0.5%的8-羟基喹啉和氯仿组成的萃取体系，分别得到50ml的萃取溶液。空白对照溶液取10ml醋酸缓冲溶液加入100ml水中，用制备样品溶液相同的方法制备空白对照溶液。测试荧光条件：激发波长392nm，发射波长518nm，分析：标准溶液和样品溶液对照，用空白对照溶液在荧光分光光度计调零点，后读取样品溶液在设置的荧光条件下的荧光强度。验收标准：经测试检测样品溶液的荧光强度不得超过标准溶液的荧光强度（每克含量为0.2g），即0.2ppm。二、有机杂质1、草酸限定：0.036%样品原液：制备200mg/ml的柠檬酸水溶液。样品溶液：取4ml样品原液，加入3ml盐酸和颗粒状锌 1 g,煮沸1 分钟后,再放置2 分钟, 转移上层清液到包有0.25ml盐酸苯胼溶液的的试管种(浓度为1比100) 。并且加热煮沸，迅速冷却,加入相等容量的盐酸和高铁氰化钾溶液(浓度1 比20) ，震荡混合然后放置30 分钟。标准溶液：与样品溶液的制备方法一样，除了把4ml的样品原液换成4ml 0.10mg/ml的草酸溶液（相当于每毫升内含0.0714mg的无水草酸）外。分析：样品溶液与标准溶液进行比照。验收标准：用柠檬酸样品溶液测试所产生的桃红色不得深于标准溶液的色度，（标准溶液的浓度为0.036%），即0.036%。三、具体的测试：1、细菌内毒素的检测：（方法85）在无水柠檬酸的有关专题文献中，对有关细菌内毒素的剂量水平是有要求的。无水柠檬酸产品依据其生产剂型而需要形成更长的工艺流程得以去除,有关专题文献对不同无水柠檬酸剂型的细菌内毒素有具体的限量。2、溶液的澄清度：样品溶液的应与水澄清透明（注：本试剂是以参比所涉及悬浮液A 作为对照，在自然光散射条件下，样液作用后5分钟应不得高于参比所涉及悬浮液A的浑浊度。） 1）硫酸肼溶液用水配置10mg/ml的硫酸肼溶液。2）次甲氨溶液将2.5g次甲氨移入100ml带塞的玻璃瓶中，加入25ml水，盖上玻璃塞，混合溶解并定容到刻度。3）原始乳光悬浮液注意，该乳光悬浮液是放置于玻璃容器中，而且玻璃容器要求表面光滑并要放置2个月。使用前先摇匀之后移25ml的硫酸肼溶液到100ml的含有甲氨溶液的带塞玻璃瓶中，混合定容好后允许存放24小时。4）标准乳光悬浮液注：该标准乳光悬浮液配置时间不能超过24小时。移15.0ml原始乳光悬浮液到1000ml的容量瓶中，加水定容到刻度并摇动使其混合均匀。5）标准参比悬浮液A：移5.0ml标准乳光悬浮液到100ml容量瓶中，加水定容到刻度。6）标准参比悬浮液B：移10.0ml的标准乳光悬浮液到第二个100ml容量瓶中，加水定容到刻度，即得到参比所涉及悬浮液B。7）样品溶液：200mg/ml的柠檬酸水溶液。8）分析：标准参比悬浮液A、标准参比悬浮液B、水、样品溶液9）检测取足量的待测试洋液到无色的、中性透明的玻璃试管中，该玻璃试管为一组底部平整、其直径为1525mm，装量为40mm高度，分别为参比所涉及悬浮液A和参比所涉及悬浮液B以及水为对照样，用黑色的底垫为背景，用散射光（851）或分光光度计以目视垂直观察比较，样品溶液象水一样澄清透明。（注：该散射光系统中应很容易辨别出参比所涉及悬浮液A和参比所涉及悬浮液B）。10）验收标准：样品溶液的应与水澄清透明。3、溶液的颜色：样品溶液的颜色不得深于标准溶液A、标准溶液B、标准溶液C或者水对照液。1）标准原液预备三种溶液分别为溶液A、溶液B、溶液C，三种溶液分别是三氯化铁试剂、氯化钴试剂、硫酸铜试剂配制成，都是用稀盐酸（浓度为10g/L）稀释，三种颜色溶液的组成如下： A2.4：0.6：7. 0B2.4：1.0 ：0.4：6.2C9.6：0.2：0.22）标准溶液配制（注：标准溶液用前配制，要现配现用）移2.5ml标准原液A到100ml的容量瓶中，加入稀盐酸（浓度为10g/L）并定容到刻度，混合均匀即得到标准溶液A。同样移2.5ml标准储原液B到100ml的容量瓶中，加入稀盐酸（浓度为10g/L）并定容到刻度，混合均匀即得到标准溶液B。同样移0.75ml标准储备溶液C到100ml的容量瓶中，加入稀盐酸（浓度为10g/L）并定容到刻度，混合均匀即得到标准溶液C。3）样品溶液用于测定的无水柠檬酸样品溶液同测定澄清度溶液的制备方法一样（即200mg/ml的柠檬酸水溶液）。4）测试：样液：标准原液A、标准溶液B、标准溶液C、水、样品溶液测试：移规定量的待测样品溶液到无色的中性、透明的玻璃试管中，玻璃试管底部平整，其直径为1525mm，测试时装量高度为40mm，与相对应的标准溶液A、溶液B、溶液C高度相同，同时还有一组同高度规格的水溶液对照，以白色的背景在散射光（851）和分光光度计比照，目视法垂直观察比较。5）验收标准：样品溶液的颜色不得深于标准溶液A、标准溶液B、标准溶液C或者水对照液。4、易碳化物：称取1.0g用于试验的颗粒或粉末状样品，置于一只预先用10ml硫酸溶液清洗干净的并干燥10分钟的22175mm规格的试管内，加入10ml硫酸后摇匀并使其全部溶解，然后将该试管浸入901的水浴锅中保温600.5分钟，要求在水浴全过程中样液的液面始终处于水的液面以下，完后于冷水中冷却试管，然后将该酸液倒入比色管中，该酸液的颜色应不深于相同体积的配置好的于比色管的参比溶液K（参见颜色和色度631方法）的颜色。注意观察时应以白色为背景，比色管应垂直观测比较。5、无菌度（见附录方法71）无水柠檬酸无菌度的标识，根据有关专题文献要求因剂量剂型的形式不同，产品其无菌度状态应予以标识。6、水份的测定：921方法1，1.0%。五、附加要求：1、包装和储存：保存在密闭的容器内。没有特定的储存要求。2、标识：当产品计划用于渗透溶液时，该产品必须标识。要使产品细菌内毒素