标准解读

《GB/T 34740-2017 动物狂犬病直接免疫荧光诊断方法》是一项国家标准，旨在规范动物狂犬病的诊断流程。该标准详细描述了使用直接免疫荧光技术对疑似狂犬病样本进行检测的具体步骤和技术要求。

首先，在准备阶段，需要收集疑似患病动物的脑组织作为待检材料，并确保采样过程中遵循生物安全操作规程，以避免感染风险。对于采集到的样品，应尽快处理或妥善保存于低温环境中直至实验开始。

接下来是制片过程，将新鲜或冷冻保存的脑组织切成薄片，并固定在载玻片上。此步骤需注意保持组织结构完整，以便后续观察。

然后进入抗体孵育环节，选择针对狂犬病毒特异性抗原的荧光标记单克隆或多克隆抗体溶液滴加至已固定的组织切片上，在适宜条件下进行一定时间的反应。这一步骤中抗体与病毒抗原结合形成复合物，为下一步显色打下基础。

之后通过清洗去除未结合的抗体后，利用荧光显微镜观察结果。如果存在狂犬病毒感染，则会在特定波长光照下看到明亮的荧光点；反之，则无明显荧光信号出现。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS11220 B41 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T347402017 动物狂犬病直接免疫荧光诊断方法 Diagnosticmethodsforanimalrabiesdiagnosiswithdirect immunofluorescenceassay2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T347402017 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。本标准参考世界动物卫生组织 年版 陆生动物卫生手册 狂犬病的相关内容 (OIE)2013 2.1.13 。本标准由中华人民共和国农业部提出 。本标准由全国动物卫生标准化技术委员会 归口 (SAC/TC181) 。本标准起草单位 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 : 。本标准起草人 扈荣良 张守峰 刘晔 张菲 连海 : 、 、 、 、 。 GB/T347402017 动物狂犬病直接免疫荧光诊断方法1 范围 本标准规定了动物狂犬病直接免疫荧光诊断方法的材料和试剂 器械和设备 防护措施 动物脑组 、 、 、 织样品采集 运输和保存 实验操作及镜检观察与结果判定 、 、 。 本标准适用于动物狂犬病的病原学诊断 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T66822008 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件 。 直接免疫荧光检测 DFA: (DirectImmunofluorescenceAssay) 异硫氰酸荧光素 FITC: (FluoresceinIsothiocyanate) 磷酸盐缓冲溶液 PBS: (Phosphate-BufferedSaline)4 材料和试剂 除非另有规定 仅使用分析纯试剂 , 。41 水 二级水 . ,GB/T66822008, 。42 狂犬病阳性对照脑组织 见 . ( A.1)。43 狂犬病阴性对照脑组织 见 . ( A.2)。44 标记的抗狂犬病病毒抗体 商品化的荧光抗体 应由抗狂犬病病毒核蛋白的单克隆抗体或 . FITC ( ), 多克隆抗体制备而成 用 见 稀释成工作液 现用现配 , PBS(0.01mol/L,pH7.4, B.1) , 。45 伊文思蓝溶液 见 . 1% ( B.2)。46 固定液 丙酮溶液 见 . (80% , B.3)。 警示丙酮易燃 有害健康 , !47 见 . PBS(0.01mol/L,pH7.4, B.1)。48 碱性缓冲甘油溶液 见 . 80% (
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