分子伴侣在胰岛素生产中的应用PPT课件.ppt

此课件可编辑版，如对课件有异议或侵权的请及时联系删除！课件可编辑版，请放心使用！,.,分子伴侣理论在制造胰岛素中的应用,2,主要内容,胰岛素的生产胰岛素的质量控制探讨,3,胰岛素制造的历史进展,4,重组人胰岛素表达方法的进展,80年代初，A、B链分别表达，分别纯化80年代末：胰岛素原法90年代：分子伴侣理论的应用,5,A、B链分别表达法,6,胰岛素原法,7,胰岛素原法的缺点,工艺复杂复性率低：人胰岛素原有6个巯基要形成3个二硫键，有15种可能的组合，其中只有一种构象具有活性,8,人体内胰岛素表达图示,9,分子伴侣(MolecularChaperone),分子伴侣:是一类蛋白质,其功能是帮助新合成的蛋白质形成正确的二硫键及正确的构象。(全过程称为蛋白质复性)分子伴侣分为:分子间伴侣和分子内伴侣；二者区别:分子间伴侣和被复性的蛋白质没有化学键连接;而分子内伴侣则是和被复性的蛋白质通过共价键连在一起,待复性完毕后再切开。,10,甘李药业分子内伴侣理论在胰岛素生产中的应用,复性,融合蛋白,酶切,A链,B链,分子内伴侣,分子内伴侣,11,12,分子内伴侣在胰岛素和类似物生产中的作用,保护胰岛素在大肠杆菌内不被分解提高胰岛素表达量提高复性收率简化胰岛素和类似物的生产步骤,13,甘李公司生产工艺和国外公司的比较,国外公司工艺,无C肽胰岛素原融合蛋白,发酵,正确构象无C肽胰岛原纯品,胰岛素粗品,胰岛素纯品,复性,酶切,解离A、B链,纯化,甘李公司工艺,正确构象无C肽胰岛原粗品,纯化,共31步,共17步,14,DrugBiotechnologyRegulationeditedbyYuan-yuanH.Chiu,JohnL.GueriguianP221-262Production-ScalePurificationProcessesWalterF.ProutyLillyResearchLaboratories,EliLillyandCompany,Indianapolis,Indiana,引自,15,16,判别胰岛素质量的标准,通用标准（药典标准）纯度标准胰岛素制造过程中的金标准,17,18,判别胰岛素质量的标准,通用标准（药典标准）纯度标准胰岛素制造过程中的金标准,19,胰岛素制造的历史进展,20,用HPLC测定胰岛素效价误差小于5%（传统的小鼠惊厥法，误差20%）HPLC能检测出小于0.1%的杂质,分析型高效液相层析（HPLC）是胰岛素质量控制的最重要的工具,21,分析型HPLC,22,不同厂家胰岛素及类似物HPLC图谱比较原图谱,23,不同厂家胰岛素及类似物HPLC图谱比较8倍放大图谱,24,不同厂家胰岛素及类似物HPLC图谱比较80倍放大图谱,25,传统胰岛素纯度分类方法,单峰胰岛素单组分胰岛素,26,探讨,胰岛素价格与国家经济水平没有相关性不同剂型胰岛素的使用量与当地糖尿病治疗水平的相关性,27,重组人胰岛素在一些国家的零售价,跨国公司在各国的胰岛素销售价格和当地的经济水平无关系中国市场进口人胰岛素的价格和美国相近，但高于其他发展中国家5-6倍,28,埃及购买胰岛素发票,1埃镑1.6人民币,29,2005年第一季度天津海关胰岛素进口量,进口胰岛素制剂23.2吨，价值2519万美元分别比去年同期增长61%和84.6摘自中国医药报：2005.5.10,30,2003年中国胰岛素市场份额,2003IMSdata,31,2003年中国市场人胰岛素不同类别制剂市场份额（）,2003IMSdata,32,2003年上海市场人胰岛素不同类别制剂市场份额（）,2003IMSdata,33,2003年北京市场人胰岛素不同类别制剂市场份额（）,2003IMSdata,34,2003年底美国市场