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文档简介

技能训练常用培养基的制备,熟悉培养基制备的基本程序会制备常用的培养基,实训目标,高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、等,仪器材料,方法步骤,（一）肉汤培养基（二）琼脂培养基（三）半固体培养基（四）血液琼脂培养基,制备培养基方法步骤,计算称量溶化调PH分装灭菌无菌检验备用,（一）肉汤培养基（二）琼脂培养基（三）半固体培养基（四）血液琼脂培养基,（一）肉汤培养基,1成分牛肉膏35g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。2制法将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后，加热溶解。矫正pH至7.47.6，过滤分装。置高压蒸气灭菌器内，121.3灭菌20min即成。3用途可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基的基础原料。供营养要求较高的细菌分离培养，亦可供溶血性的观察和保存菌种。,（二）固体琼脂培养基1计算：,1000ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。营养琼脂粉的量=31.315n/1000（g）其中：15代表一个平板需要营养琼脂约15ml；n代表要做的培养基平板的数量,2称量：,用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相应的蒸馏水的量，要尽量准确。,3溶化：,将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸23次。,4分装：倒平板或倒试管,若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15ml左右，以刚好覆盖平皿底为易。若做斜面培养基应倒入试管中，量为试管的1/3,包扎：,加塞后，试管通常每7支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，用线绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。以活结形式扎紧，以便使用时容易解开。用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。,灭菌时包牛皮纸,5灭菌：用高压灭菌器灭菌,包扎好，直立放入内筒中，在121.3灭菌20-30min。灭菌完毕后，将平板培养基拿出平放于桌面，凝固前勿动；将试管培养基摆成斜面，凝固前勿动。,6无菌检验：,随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小时，若无菌生长则为合格。,7备用：,将合格的培养基放入冰箱，在0-4中保存备用。,（三）半固体培养基,肉汤培养基中加入0.3%0.5%琼脂粉制成，用于菌种的保存或观察细菌的运动性。,（四）血液琼脂培养基,将灭菌的营养琼脂冷至4550，以无菌操作，加入5%10%的无菌血液（或脱纤维血），然后倾注平皿或分装试管制成斜面。,课后作业,1.写出实习报告；
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