奶粉中的三聚氰胺检测液相色谱质谱法

.,GB/T22388奶粉中的三聚氰胺检测液相色谱质谱法,2016.02.29,.,1性质,三聚氰胺：别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。分子式：C3N6H6、C3N3(NH2)3；分子量：126.12物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m；熔点：在常压下，354分解；升华温度：300；溶解性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性,.,化学性能,三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地板砖，厨房用具，防火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂,.,三聚氰胺检测原理（LC/MS/MS）,标准中：试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用液相色谱-质谱/质谱检测和确证，外标法本实验室用0.2mol/L高氯酸溶液提取，增加了“样品经0.2mol/L高氯酸溶液提取后加入10mL二氯甲烷萃取”,离心，取上层过柱，内标法定量，固相萃取净化步骤同标准。,.,检出限,HPLC/MS/MS：0.01mg/kgHPLC:2mg/kg,.,检测流程：,称样2.00g,准确加入0.2mol/L高氯酸溶液9.8mL、0.2g/mL三聚氰胺内标溶液0.2mL，均质，加入10mL二氯甲烷，振荡，4000r/min离心5分钟，准确移取5mL上清液过混合性阳离子交换固相萃取柱（用前用3mL甲醇、3mL水活化），分别用3mL水和3mL甲醇淋洗柱子，再用3.0mL5%氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液于50氮气吹干，准确加入乙腈+水（9+1）2.0mL，涡旋振荡，洗脱液用0.25m微孔滤膜过滤，上机测定。,.,流程图,.,标准曲线配制,.,3色谱条件,仪器型号：Agilent1200-6410LC/MS(08JL016)色谱柱：ACQUITYUPLCBEHHILIC1.7m流速：0.2mL/min；柱温：30；进样量：5L；流动相：A醋酸铵水B乙腈；梯度洗脱；IronSource：ESI+；Capillary：4kV；Fragmentor：105；deltaEMV：300；GasTemp：110；GasFlow：11L/hr；Nebulizer:35psi。,.,注意事项,每批检测样做样顺序为试剂空白、样品空白、样品加标、样品。加标回收：移取0.2mL，0.1g/mL标准溶液至样品中，相当于0.01mg/kg添加水平，加入0.2mL0.2g/mL内标工作液，初测加标要选同等基质的样品做空白，样品复测做平行样，复测时如没有同等基质的空白样品则直接在样品中加标，加标量为初测时样品中的含量3倍，且加入内标量也应与三聚氰胺含量相当，样品提取液在过固相萃取柱之前稀释到合适的范围，取稀释液过固相萃取柱，且应保证最终上机工作液中内标的含量为10.0n