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文档简介
双水相萃取相图的制作,1,实验目的,1.了解双水相萃取的原理2.掌握用浊点法制作双水相萃取相图的方法,2,实验原理,两种亲水性高聚合物或高聚合物与无机盐在水中会形成两个相,这是由于高聚合物的不相溶性或盐析作用而形成,但是只有达到一定浓度时,才能形成两相。两水相形成的条件和定量关系可用相图来表示,它是一根双节线,当成相组分的配比取在曲线的下方时系统为均匀的单项,混合后,溶液澄清透明,成为均相区;在曲线上方时,能自动分成两相,称为两相区,若配比取在曲线上,则混合后,溶液恰好从澄清变为浑浊。相图是研究双水相萃取的基础。,3,主要仪器,漩涡振荡器,微量滴管装置,电子天平,4,步骤,(1)PEG2000-硫酸铵双水相体系相图的测定1.取10%PEG2000溶液于三角瓶中2.用40%硫酸铵溶液装入滴定管中滴定至三角瓶中溶液出现浑浊,记录硫酸铵消耗的体积,加入1ml水使溶液澄清,继续用硫酸铵滴定至浑浊,重复7-8次记录每次硫酸铵消耗的体积,计算每次出现浑浊时体系中PEG和硫酸铵的浓度(W/V)3.以硫酸铵的浓度(W/V)为横坐标,PEG浓度为纵坐标,绘制出PEG2000-硫酸铵双水相体系图(2)PEG2000-硫酸铵双水相体系的配置根据相图中双水相区的PEG2000浓度和硫酸铵浓度,分别取适量的10%PEG2000溶液和硫酸铵溶液,混合均匀后以2000r/min离心后分相,得到双水相体系,5,(3)利用PEG2000-硫酸铵双水相体系萃取分离牛奶中的蛋白质取1ml牛奶装入上述双水相体系,搅拌军训,于500r/min离心5min,静置分层,分别量取上下相的体积,6,注意事项,清洗干净的滴定管必须试漏,试漏成功的滴定管要洗涤两次在接近滴定终点时候一定要每滴一滴,彻底混匀后再滴下一滴,7,实验结果,上面注意事项里面的两条我们小组没有注意到所以导致实验失败,希望
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