9种氨基酸UPLC分析方法(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)_第1页
9种氨基酸UPLC分析方法(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)_第2页
9种氨基酸UPLC分析方法(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

9种氨基酸UPLC分析方法（异硫氰酸苯酯柱前衍生法）2013-09-05方法：HPLC基质：标准溶液应用编号：化合物：Asp（天冬氨酸） Glu(谷氨酸) Ser(丝氨酸) Gly(甘氨酸) His(组氨酸) Arg(精氨酸) Thr(苏氨酸) Ala(丙氨酸) Pro(脯氨酸) Tyr(酪氨酸) Val(缬氨酸) Met(蛋氨酸) Cys(胱氨酸) IIe(异亮氨酸) Leu(亮氨酸) Nle(正亮氨酸) Phe(苯丙氨酸) Trp(色氨酸) Lys(赖氨酸)固定相：Endeavorsil C18色谱柱/前处理小柱：Endeavorsil C18 1.8m 100 x 2.1mm样品前处理：1 溶液配制： 氨基酸储备液：称取一定量氨基酸标准品，用0.1 mol/l HCl水溶液溶解，配成氨基酸单标浓度为0.05 mol/l 氨基酸使用液：将储备液用0.1 mol/l HCl水溶液稀释，得到浓度为0.002 mol/l的氨基酸单标和混标，待衍生 0.1 mol/l HCl水溶液：量取8.3 ml浓盐酸，然后用纯水定容至1000 ml 异硫氰酸苯酯（PITC）溶液：将250 l异硫氰酸苯酯用乙腈定容至10 ml，得到0.2 mol/L异硫氰酸苯酯溶液 三乙胺溶液：将1.4 ml三乙胺用乙腈定容至10 ml，得到1.0 mol/L三乙胺溶液 0.1 mol/l HCl水溶液：量取8.3 ml浓盐酸，然后用纯水定容至1000 ml 2 标准溶液衍生化： 量取200 l氨基酸混合使用液，置于1.5 ml塑料离心管中，准确加100 l 1 mol/l三乙胺乙腈溶液和100 l 0.2 mol/l异硫氰酸苯酯乙腈溶液，混匀，室温反应1小时，然后加入正己烷400 l，旋紧盖子后剧烈振荡510 s，静置分层，取200 l下层溶液与800 l水混合，0.22 m针式过滤器过滤，待分析。色谱条件：色谱柱：Endeavorsil C18，1002.1 mm，1.8 m (Cat#:87003) 流动相： A：0.05 mol/L乙酸钠水溶液（冰乙酸调节pH至6.500.05） B：甲醇：乙腈：水=20：60：20（V：V：V） 流速：0.3 mL/min 柱温：35 检测器：UV 254 nm 进样体积：2.0 L文章出处：天津应用实验室关键字：天然氨基酸、Asp（天冬氨酸）、Glu(谷氨酸)、Ser(丝氨酸)、Gly(甘氨酸)、His(组氨酸)、Arg(精氨酸)、Thr(苏氨酸)、Ala(丙氨酸)、Pro(脯氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Val(缬氨酸)、Met(蛋氨酸)、Cys(胱氨酸)、IIe(异亮氨酸)、Leu(亮氨酸)、Nle(正亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、T
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 事务文书

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论