化学发光免疫分析PPT课件

-,1,化学发光免疫分析技术与临床应用,-,2,化学发光免疫检测技术起源,Halman在1977年基于放射免疫分析的基本原理，将酶的化学发光与免疫反应结合起来，建立了化学发光免疫分析方法。(Chemiluminescenceimmunoas),-,3,-,4,什么是化学发光？,人体内的某些化合物分子被氧化后，可以形成激发态并返回基态同时发射光子，这就是化学发光。化学发光免疫检测技术是利用发光信号测量仪器测量光量子的产额。该技术可以有效的消除样本的本底干扰，消除样本对光信号的散射，从而获得更高的检测灵敏度。,-,5,化学发光免疫分析原理：,-,6,免疫反应系统：,将发光物质（在反应剂激发下生成激发态中间体）直接标记在抗原（化学发光免疫分析）或标记抗体（免疫化学发光分析）上，或用酶作用于发光底物。,-,7,化学发光分析系统：,利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时发射出光子（hv)，利用发光信号测量仪测量光量子的产额，就可测知体内某些微量生物活性物质的含量。,-,8,化学发光免疫分析类型：,根据标记物的不同分为三大类：1、化学发光免疫分析2、化学发光酶免疫分析3、电化学发光免疫分析,-,9,化学发光免疫检测技术：优点：安全，灵敏度高（10-15g/ml），稳定性好，重复性较佳，结果漂移小，线性较好，准确度高，操作方便，试剂货架期长（半年1年），浪费少，出结果快速。缺点：仪器价格昂贵，试剂成本较高，目前有些检测项目不能用化学发光检测，待开发。,-,10,化学发光技术与其他免疫分析技术比较：免疫诊断技术在经历了放射免疫法、酶标免疫法、免疫荧光法等方法后，发展到今天，化学发光技术的出现并临床应用，为现代医学免疫诊断技术的发展奠定了一个划时代的里程碑。,-,11,.,-,12,2、酶标记免疫分析缺陷：由来已久，但是始终没有能够替代放射免疫。这种依靠比色法或偏振光法的检测技术所受的干扰因素太多，甚至试管的形状的变化都会影响实验结果，灵敏性、稳定性、重复性均较差（可测灵敏度为10-8g/ml）。,-,13,3、荧光免疫分析技术缺陷：利用特定波长的入射光将分子转换到激发态，然后分子回到基态并发射光子。但有以下干扰因素：1）血清样本中存在内源性荧光带，会增强非特异性本底荧光；2）样本对荧光光信号的散射也干扰实验结果。,-,14,化学发光免疫检测技术临床应用：1、甲状腺功能类：T3、T4、THS、FT3、FT4、rT3、TG、T-PO新生儿筛查：T4sTSH2、性腺激素类：HCG、-HCG、FSH、LH、E2、E3、PRL、P、T、GH等3、肿瘤检测：CEA、AFP、Fe、PSA、CA125、CA153、CA199CA50、CA211、CA724,-,15,4、心血管：CK-MB、BNP、Tn-I、Myoglobin5、贫血类：铁蛋白、ViteB12、叶酸6、药物浓度：地高辛、洋地黄、托普霉素可马西平、苯巴比妥、等7、糖尿病及代谢：胰岛素、C-肽、PTH8、过敏源类：过敏源筛选、总过敏源9、传染病：肝炎系列、风疹、弓形体10、其他：皮质醇、还有很多待开发项目。,-,16,心血管系统:,如何能,更快,更准确,更全面的,诊断AMI,-,17,时心电图并不能典型归类,诊断急性心肌梗塞有一定难度,一半有不稳定胸口窒息痛的病人，入院时心电图并不典型。,病人再发梗塞诊断困难,导致不能及时诊断AMI,延误及时治疗、护理,临床需要,尽早准确诊断AMI方法,-,18,肌肉组织,心肌,心肌细胞特异性标志,肌钙蛋白,I,C,T,肌钙蛋白I,释放入血,心肌坏死,（氨基酸顺序40差异）,-,19,心肌细胞,肌红蛋白,肌酸激酶MB,心肌坏死,释放入血,（含量大）,血液浓度明显升高,(CK-MB),-,20,654321,04812162024487296h,肌红蛋白,CK-MB,肌钙蛋白,浓度,急性心肌梗塞后各项指标变化,-,21,肌红蛋白,升高,高峰,回落,肌酸激酶MB,肌钙蛋白I,1-2h,4-8h,6-8h,5-12h,10-24h,12-24h,18-30h,48-72h,5-7d,-,22,肌红蛋白的临床意义,早期诊断,特异性低,灵敏度高,急性心梗后最早(1-2h)出现的标记,最早能排除非急性心梗,阴性预测率为99%,体内周期短，对再发梗塞特别灵敏,肌红蛋白测定能有效分辨非急性心梗，使急性心梗病人能尽早得到治疗.,有效观察溶栓疗效,-,23,肌钙蛋白I的临床意义,诊断急性心肌梗塞特异性98%,特异性强、确诊率高,灵敏度低,急性心梗发病后6h才出现，应与肌红蛋白一同使用,肌钙蛋白I升高即可确诊为急性心肌梗塞，及时得到治疗,体内周期长，对外地病人延误求诊亦能诊断,对极轻微的心肌创伤都能检出,-,24,胸痛,ECG,发病,肌钙蛋白I,肌红蛋白CK-MB,急性心梗,+,+,+,8h,随访,+,再发心梗,-,25,肌红蛋白,注意事项,肌酸激酶MB,骨骼肌损伤肌红蛋白升高,肾功能衰竭CK-MB增高,-,26,甲状腺功能系列诊断：,T3T4TSHTSH-3,FrT3FrT4TupT-poAb,-,27,诊断各种甲亢必须具备的仪器设备:1、甲状腺131-I摄取率测定仪2、各种放射免疫测定仪或各种全自动发光免疫测定仪3、甲状腺功能显像设备：（SPECT、照相仪）,-,28,甲亢正确诊断（特别是首诊）1、临床症状、体征。2、实验室检查：T3、T4、FT3、FT4、sTSH或uTSH、TMAb、TGAb、TPOAb、TRAb3、131-I摄取试验是必查项目只靠临床症状、体征及实验室检查无法鉴别：碘甲亢、亚甲炎甲亢、亚急性淋巴细胞性甲炎甲亢、慢甲炎甲亢和医源性甲亢。治疗和处理是完全不同的。,-,29,-,30,目前临床上靠一张甲状腺功能检查单（T3、FT3、T4、FT4增高和sTSH降低）诊断甲亢是不正确的，化验单只证明患者血中甲状腺激素增多（甲状腺毒症），而碘甲亢、亚甲炎甲亢、亚急性淋巴细胞性甲状腺炎甲亢、慢性淋巴细胞性甲状腺炎、医源性甲亢等靠临床症状、体征及化验检查是无法区分的，因此，首诊病人必须做131-I摄取试验才不会造成误诊。,-,31,-,32,-,33,甲状腺炎扫描图,-,34,正常甲状腺扫描图,治疗1个半月后,-,35,治疗后检测结果显示各项指标正常,-,36,治疗后恢复正常,-,37,-,38,-,39,-,40,-,41,-,42,-,43,临床常见的甲状腺疾病种类：1、甲亢：大概分为13种，三大类。2、甲减：分为原发性、继发性。3、甲状腺炎：分5种。4、甲状腺肿瘤：良性、恶性。5、甲状腺肿：青春期、结节性甲肿。6、TH不敏感综合征：三大类。,-,44,甲状腺激素不敏感综合症：,一、全身型：1、甲减型T3、T4、TSH2、代偿型T3、T4、TSH二、垂体型：甲亢症状明显：T3、T4、TSH三、外周选择型：T3、T4、TSH（正常）临床甲减症状,-,45,-,46,-,47,-,48,-,49,-,50,-,51,-,52,-,53,-,54,-,55,-,56,-,57,-,58,-,59,-,60,-,61,-,62,-,63,总之，化学发光免疫检测技术（ChemiluminesentImmunoassay,CLIA）是继酶免技术（EIA）、放免技术（RIA）、荧光免疫技术（FIA）和时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）之后发展的一项新兴高度敏感的微量测定技术。,-,64,其具备以下特点：高度敏感，极限达10-17g/mL，远高于RIA、EIA、FIA。特异性强，重复性好C.V.5。测定范围宽，可达7个数量级。试剂稳定性好，无污染有效期612月。操作简单，自动化、半自动化程度高。,-,65,目前医