药物分析基础知识

药物分析基础知识,药学部劳海燕,主要内容,一、药典知识二、药物分析基础质量标准工作程序统计学知识分析方法验证三、常用药物分析技术1色谱法2光谱法,一、药典知识及名词术语,药典(Pharmacopoeia)是一个国家记载药品标准、规格的法典，一般由国家药典委员会组织编纂、出版，并由政府颁布、执行，具有法律约束力。中国药典2005版已于05年7月1日正式执行。中国药典由凡例、正文、附录、索引四部分组成1.一部正文为“药材及饮片”“植物油脂和提取物”“成方制剂及单味制剂”三部分。2.二部正文分成“正文品种第一部分”（原料与制剂）和“正文品种第二部分”（辅料）。3.生物制品分列为药典三部。,各国最新版药典,1.第25版USP美国药典-NF第版美国国家处方集2.2005年版ChP中国药典3.2000年版BP英国药典4.第14改正版JP日本药局方5.第4版Ph.Eur欧洲药典下列哪国药典的药品质量标准内容包括“作用与用途”（C）。A.JPB.USPC.BPD.Ph.EurE.NF中国药典主要由哪几部分内容组成（C）。A.正文、含量测定、索引B.凡例、制剂、原料C.凡例、正文、附录D.前言、正文、附录E.鉴别、检查、含量测定,例题,药典所指的“精密称定”，系指称取重量应准确至所取重量的BA.百分之一B.千分之一C.万分之一D.十万分之一E.百万分之一,中国药典收载的物理常数有（ABCE）。A.熔点B.比旋度C.相对密度D.晶型E.吸收系数中国药典规定，精密称取“2.0”系指（C）。A.称取重量可1.52.5gB.称取重量可为1.952.05gC.称取重量可为1.9952.005gD.称取重量可为1.99952.0005gE.称取重量可为13g,例题,对照品（E）。A.用作色谱测定的内标准物质B.配制标准溶液的标准物质C.用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质D.浓度准确已知的标准溶液E.用于鉴别、检查、含量测定的标准物质（按干燥品计算后使用）,标准品（C）。A.用作色谱测定的内标准物质B.配制标准溶液的标准物质C.用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质D.浓度准确已知的标准溶液E.用于鉴别、检查、含量测定的标准物质（按干燥品计算后使用）,溶质1g（mL）能在溶剂不到1mL中溶解（A）。A.极易溶解B.几乎不溶或不溶(1g或ml/在1万ml不能完全溶）C.微溶(1g或ml/在100-1000ml溶）D.溶解(1g或ml/在10-30ml溶）E.略溶(1g或ml/在30-100ml溶）恒重的定义及有关规定（BC）。A.供试品连续两次干燥后的重量差值在0.5mg以下的重量B.连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的重量C.干燥至恒重的第二次及以后各次称重应在规定条件下继续干燥1小时后进行D.炽灼至恒重的第二次及以后各次称重应在规定条件下炽灼20分钟后进行E.干燥或炽灼3小时后的重量,药品储存条件,1.阴凉处（不超20）2.避光（用不透光容器包装）3.冷处（2-10）4.密闭（防尘土及异物进入）5.凉暗处（避光并不超20）6.密封（防风化、吸潮、挥发或异物进入）7.熔封或严封（防空气、水分进入并防污染）,GMP、GLP、GCP,GoodManufacturingPractice药品生产质量管理规范是药品生产过程中，用科学、合理、规范化的条件和方法来保证生产优良药品的一整套系统的、科学的管理规范，是药品生产和管理的基本准则。GoodLaboratoryPractice的药物非临床研究质量管理规范亦称为临床前研究，用于评价药物的安全性，在实验室条件下，通过动物实验进行非临床(非人体)的各种毒性实验。GoodClinicalPractice药物临床试验管理规范，药品临床试验是指任何在人体(病人或健康志愿者)进行的药品系统性研究，以证实或揭示试验用药品的作用及不良反应等。目的在于保证临床试验过程的规范，结果科学可靠，保证受试者的权益并保障其安全。,二、药物分析基础1.药品质量标准,药品质量标准的制订原则（ABCD）。A.技术先进，检验方法要求准确、灵敏、简便、快速B.质量第一，确保用药安全有效C.要有针对性D.在保证质量的前提下，根据生产实际水平E.符合我国政治、经济发展的需要药物的性状项下包括（ABCD）。A.外观B.臭C.溶解性D.味E.剂型,例题,药品质量标准的基本内容包括（E）。A.凡例、注释、附录、用法与用量B.正文、索引、附录C.取样、鉴别、检查、含量测定D.凡例、正文、附录E.性状、鉴别、检查、含量测定、贮藏,中国药典收载的药品质量标准的检查项下包括（BCD）。A外观的检查B.安全性的检查C.纯度的检查D.有效性的检查E.物理常数的检查药品质量标准制订内容包括（ABCDE）。A.名称B.性状C.鉴别D.杂质检查E.含量测定、类别、储藏,2.药品检验工作基本程序,药品检验工作程序（C）。A.性状、检查、含量测定、检验报告B.鉴别、检查、含量测定、原始记录C.取样、检验（性状、鉴别、检查、含量测定）、记录与报告D.取样、鉴别、检查、含量测定E.性状、鉴别、含量测定、报告,空白试验（B）。A.流体药药物的物理性质B.不加供试品的情况下，按样品测定方法，同法操作C.用对照品代替样品同法操作D.用作药物的鉴别，也可反映药物的纯度E.可用于药物的鉴别、检查和含量测定,例题,检验报告的内容应包括（ABCE）。A.检验目的B.检验项目C.检验依据D.检验步骤E.检验结果,3.药物分析中的统计学知识,1）误差误差是指实际观察值与客观真值之差、样本指标与总体指标之差。按来源误差可分为系统误差和随机误差（或称偶然误差）。按计算方法不同可分为绝对误差相对误差。（1）系统误差在实际观测过程中，由于仪器未校正、测量者感官的某种障碍、医生掌握疗效标准偏高或偏低等原因，使观察值不是分散在真值两侧，而是有方向性、系统性或周期性地偏离真值。这类误差可以通过实验设计和技术措施来消除或使之减弱，但不能靠概率统计办法来消除或减弱。按来源分为方法、试剂、仪器、操作误差。,（2）随机误差是指排除了系统误差后尚存的误差。它受多种因素的影响，使观察值不按方向性和系统性而随机地变化。随机误差服从正态分布，可以用概率统计方法处理。在随机误差中，最重要的是抽样误差。随机误差中还包括重复误差。控制重复误差的手段主要是改进测定方法，提高操作者的熟练程度。,例题,偶然误差（A）A.随机误差或不可定误差B.由于仪器陈旧使结果严重偏离预期值C.误差在测量值中所占的比例D.测量值与平均值之差E.测量值与真值之差,相对误差是（C）A.随机误差或不可定误差B.由于仪器陈旧使结果严重偏离预期值C.误差在测量值中所占的比例D.测量值与平均值之差E.测量值与真值之差相对标准偏差（B）A.系统误差B.RSDC.绝对误差D.定量限E.相关,例题,具有统计规律，通过增加平行试验次数可以减少误差（E）。A.精密度B.准确度C.定量限D.相对误差E.偶然误差与药物分析有关的统计参数包括（ACDE）。A.标准偏差B.限量C.回归D.相对标准偏差E.相关,可定误差是（A）。A.系统误差B.RSDC.绝对误差D.定量限E.相关方法误差（A）。A.系统误差B.RSDC.绝对误差D.定量限E.相关,一组测得值彼此符合的程度（A）。A.精密度B.准确度C.定量限D.相对误差E.偶然误差,RSD表示（D）A.回收率B.标准偏差C.误差度D.相对标准偏差E.变异系数,有效数字与数字的修约,0.119与9.678相乘结果为（A）A.1.15B.1.1516C.1.1517D.1.152E.1.1516.5345修约后保留小数点后三位（C）。A.6.535B.6.530C.6.534D.6.536E.6.531,用分析天平称得某物0.1204g，加水溶解并转移至25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，该溶液每mL含溶质为（E）。A.0.00482gB.4.810-3gC.4.82mgD.4.8210-3gE.4.816mg,例题,系统误差（B）。A.随机误差或不可定误差B.由于仪器陈旧使结果严重偏离预期值C.误差在测量值中所占的比例D.测量值与平均值之差E.测量值与真值之差,表示样品含量测定方法精密度的有（ACE）。A.变异系数B.绝对误差C.相对标准差D.误差E.标准差,4.药品质量标准分析方法的验证指标,）准确度）精密度）专属性）检测限）定量限）线性）范围）耐用性,分析方法验证的指标有（ABCE）A.精密度B.准确度C.检测限D.敏感度E.定量限,）准确度指分析方法所得的测定结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率表示回收率测得值加入量下列统计量可用于衡量测量值的准确程度的有（ABC）A.误差B.相对误差C.回收率D.相关系数E.精密度,）精密度在规定测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。一般用标准偏差或相对标准偏差来表示。相对标准偏差又称变异系数CVS/X100%，X0,表示样品含量测定方法精密度的有（ACE）。A.变异系数B.绝对误差C.相对标准差D.误差E.标准差用于原料药或成药中主药含量测定的分析方法验证不需要考虑（A）。A.定量限和检测限B.精密度C.选择性D.耐用性E.线性与范围,例题,表示该法测量的重现性（A）A.精密度B.准确度C.定量限D.相对误差E.偶然误差测得值与真值接近的程度（B）A.精密度B.准确度C.定量限D.相对误差E.偶然误差,回收率属于药物分析方法验收证指标中的（B）A.精密度B.准确度C.检测限D.定量限E.线性与范围,）专属性指在其他组分可能存在的条件下，分析方法能准确地测出被测组分的能力。）检测限指在规定的实验条件下，分析方法所能检出被测组分的最低浓度或最低量。（仪器分析：信噪比：或：）定量限指分析方法可定量测定样品中测定组分的最低浓度或最低量（有一定的精密度、准确度要求，信噪比：）。,检测限与定量限的区别是（D）。A.定量限的最低测得浓度应符合精密度要求B.定量限的最低测得量应符合准确要求C.检测限是以信噪比（2：1）来确定最低水平，而定量限是以信号噪比（3：1）来确定最低水平D.定量限规定的最低浓度应符合一定的精密度和准确度要求E.检测限以ppm、ppb表示，定量限以%表示,）线性指一定的范围内的检测结果和样品中测定组分的浓度或量成线性关系的能力。,在回归方程y=a+bx中（D）。A.a是直线的斜率，b是直线的截距B.a是常数值，b是变量C.a是回归系数，b为01之间的值D.a是直线的截距，b是直线的斜率E.a是实验值，b是理论值计算出变量之间的定量关系（D）。A.检测限B.定量限C.相关系数D.回归E.精密度相关系数r（ADE）A.是介于0与1之间的值B.当r=1，表示直线与y轴平行C.当r=1，表示直线与x轴平行D.当r0时为正相关E.当r0时为负相关,三.药物分析方法,1、色谱法薄层色谱法高效液相色谱法气相色谱法2、光谱法紫外可见分光光度法荧光分析红外分光光度法原子吸收分光光度法,1.色谱法,色谱法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。色谱法又可根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。,吸附色谱法是利用被分离物质在吸附剂上吸附能力的不同，用溶剂或气体洗脱使组分分离；常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等。分配色谱是利用被分离物质在两相中分配系数的不同使组分分离；其中一相被涂布或键合在固体载体上，称为固定相,另一相为液体或气体,称为流动相。常用的载体有硅胶等。离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上交换能力的不同使组分分离；流动相为水或含有机溶剂的缓冲液。分子排阻色谱法又称凝胶色谱法，是利用被分离物质分子大小的不同导致在填料上渗透程度不同使组分分离；常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶等，根据固定相和供试品的性质选用水或有机溶剂作为流动相。,比移值Rf-组分的迁移距离与展开剂的迁移距离之比,公式Rf=原点至斑点中心距离/原点至溶剂前沿的距离液相色谱中化学键合相使用PH范围是（E）。A.210B.114C.38D.110E.28比移值（A）。A.组分的迁移距离与展开剂的迁移距离之比B.测量物质的质量与温度C.检测器与光源成90角D.测量样品与参比物之间的温差随温度的变化E.横坐标以-1表示，纵坐标以T%表示,1）薄层色谱法,薄层色谱法，系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进行扫描，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。,例题,TCL法鉴别药物（D）。A.比较供试品与对照品的死时间B.比较供试品与对照品的保留时间的比值C.比较供试品与对照品的斑点大小D.比较供试品与对照品的比移值E.比较供试品与对照品的斑点颜色,2）气相色谱法GC,气体为流动相的色谱法称为气相色谱法样品中各组分在固定相和载气间分配系数不等，按大小顺序被载气带出色谱柱，分配系数小先流出，分配系数大后流出。色谱峰三项参数：峰高或面积（定量）、峰位（保留值定性）、峰宽（柱效）,气相色谱法流动相为气体，称为载气，色谱柱分为填充柱和毛细管柱两种，填充柱内装吸附剂、高分子多孔小球或涂渍固定液的载体。毛细管柱内壁或载体经涂渍或交联固定液。注入进样口的供试品被加热气化，并被载气带入色谱柱，在柱内各成分被分离后，先后进入检测器，色谱信号用记录仪或数据处理器记录。检测器为氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温，并不得低于100，以免水气凝结，通常为250350。系统适用性试验、测定法同高效液相色谱法项下规定。,3）高效液相色谱法,高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。,系统适用性试验,(1)色谱柱的理论板数(n)在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR和半峰高宽(Wh/2),按n=5.54(tRWh/2)(2)分离度定量分析时，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度应大于1.5。(3)重复性取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。(4)拖尾因子为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定,T应在0.951.05间。3.测定法采用峰面积法或峰高法(1)内标法(2)外标法,例题,高效液相色谱仪常用的检测器是（A）。A.紫外检测器B.红外检测器C.热导检测器D.电子捕获检测器E.光焰离子化检测器高效液相色谱法用于含量测定时，对系统性能的要求()A.理论塔板数越高越好B.依法测定相邻两峰分离度一般须大于1C.柱长尽可能长D.理论塔板数、分离度等须符合系统适用性的各项要求，分离度一般须大于1.5,一混合物的组分A的B在25.0Ccm长的色谱柱上的保留时间分别为16.40min和17.63min，而两个色谱峰宽分别是1.11min和1.21min，则其分离度R等于（A）。A.1.06B.1.60C.0.95D.1.50E.1.78分离度R=2（TR2-TR1）/（W1+W2）,2.光谱法1）荧光分光光度法,物质接受紫外或可见光照射后，能发出波长较激发光长的荧光。利用荧光光谱定性、定量分析的方法称荧光分析法。,例题,荧光法测定的是（A）。A.发射光的强度B.激发光的强度C.吸收光的强度D.光的强度E.紫外光光源的强度,发射光谱（E）。A.紫外线分光光度法B.红外线分光光度法C.直接电位法D.X-衍射光谱E.荧光光谱激光光谱（E）。A.以发射光的小长对荧光强度作图B.以荧光波长对透光率作图C.以荧光波长对吸收度作图D.以激发光的波长对吸收强度作图E.以激发光的波长对荧光强度作图,2）紫外可见分光光度法,（1）物质接受紫外或可见光照射后，分子吸收光能量，外层电子由低能量的基态转变为高能量的激发态的过程称为跃迁，产生紫外可见吸收光谱。（2）利用紫外可见吸收光谱定性、定量分析的方法称紫外可见分光光度法。（3）波长200-400nm紫外光区；400-760nm可见光区（4）光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律）,例题,BeerLambert定律A=lgT=ELC中，A.T.E.L分别代表（D）。A.A吸收度T光源E吸收系数L液层厚度（cm）B.A吸收度T透光率E吸光度L液层厚度（cm）C.A吸收度T温度E吸收系数L液层厚度（cm）D.A吸收度T透光率E吸收系数L液层厚度（cm）E.A吸收度T透光率E吸收系数L液层厚度（mm）,BeerLambert定律说明，一定条件下（E）。A.透光率与溶液浓度、光路长度成正比关系B.透光率的对数与溶液浓度、液层厚度成正比关系C.吸收度与溶液浓度、液层厚度成指数函数关系D.吸收度与溶液浓度成正比，透光率的负对数与浓度成反比E.吸收度与溶液浓度、液层厚度成正比关系,例题,紫外测定中的空白对照试验（A）。A.将溶剂盛装在与样品池相同的参比池内，调节仪器，使透光率为100%，然后测定样品池的吸收度B.将溶剂盛装在石英吸收池内，以空气为空白，测定其吸收度C.将溶剂盛装在玻璃吸收池内，以空吸收池为空白，测定其吸收度D.将溶剂盛装在玻璃吸收池内，以水为空白，测定其吸收度E.将溶剂装在吸收池内，以水为空白，测定其吸收度，然后从样品吸收中减去此值,K=Cs/Cm（E）。A.比较值B.分离度C.理论板数D.容量因子E.分配系数组分在固定相和流动相之间分配平衡时的浓度之比称为分配系数。,3）红外分光光度法IR,物质分子吸收波数位于4000-400cm-1范围的红外光而产生的吸收光谱称为红外吸收光谱。利用红外吸收光谱对物质进行分析的方法称红外分光光度法。红外吸收光谱是由分子的振动、转动能级引起的光谱。特征性强，除了光学异构体及长链烷烃同系物外，几乎没有两种化合物具有完全相同的红外吸收光谱。应用：药物鉴别、中国药典对无效或低效晶型进行检查