HISCL-5000检测原理介绍

HISCL5000检测原理介绍学术二课宋庆波,主要内容,一、仪器结构、试剂、耗材二、仪器优势技术及其竞争对手比较三、仪器的检测方法、原理,主要内容,一、仪器结构、试剂、耗材二、仪器优势技术及其竞争对手比较三、仪器的检测方法、原理,HISCL家族系列仪器市场定位,HISCL-2000i,HISCL-800,HISCL-5000,HISCL系列仪器,共通的检测原理、检测试剂，确保结果的一致性,HISCL-5000主要参数,HighSensitivityCLEIA高敏化学发光酶免疫测定法,1725mm,1300mm,840mm,触摸显示屏,样本区,主机&空气压缩机,通用清洗液装载区,固体废弃物区,试剂装载区,耗材装载区,HISCL-5000主要构成,人性化的操作界面,全中文操作界面、模块分明、使用方便,HISCL-5000耗材,Tip吸头Cuvette,过滤膜,垃圾袋,HISCL-5000试剂,R1-R3R2（磁性微粒）,R4（缓冲液）R5（通用底物）,校准品,复合质控品,HISCL-5000洗液,HISCLwashingsolution（用于脱磁清洗）,Linewashingsolution（用于管路清洗）,Probewashingsolution（用于试剂探针清洗）,主要内容,一、仪器结构、试剂、耗材二、仪器优势技术及其竞争对手比较三、仪器的检测方法、原理,吸样后擦拭吸样嘴双重保障，杜绝样本携带污染,HISCL特有的过滤薄膜(MembraneFilter),HISCL的工作原理技术一：一次性TIP吸头和过滤薄膜,加样方式对比,传统的钢针加样，携带污染严重,传统的吸头加样无过滤薄膜，此吸头对于试管内径的要求较高,【传统技术】,【HISCL】,结合态的待测物(Bound)和游离态的杂质(Free)高效分离有效降低非特异性反应，检测灵敏度高,吸附,清洗/分离,分散,吸附,HISCL的工作原理技术二：脱磁清洗技术,创新的脱磁清洗分离技术-最大限度减低背景干扰,HISCL定量(IU/mL）,A公司（CLIA法）定量(IU/mL）,評価施設：川崎医科大学,N=1,037Mean0.000SD0.001Mean+7SD0.006,临界值0.03IU/mL,N=1,037Mean0.008SD0.009Mean+7SD0.074,临界值0.05IU/mL,HBsAg阴性分布表明HISCL可以排出干扰的影响,创新的脱磁清洗分离技术-改善技术灰区的问题,HISCL的工作原理技术三：滤镜自动切换技术,通过切换滤镜，实现更宽的线性范围,滤镜切换技术实现了宽的检测线性,0,2.5,25,250,2500,（Density）,（光强度）,（光强度）,无滤镜,有滤镜,通过切换滤镜，确保浓度由低到高的宽检测线性范围,0,2.5,25,250,2500,（Density）,有滤镜,无滤镜,0,2.5,25,250,2500,（Density）,确定线性范围,实现宽线性的价值,HISCL2,500IU/L,某厂家250IU/L,中国临床试验结果,宽的线性范围可以减少28%的稀释复检样本，节省成本，缩短TAT,10倍！,20,测量方式比较,反应最后：终止电压，移开磁珠，加入清洗液冲洗流动测量室，准备下一个样品测定。,市面某R公司样本测量方式,容易因流动测量池冲洗不净，出现假性结果；且其测量池有寿命需要更换；传染病项目需要和其他项目分开测量；,HISCL的工作原理技术四：CDP-Star高敏化学发光底物,CDP-Star是目前最灵敏的发光底物。采用CDP-star实现高灵敏的测定系统,主要内容,一、仪器结构、试剂、耗材二、仪器优势技术及其竞争对手比较三、仪器的检测方法、原理,HISCL-5000的反应原理,HISCL-5000使用化学发光酶免疫测定法来定量测定或定性测定样本中的微量蛋白质和激素等。将样本和试剂混匀并加温，使其发生免疫反应，然后发生酶反应。通过计数酶反应中发出的光子（光子计数），测定或检出样本中的微量蛋白质和激素等。HISCL-5000采用碱性磷酸酶作为催化剂，并采用显示出很强发光强度的CDP-Star作为化学发光基质，来获得高感度。通过已知浓度的校准品进行校准绘制曲线，可以得出样本的浓度数值。,HISCL-5000的反应原理,化学发光酶免疫测定方法如下,HISCL-5000的测定方法,R1试剂,样本,孵育,R2试剂,孵育,1次脱磁清洗,R3试剂,2次脱磁清洗,孵育,R4试剂,R5试剂,检测,2STEP法,孵育,孵育,HISCL-5000的测定方法,R1试剂,样本,孵育,R2试剂,孵育,脱磁清洗,孵育,R4试剂,R5试剂,检测,1STEP法,孵育,HISCL-5000的测定方法,R1试剂,样本,孵育,R2试剂,孵育,R3试剂,脱磁清洗,孵育,R4试剂,R5试剂,检测,D-1STEP法,孵育,孵育,HISCL-5000的检测动作,样本的进样,Cuvette供给,R1试剂分注,样本的分注,R2试剂分注,1次脱磁清洗,R3试剂分注,2次脱磁清洗,R4试剂分注,R5试剂分注,发光检出,Cuvette废弃,当测定方法仅为2STEP法时,5min,10min,15min,0min,下面以HBsAg为例介绍一下检测原理,HISCL-5000的测定原理,结果的计算,校准曲线表示浓度和光子数之间的关系，通过测定已知浓度的样本，从获得的光量子数值近似做成，通过曲线的建立，测定样本的光量子数值可由曲线计算得出其浓度。,HISCL