临床实验室三大常规.ppt

重视实验室三大常规,长沙市第一医院检验科李宁沙2011-08-01,血球仪计数,三分群五分群全自动涂片染色加图形比对技术,检测原理与基本结构,检测原理与基本结构,红细胞和血小板共用一个小孔管，正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限，血小板计数准确容易,CPU对血小板和红细胞分布图进行判断,红细胞和血小板的检测,红细胞和血小板的检测,浮动界标,检测原理与基本结构,检测原理与基本结构,白细胞的检测,OY对仪器的性能与要求,包括精度、互染、可比性、线性、漂移、异常样品的抗干扰影响即抗干扰能力等要按省卫生厅湘卫医发【2005】41号文件规定定期检查，达到规定要求才能使用。同时室内质控措施要坚持并有规范的记录。无室内质控或室内质控不达标绝不可轻易签发检验报告单。,什么是【2005】4l号文件？,要点,标本送检与接收制度异常结果登记报告制度（强调：危急值、微生物预报告、失控记录等）异常结果复查标准生物安全，废液处理交接班制度校准、比对制度质控图打印成册五分类。三分类计数原理,要点,推片分类的原则各类细胞计数正常时，中性粒细胞、淋巴细胞增高或降低时，需要推片分类发现异常淋巴细胞时，需要推片分类嗜酸性粒细胞增高时，需要推片分类血小板增高或降低时，需要推片分类，并对血小板形态进行描述红细胞分布大小、宽度异常时，需要推片分类小红细胞异常时，需要推片分类,OY基本参数和衍生参数互相影响,仪器检测四项基本参数：血红蛋白(HGB)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)及血小板(PLT)，其它的均为衍生参数。任一种基本参数的失真则由其衍生的参数必错，只有采取综合分析的观点才会得到全面、正确的概念。,类别MCVRDW正常缺铁性贫学巨幼细胞性贫血溶血性贫血铁粒幼细胞贫血再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血注：无变化，增大，减少,OY用于贫血分类(Bessman分类),OY操作人员上岗要仔细阅读仪器说明书,了解仪器保养的要求及使用过程中注意事项及小故障排除方法等。要按湘卫医发【2005】4l号文件规定，定期检测仪器的各项性能，严守操作规程。参加室间质评调查，搞好室内质控，确保仪器正常运转，保证检测数据的可信性。,体积(volume，V)电阻抗原理测定细胞体积和数量电导性(conductivity，C)高频电磁探针，测量细胞内部结构，细胞内核浆比例光散射(scatter，S)细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强,检测原理与基本结构,五分类技术：容量、电导、光散射（VCS）检测技术,容量、电导、光散射（VCS）检测技术,光散射,电导性,电阻抗,每个细胞接受三维分析定义到三维散点图的相应位置,检测原理与基本结构,光散射与细胞化学联合检测技术,这类仪器是应用激光散射与细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。,检测原理与基本结构,联合检测型原理,主要体现在白细胞分类，实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出，发现异常细胞。共有特点是：均使用了鞘流技术。,检测原理与基本结构,电阻抗、射频与细胞化学联合,这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术，通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统幼稚细胞检测系统,检测原理与基本结构,血红蛋白测定原理,除干式、无创型外，各型对血红蛋白测定都采用光电比色原理血细胞悬液中加入溶血剂后，红细胞溶解释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统HiCN特定波长(530550nm)下进行光电比色,检测原理与基本结构,结果分析,结果分析,结果分析,结果分析,结果分析,影响因素和注意事项,分析前（病人、输液、扎血、抽血、抗凝）分析中（微小凝块、冷凝集、有核红细胞、高Tg影向细胞溶解、pt聚集、大pt、wbc碎片、脆性wbc，混匀、校准、质控）分析后（信息复核与标本复查）复查规则（原始样、重抽样、替代法）,关于复查,关于复查,让我们复习形态，加深记忆重点：疟原虫、异常淋巴、幼稚细胞、,示教片,大家来阅片,异淋,恶性疟滋养体,异淋,恶性疟配子体,异淋,晚幼红,裂殖体,鞭虫卵,中性粒细胞分叶核,血小板,异淋,中性粒分叶核,霉菌,晚幼红,OY关于白细胞分类,首先必须明确，迄今为止世界上无论多先进的血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段，不能完全取代手工显微镜下分类。坚决反对有些单位使用白细胞分析仪后就一律不再作镜下复查和分类的错误倾向。当出现白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板任何一项有明显升高或降低：白细胞分类出现异常结果；红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形以及仪器上显示警示信号(如flag等)时，更须用显微镜检查及分类。,OY关于常用英语词汇,光电比色分析Photoelectriccolorimetricanalysis吸光度Absorbance白细胞分类计数Differentialleukocytecount血型Bloodtype输血科Departmentofbloodtransfusion交叉配血试验Bloodcrossmatchtest临床检验科Departmentofclinicallaboratory艾滋病AcquiredImmunodeficiencySyndrome,OY关于常用英语词汇,结核病Tuberculosis肝炎Hepatitis长沙市公共卫生救治中心ChangShapublichealthSalvationcenter显微镜Microscope狂犬病Rabies电子血球计数仪Electronicbloodcellcounter生物安全Biologicalsafety电解质分析仪Electrolyteanalyzer聚合酶连反应Polymerasechainreaction,OY关于常用英语词汇,质量控制Qualitycontrol失控Beoutofcontrol在控Incontrol骨髓Bonemarrow血浆Plasma（ELISA）Enzymelinkedimmunosorbentassay酶促反应Enzymaticreaction溯源性Traceability校准Calibration实验室信息系统Laboratoryinformationsystem医院信息系统HospitalinformationsystemVCS技术VolumeConductivityScatter,OY关于常用英语词汇,长沙传染病医院ChangShaContagioushospital性传播疾病Sexuallytransmitteddisease蒸馏水Distilledwater离心机Centrifuge参考值Referencevalue危急值Criticalvalue床边诊断(POCT)Point-Of-careTesting离子选择电极IronSelectiveElectrode(ISE)标准操作程序StandardOperatingProcedure,OY关于常用英语词汇,人类缺损病毒humanimmunodeficiencyvirus表面抗HbsAghepatitisBVirusSurfaceAntigenPDWplateletvolumedistributionwidthMPVmeanplatetetsVolumeMCHCmeanCorpuseularhemoglobinConcentrationMCVmeanCorpuseularVolumeMCHmeanCorpuseularhemoglobin脑脊液cerebrospinalfluid肝肾功能hepaticandrenalfunction,尿液常规,回顾纯手工时代自动尿液分析仪贵重仪器等于质量吗？在现代化精密仪器时代下的手工,尿液常规,尿液自动分析仪的发展史尿液分析仪测试原理尿液分析仪结果干化学检查与显微镜检查干化学分析仪的局限性和影响因素,尿液分析仪测试原理,试剂带原理多联试剂带是将多种项目的试剂块集成在一个试剂带，使用多联试剂带，浸入一次尿液可同时测定多个项目。图为德国宝灵曼公司的COMBURTEST试剂带。它采用了多层模结构;各个厂家的产品，基本结构差不多,返回知识点,尿液分析仪测试原理,多联试剂带结构图,返回知识点,尼龙膜：防止大分子物质对反应的污染绒制层：包括碘酸盐层和试剂层碘酸盐层：可以破坏维生素C等干扰物质试剂层：含有试剂成分，主要与尿液中测定物质发生化学反应，产生颜色变化吸水层：可使尿液均匀快速的浸入，并能抑制尿液流到相邻的反应区塑料底层：作支持体。,尿液分析仪测试原理,返回知识点,另外，试剂带中还有另一个垫-“补偿区”，作为尿液本底颜色，以对有色尿及仪器变化等产生的误差进行补偿。试剂带按一定的顺序排列，各个厂家不一样，尿液中的各种成分被各测定块吸收，引起化学反应及酶反应，使试剂块颜色根据尿液中各成分的比例而变化。,尿液分析仪测试原理,返回知识点,尿液分析仪测试原理,各项目测定原理表,返回知识点,白细胞特异性脂酶测定原理：尿WBC干化学法是检查尿WBC内中性粒细胞内含有的特异性脂酶。这种酶可作用于试纸膜块中的吲哚酚脂，并发生重氮盐反应形成紫色缩合物，其颜色深浅与细胞的多少呈正比例关系。对淋巴细胞、单核细胞不起反应。,尿液分析仪测试原理,返回知识点,隐血实验原理：利用Hb中亚铁血红素有类似过氧化物酶的作用，在供氢体（如无色的邻联甲苯胺）的存在下，使过氧化物还原成为水，而无色的邻联甲苯胺被氧化成为有色的产物。AH2-H2O2过氧化物酶A2-H2O2,（无色）,（有色）,尿液分析仪测试原理,返回知识点,测量原理：此类仪器一般用微电脑控制，将浸有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试带上已产生的化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波长光（包括通过滤光片的测定光和一束参考光）照射。测定每种试剂带块反射光的光量值与空白块的反射光量值进行比较，通过计算机求出反射率，换算成浓度值，便可由分析仪打印出半定量的数值。,尿液分析仪测试原理,返回知识点,尿液分析仪结构,尿液分析仪由：机械、光学、电路系统三部分组成。,光电系统结构图,尿液分析仪结构,结果分析,临床意义（熟练掌握）参考值（背）,结果分析,尿液分析仪一般评价1.首先应该对尿液分析仪进行校正，校正的目的是让仪器进入厂商规定的状态。其操作是用标准的校正条对仪器进行测定仪器的光路，状态进行校正，以达到最佳状态，有些厂家的校正条是一次性的，不能重复使用，以免影响试验结果，有些厂家的校正条可重复使用，尿液分析仪只有在校正通过时才能进行实验，否则要停机。,2.应该对尿液分析仪及试纸条的准确度进行评价。准确度指的是测定值与真值的接近程度，由于尿液分析仪是一个半定量的仪器，因此它的准确度的评价只有根据仪器制造商规定的测定范围配制成一定浓度的标准物，在仪器上严格按说明书操作，每份标准物测定3次，观察测定结果与标准物浓度相符合程度。,结果分析,3.用传统的方法与尿液分析仪测定作对比分析，对尿液分析仪的敏感性和特异性进行评价。4.了解该仪器对每项测试指标的测试范围，并建立该仪器的参考范围。,结果分析,干化学与镜检,中华医学会经过三次专家研讨会，寻求一个简单、快速的筛选方法，对干化学尿液分析提供了筛选的试验手段。在干化学尿试带质量合格，尿液分析仪运转正常情况下，试验中满足以下条件时，可免去镜检：白细胞、红细胞、蛋白质及亚硝酸盐为阴性。,另外，对肾脏疾病的病人不适合干化学检查筛选法，对以镜检结果作为诊断依据和观察疗效指标时，不宜作筛选，如：结石、结晶、寄生虫的检查。,干化学与镜检,影响干化学检测结果的因素,影响检测结果的因素大致来自如下几方面：仪器、试纸条因素（包括仪器的校验和维护）尿标本因素（留取、污染、稀释、药物、转运）操作因素（操作程序，环境因素等）,大便常规,颜色形状性状取样涂片显微镜镜检,大便常规,常规标本采集寄生虫标本采集隐血标本采集三天禁食肉类、动物血和某些蔬菜，化学法禁服铁剂及维生素C