分子细胞遗传学新进展ppt课件.ppt

1,分子细胞遗传学新进展,2,传统的细胞遗传学,细胞遗传学主要研究染色体的亚显微结构和基因活动的关系,3,细胞周期的阶段,4,简介,60年代早期局限于计算染色体的数目粗略的将染色体按照大小和着丝粒位置进行区分(groupsAtoG)1970年显带技术的建立清楚的分辨出46条染色体,5,细胞遗传学的一般步骤,细胞培养使细胞停留在分裂中期低渗的方法使细胞膨大固定染色体，保留核酸将细胞滴到玻片上用显带染色技术进行染色在荧光显微镜下分析染色体数20个中期分裂相进行分析常规研究方法可区分400-600条带高分辨率研究方法可区分650条带,6,细胞遗传学技术的步骤,7,细胞遗传学技术的步骤,8,细胞遗传技术的步骤,9,有丝分裂中期的核型分析,10,染色体组核型分析,G-带(Giemsa)富含AT的区域颜色较深优点能看到整个基因组显示每一单个染色体缺点分辨率(5-10Mb)进行细胞培养其他会用到的核型分析技术R,Q,C,和NOR带,11,染色体异常数目改变,三倍体和四倍体非整倍体+21,+18,+13,XO,XXY,等,12,染色体异常结构异常,平衡改变易位和倒位不平衡改变缺失,扩增,环状染色体,和等臂染色体,13,倒位,14,扩增和环形染色体,15,染色体缺失,缺失看得见的识别起来相对容易微缺失看不见识别起来不是很容易,16,意义,为什么开展细胞遗传学分析?,17,(A)产前及产后遗传病,18,染色体异常的发生机率,出生婴儿0.6%先天性智力障碍（MR）患者23%先天性心脏病13%SAB夫妇5%死胎和围产期死亡胎儿6.0%自然流产(前三个月)60%,19,染色体异常在自发性流产中的发生率,20,唐式综合症在活产中的发生率及与孕妇年龄的关系,21,新生儿染色体异常发生率,22,唐氏综合症,21号染色体三体,95-97%多余的染色体来自母亲,唐氏综合症与母亲的年龄有关系,确切的病因不是很了解.活产新生儿发病率为1/800to1/1,100,唐氏综合症与文化、种族、社会阶层以及地理区域都没有必然的联系。智能较正常儿童低，认知困难，发育迟缓。他们也有很特殊的面貌，通常双眼距离较远、眼睛向上斜、鼻梁骨平坦，嘴、牙齿及耳朵均细小。肌张力低。,23,Turner综合症,1个x染色体的全部或者部分丢失，只发生在女性。是最常见的染色体异常导致的疾病(活产女性新生儿发病率大约为1/2500)身材矮小、卵巢不发育、性幼稚、蹼颈、肾脏和甲状腺有问题,骨骼畸形等生长激素治疗,雌激素替代治疗等,24,(B)白血病及实体瘤,25,肿瘤的分子生物学基础1、癌基因2、抑癌基因,26,27,基因功能与肿瘤,28,29,30,肿瘤中常见的癌基因种类,31,肿瘤中常见的癌基因扩增,32,常见的抑癌基因,33,白血病及淋巴瘤中常见的基因改变,34,基因组大小和分辨率,35,分子细胞遗传学荧光原位杂交技术(FISH)多色FISH(SKY和MFISH）比较基因组杂交(CGH）基因微阵列(aCGH),36,荧光原位杂交技术(FISH),37,荧光原位杂交（FluorescenceinsituHybridization，FISH）,基本原理：应用荧光染料标记探针DNA，变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNA杂交，在荧光显微镜下观察并记录结果。,生命科学中的“钓鱼”技术,38,39,40,centromere,telomeresubtelomere,locusspecific,wholechromosomepaint,41,FISH技术的特点,操作简便，探针标记后稳定，可与多种技术结合，可成功地帮助细胞遗传学家做出回顾性分析,方法敏感，能迅速得到结果，24小时就可以完成检测,人员培训较快,标本来源丰富，间期细胞，分裂中期细胞、分化或未分化细胞及死亡或存活的细胞皆可以被检测,42,FISH在白血病及实体瘤中的应用,43,（1）诊断,44,45,宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，仅次于乳腺癌。据世界范围统计，每年估计有46.6万左右的宫颈癌新发病例，其中80%的病例发生在发展中国家。近几年来，据一些国家和地区报道，宫颈癌的发病和死亡大致稳定，但局部有增长的趋势，特别是宫颈癌的年轻病例增加，宫颈腺癌的发病也趋于年轻化。在我国部分地区近年也出现了宫颈癌病人年纪年轻化趋势的报道,46,行为危险因素性生活过早、多个性伴侣、多孕多产、社会经济地位低下、营养不良及性混乱等生物学因素细菌、病毒和衣原体等各种微生物的感染,47,子宫颈癌,细胞学分级,48,鳞状细胞癌为主，约占95；腺癌仅为5左右；腺鳞癌少见，但恶性度最高，预后最差。,49,传统的宫颈癌检查及诊断程序,CervicalPapscreening,Normal,ASC-US,ASC-H,LSIL,HSIL,RepeatPap4to6months,or,HPVTesting,HPVnegative(high-risktype),HPVpositive(high-risktype),RepeatPap12months,Colposcopy,Nolesionseen,Cervicalpre-cancerorcancer,RepeatPapat6,12months,orHPVtestingat12months,Treat,50,传统巴氏细胞学涂片22)/BCR-ABL,t(4;11)/MLL-AF4,andt(1;19)/E2A-PBX1,93,Favorablerisk+4,+10,and+17ort(12;21)(TEL/AML1)Unfavorablerisk11q23(MLL)rearrangementsVeryunfavorableriskHypodiploidy(45chromosomes)ort(9;22)(BCR/ABL)Others,儿童急性淋巴细胞性白血病的预