温度对中华鳖发育及性别分化的影响

,温度对中华鳖发育及性别分化的影响,目录,1、课题意义2、国内外发展研究进展3、研究目标、内容及预期结果4、实验材料、仪器和试剂5、试验方法6、进度安排7、可行性分析8、参考文献,中华鳖（TrionyxSinensis），俗称甲鱼，营养丰富，肉味鲜美，又是珍贵的药材，其成分含动物胶、角蛋白、维生素D及碘等，具有滋阴清热、平肝益肾及消於的功能。对于雄性甲鱼其生长速度较快，裙边较雌性宽，营养价值则更为丰富。本课题从温度这一因素研究其对中华鳖性腺分化发育的影响，可为雄性化苗种的培育提供技术支持。,1、课题的意义,2、国内外发展研究进展,关于中华鳖的性别决定，国内外曾有人做过相关研究，但结果却不尽相同。阮成旭的研究发现，孵化温度在32时中华鳖雄性比例能达到72.1%，而27时雄性比例却只有42.3%。朱道玉的研究也证实，在32条件下孵化中华鳖受精卵时，出壳的雄性比例可达88%，雌性率在24孵化条件下最高，可达96%，并且在一定温度范围内雄性率随温度升高而升高。巫旗生等用300枚受精卵分6个温度梯度进行研究，结果显示，中华鳖可通过控制孵化温度来影响后代稚鳖性别比例，雄性所占比例随温度升高而上升。聂刘旺的研究结果却与朱道玉等人的研究所得出的规律相反，发现中华鳖的性比受孵化温度影响为MF型，即高孵化温度产雌性，低孵化温度产雄性。,3、研究目标、内容及预期结果,分别用高温和低温处理正在进行性腺分化的中华鳖受精卵，探究孵化温度对性别决定及性腺分化速度之间的关系。1、将鳖卵分别放置于27和32的恒温箱中孵化，并保持一定的湿度；2、待性腺分化结束后，用组织切片的方法观察孵化后的性腺，鉴定性别，统计雌雄数目。预期低温处理下雌性所占比例较高，高温孵化后雄性所占比例高于雌性，且高温孵化时其性腺分化所需时间较短。,4、实验材料、仪器和试剂,材料中华鳖受精卵40枚，直径范围在1.52.0cm，卵重范围在35g。仪器与试剂Bouin氏固定液，带式苏木精，0.5伊红，二甲苯，梯度乙醇，中性树胶，蒸馏水。显微镜，数码相机，切片机，电热恒温干燥箱、塑料沙盘、解剖器材、载玻片、盖玻片、恒温培养箱。,分两组进行孵化，每组20枚受精卵。,5、试验方法,分别在27和32恒温箱内培养。（空气湿度控制在85左右，沙湿度1015）,分化结束后，解剖取性腺并作石蜡切片（固定冲洗脱水透明浸蜡包埋切片染色拍照观察）,统计雌雄数、计算雌雄比，整理分析数据,6、进度安排,7、可行性分析,实验相关的仪器设备及试剂药品已具备；本人基本上熟悉了实验流程与实验相关仪器的操作；通过各位老师以及师兄师姐的指导和自己的努力，能完成整个实验。,8、参考文献,贺斌，龟鳖类温度依赖型性别决定机制的研究进展，动物学杂志2009，44（5）：147152楼允东，温度在水产动物性别控制中的作用，上海水产大学学报，2008，17（4）：481485朱道玉，稚鳖的性别鉴定，河北大学学报（自然科学版），2007，27（5）：518520朱道玉，中华鳖的性别决定，动物学杂志，2000，35（6）：3738聂刘旺，中华鳖的性别决定机制，应用与环境生物学报，2001，7（3）：258261朱道玉，中华鳖性别决定敏感期的研究，菏泽学院学报，2006,28（2）：8284朱道玉，中华鳖性腺的发生与发育研究，水生生物学报，20