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文档简介

-,1,第二章克隆技术,(一)无性繁殖,种类:1.草履虫、变形虫的分裂生殖,2.根霉、青霉的孢子生殖,3.水螅、酵母菌的出芽生殖,4.草莓、马铃薯的营养生殖:嫁接、扦插,不经过异性生殖细胞的结合,直接由母体产生下一代的繁殖方式叫无性繁殖。,特点:子代个体保持了亲本的一切性状一次产生的后代数量大,可以迅速扩大种群数量变异类型少,不利于种群的进化,母体,无性生殖细胞或幼体,成体,有丝分裂,知识回忆,繁殖的类型:,细菌通过分裂生殖20分钟繁殖一代,分裂生殖,海葵,水螅,芽体,母体,植物枝条扦插繁殖,富贵竹插枝即活,仙人掌每块落地就生根,(二)有性生殖:,双亲,两性生殖细胞,合子,新个体,特点:子代具有双亲的遗传特性繁殖的速度比较慢产生更多的变异性,有利于种群的进化,经异性生殖细胞的结合,产生合子,由合子发育成下一代的繁殖方式叫有性繁殖。,知识回忆,-,12,第一节什么是克隆,克隆羊“多利”,个体通过无性繁殖可连续传代并形成群体,这样的群体称为无性繁殖系。克隆是英文“clone”的音译,就是指无性繁殖系。,-,14,一、无性繁殖与克隆,只要不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合,只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代分子、细胞或个体,就是无性繁殖,即克隆。,分子水平基因克隆,细胞水平细胞克隆,个体水平个体克隆,克隆的层次:,目的基因在受体细胞内克隆,DNA复制,1、分子水平,重组质粒,受体细胞,基因克隆是指某种目的基因的复制、分离过程。,-,16,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,2、细胞水平,细胞克隆技术在利用杂交瘤制备单克隆抗体的操作中得到充分运用。,2.制备过程:,细胞水平的克隆实例,基因克隆和细胞克隆是现代生物技术中的关键技术,在基础科研、遗传育种和肿瘤生物治疗等方面广泛应用。,克隆就是指一种通过单个细胞,特别是来自特定个体的单个细胞进行无性繁殖,从而产生新个体的过程。如:植物组织培养技术、克隆羊“多莉”的产生,3、个体水平,一、克隆的层次:,1、在分子水平上2、在细胞水平上3、在个体水平上,重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增,再用某探针选取、钓取目的基因。,单克隆抗体:利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和能产生抗体的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,再去培养,筛选到杂交瘤细胞系。,参见P6页图1-4,基因克隆,细胞系的培养(制备单克隆抗体),繁殖出生物个体,植物组织培养,原理:植物细胞全能性,组织培养的过程,(无菌)切下根尖,你知道克隆羊Dolly(多莉)的诞生过程吗?,多利的一生,姓名:多利性别:雌种族:哺乳纲、羊科、绵羊生日:1996年7月5日出生地:苏格兰基因父亲:无基因母亲:一只芬兰白绵羊线粒体母亲:一只苏格兰黑脸羊生育母亲:另一只苏格兰黑脸羊进入社交圈时间:1997年2月23日子女:生育6名,存活5名死亡:2003年2月14日,-,24,细胞核移植,C母绵羊子宫,胚胎移植,多莉羊的培育过程:,胚胎细胞克隆,体细胞克隆,重组细胞,早期胚胎,另一头苏格兰黑面母羊C子宫,克隆绵羊“多莉”,芬兰白面母羊(A)乳腺细胞核,苏格兰黑面母羊(B)去核卵细胞,细胞核移植,胚胎移植,二、克隆技术的发展:,微生物克隆时期遗传工程克隆时期个体水平上的克隆时期,DNA克隆或基因克隆,植物克隆、动物克隆,细菌的繁殖等,-,27,1996年,体细胞克隆羊“多莉”,1986年,胚胎细胞克隆羊“津生”,动物克隆:由胚胎细胞克隆到体细胞克隆的发展过程,动物的胚胎细胞克隆是指用胚胎细胞核移植的方法,以克隆出新的个体,是动物克隆技术的主要方法之一。该技术以胚胎细胞作为供体提供细胞核,移植到准备好的去核卵细胞,让该卵母细胞质和导人的胚胎细胞核融合、分裂、发育为胚胎。把该胚胎移植入一只动物的子宫,让其妊娠产仔,克隆的原意是无性繁殖系,根据这一含义,克隆动物就是不经过生殖细胞的结合(受精)而直接由体细胞获得新的个体。因此,胚胎细胞克隆不属于严格意义上的动物个体克隆。,为什么胚胎细胞克隆不属于严格意义上的动物个体克隆?,我们说的那种正统的克隆是和母体一模一样的,出现这种情况是因为用母体的体细胞直接克隆分化生长成的.但这个目前科技还达不到.我们常说的克隆羊,牛,其实不是严格意义上的克隆,是用一动物的体细胞的细胞核,再用一只动物的去掉细胞核的卵细胞,然后将体细胞的细胞核导入去核的卵细胞中,形成重组细胞,再移植入另一只动物的子宫,最后产出幼体.,重组细胞,早期胚胎,另一头苏格兰黑面母羊C子宫,克隆绵羊“多莉”,芬兰白面母羊(A)乳腺细胞核,苏格兰黑面母羊(B)去核卵细胞,三、克隆的条件:,从理论

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