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文档简介
,小组成员分工包升制作PPT冯宇讲解PPT李春雷查找并整理第一部分资料刘磊查找并整理第一、五部分资料王鹏查找并整理第二、三部分资料熊志江查找并整理第四部分资料,大肠杆菌(Escherichiacoli),1,第二部分,遗传物质,第三部分,基因突变及修复,目录,第四部分,基因转移及重组,第五部分,研究应用,第一部分,概述,2,概述,一、形态特征:大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌,大小约0.4-0.7m2.0-3.0m,两端钝圆,多单独存在或成双,但不呈长链状排列。大多数菌株具有周生鞭毛而能运动,有的菌株具有荚膜或微荚膜,不形成芽胞,对普通碱性染料着色良好。,二、培养特性:大肠杆菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,最适生长温度37,最适生长pH7.2-7.4,伊红美蓝培养基上产生黑色带金属闪光的菌落,电镜下的大肠杆菌,3,注:产酸产气;+:阳性;-:阴性;+/-:大多数菌株阳性/少数阴性;V:种间有不同反应。,三、生化特性:,普通营养琼脂上生长24h后,形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色、中等大小菌落。,微生物资源数据库共享平台菌株保藏编号NKCCMRNK7.C7037,大肠杆菌在麦康凯培养基上长成红色菌落,概述,4,四、致病性:,五、微生物诊断:从可疑症状着手分析,再采集病变组织或者收集粪便或肠内容物,划线接种于麦康凯或伊红美蓝琼脂平板上,挑取可疑菌落同时接种于TSI琼脂和普通琼脂斜面,然后革兰氏染色、镜检形态,淘汰不符合者,最后做生化试验;也可用多重PCR法检测细菌的特异性基因。,概述,5,E.coli基因组中还包含有许多插入序列,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的。利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。,遗传物质,6,遗传物质,二、主要基因型:,7,遗传物质,三、染色体:,8,基因突变及修复,9,大肠杆菌的SOS修复系统细胞损伤时,参与DNA修复的基因,包括切除修复基因(uvrA、uvrB、uvrC)、重组修复基因(recA)及其他基因(umuC、umuD)。OS修复主要通过增加切除修复酶和重组修复酶的含量,来增强对损伤DNA的修复。正常细胞中,LexA阻遏蛋白与lexA、recA、uvrA、uvrB、uvrC基因的操纵区结合,阻遏它们表达,只合成少量RecA蛋白和修复酶,修复零星的DNA损伤。大肠杆菌受到UV照射后,产生大量二聚体,出现大量单链DNA部位,与细胞内少量RecA蛋白结合,激活其蛋白酶功能,使LexA阻遏蛋白自我切割,并且促进DNA同源配对。,基因突变及修复,10,大肠杆菌甲基化介导的错配修复系统特异性不强,基本能修复DNA双链结构中任何轻微的损伤,包括错配、移码、碱基类似物的替代等。,基因突变及修复,大肠杆菌错配修复机制模式,步骤:,11,基因转移及重组,12,基因转移及重组,局限性转导:被转导的DNA片段仅仅是靠近染色体溶源化位点的基因。噬菌体:只转导gal和bio基因。携带gal基因的转导噬菌体称为dgal或dg,携带bio基因的转导噬菌体称为dbio或db。(d表示缺陷)80噬菌体:80整合部位靠近色氨酸基因(trp),可用80dt转导噬菌体对基因trp进行转导。,13,基因转移及重组,注:Holliday模型,是第一个被广泛接受的重组模型,它是通过要发生重组的2个DNA分子的2条单链在同一部位断裂,断裂的游离末
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