大肠杆菌ppt课件

,小组成员分工包升制作PPT冯宇讲解PPT李春雷查找并整理第一部分资料刘磊查找并整理第一、五部分资料王鹏查找并整理第二、三部分资料熊志江查找并整理第四部分资料,大肠杆菌（Escherichiacoli）,第二部分,遗传物质,第三部分,基因突变及修复,目录,第四部分,基因转移及重组,第五部分,研究应用,第一部分,概述,概述,一、形态特征：大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌，大小约0.4-0.7m2.0-3.0m，两端钝圆，多单独存在或成双，但不呈长链状排列。大多数菌株具有周生鞭毛而能运动，有的菌株具有荚膜或微荚膜，不形成芽胞，对普通碱性染料着色良好。,二、培养特性：大肠杆菌为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，最适生长温度37，最适生长pH7.2-7.4,伊红美蓝培养基上产生黑色带金属闪光的菌落,电镜下的大肠杆菌,注：产酸产气；+：阳性；-：阴性；+/-：大多数菌株阳性/少数阴性；V：种间有不同反应。,三、生化特性：,普通营养琼脂上生长24h后，形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色、中等大小菌落。,微生物资源数据库共享平台菌株保藏编号NKCCMRNK7.C7037,大肠杆菌在麦康凯培养基上长成红色菌落,概述,四、致病性：,五、微生物诊断：从可疑症状着手分析，再采集病变组织或者收集粪便或肠内容物，划线接种于麦康凯或伊红美蓝琼脂平板上，挑取可疑菌落同时接种于TSI琼脂和普通琼脂斜面，然后革兰氏染色、镜检形态，淘汰不符合者，最后做生化试验；也可用多重PCR法检测细菌的特异性基因。,概述,E.coli基因组中还包含有许多插入序列，这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的。利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造，使其中的某些基因发生突变或缺失，从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化，这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype)，把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。,遗传物质,遗传物质,二、主要基因型：,遗传物质,三、染色体：,基因突变及修复,大肠杆菌的SOS修复系统细胞损伤时，参与DNA修复的基因，包括切除修复基因（uvrA、uvrB、uvrC）、重组修复基因（recA）及其他基因（umuC、umuD）。OS修复主要通过增加切除修复酶和重组修复酶的含量，来增强对损伤DNA的修复。正常细胞中，LexA阻遏蛋白与lexA、recA、uvrA、uvrB、uvrC基因的操纵区结合，阻遏它们表达，只合成少量RecA蛋白和修复酶，修复零星的DNA损伤。大肠杆菌受到UV照射后，产生大量二聚体，出现大量单链DNA部位，与细胞内少量RecA蛋白结合，激活其蛋白酶功能，使LexA阻遏蛋白自我切割，并且促进DNA同源配对。,基因突变及修复,大肠杆菌甲基化介导的错配修复系统特异性不强，基本能修复DNA双链结构中任何轻微的损伤，包括错配、移码、碱基类似物的替代等。,基因突变及修复,大肠杆菌错配修复机制模式,步骤：,基因转移及重组,基因转移及重组,局限性转导：被转导的DNA片段仅仅是靠近染色体溶源化位点的基因。噬菌体：只转导gal和bio基因。携带gal基因的转导噬菌体称为dgal或dg，携带bio基因的转导噬菌体称为dbio或db。（d表示缺陷）80噬菌体：80整合部位靠近色氨酸基因（trp），可用80dt转导噬菌体对基因trp进行转导。,基因转移及重组,注：Holliday模型，是第一个被广泛接受的重组模型，它是通过要发生重组的2个DNA分子的2条单链在同一部位断裂，断裂的游离末端彼此交换形成异源双链