高考生物 22微生物的利用复习课件.ppt

专题22微生物的利用,考纲要求,-3-,特色梳理,选考提升,1.培养基及无菌技术(1)微生物对培养基的需求,大肠杆菌的培养和分离,-4-,特色梳理,选考提升,(2)常见无菌操作a.对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。b.对于不能加热灭菌的化合物,如尿素等,只能用g6玻璃砂漏斗过滤。c.实验操作过程中,一般采用灼烧对接种环和玻璃刮刀进行灭菌。d.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰旁进行。,-5-,2.大肠杆菌的培养和分离的实验操作,特色梳理,选考提升,-6-,特色梳理,选考提升,典例精析1下列有关高压蒸汽灭菌的叙述,错误的是()a.用于分离微生物的土壤样品必须高压蒸汽灭菌b.灭菌前要将培养皿用牛皮纸或报纸包扎c.为达到良好的灭菌效果,一般在压力为1kg/cm2,温度为121的条件下,维持15mind.当灭菌锅压力与大气压相同时,可以打开锅盖将灭菌物品拿出来,解析用于分离微生物的土壤样品不能使用高压蒸汽灭菌,否则会导致样品中微生物全部死亡,而分离不到微生物,a项错误;灭菌前要将培养皿用牛皮纸或报纸包扎,b项正确;为达到良好的灭菌效果,一般在压力为1kg/cm2,温度为121的条件下,维持15min,c项正确;当灭菌锅压力与大气压相同时,即灭菌锅内没有压力了,可以打开锅盖将被灭菌物品拿出来,d项正确。,a,-7-,特色梳理,选考提升,知识强化教科书灭菌方式的归纳,-8-,特色梳理,选考提升,-9-,特色梳理,选考提升,易错警示(1)若配制的培养基中有葡萄糖,为防止葡萄糖分解碳化,一般要用500g/cm2压力(90以上)灭菌30min;不能加热灭菌的化合物,如尿素等,只能用g6玻璃砂漏斗过滤。(2)使用高压锅灭菌,计时时间不是高压锅通电后,而是有压力后开始计时灭菌15min;灭菌结束,不是灭菌锅压强降为0停止,而是与大气压相同时打开锅盖。(3)对于培养基ph的调节,需在灭菌之前。(4)检测培养基灭菌是否彻底,最简便的方法是空白接种,即将未接种的培养基放在适宜温度下培养一段时间后观察是否有菌落生长,若培养基中出现菌落,说明培养基灭菌不彻底或被污染,反之说明培养基灭菌彻底。,-10-,特色梳理,选考提升,典例精析2划线分离和涂布分离是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是()a.都要将菌液进行一系列的梯度稀释b.划线分离是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作c.涂布分离是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养d.都会在培养基表面形成单个的菌落,解析划线分离不需要进行梯度稀释,a项错误;划线分离不需要进行梯度稀释,划线分离是将菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,b项错误;涂布分离是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面,c项错误;划线分离和涂布分离都能在培养基表面形成单个菌落,d项正确。,d,-11-,特色梳理,选考提升,知识强化划线分离和涂布分离操作比较,-12-,特色梳理,选考提升,典例精析3(2017浙江温州期末)生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题。(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用(液体)进行一系列的梯度稀释。将稀释后的水样分别用涂布到培养基表面上,然后将培养皿于恒温培养箱,在条件进行培养。,-13-,特色梳理,选考提升,(2)下图表示利用分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是。a.步骤倒平板操作时,只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行b.步骤使用的工具是接种环,接种前需在明火上烧红后冷却c.步骤恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次d.该方法使单菌落更容易分开,但操作复杂些,答案(1)无菌水玻璃刮刀lb固体倒置37(2)划线b,-14-,特色梳理,选考提升,解析(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释。将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到lb固体培养基。为了防止冷凝水污染培养基,因此需要将培养基倒置于恒温培养箱,在37条件进行培养。(2)根据中结果可知,图示表示利用划线分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤。步骤倒平板操作时,需要在酒精灯火焰旁进行,a项错误;步骤中的接种环需要进行灼烧灭菌,即在火焰上灼烧后,待冷却后才可以蘸取菌液进行平板划线,b项错误;步骤恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中划线4次,但是只蘸取菌液1次,c项错误;划线分离操作简单方便,但是单菌落不易分离,d项错误。,-15-,特色梳理,选考提升,知识强化1.划线分离过程中多次涉及灼烧接种环的目的比较,-16-,特色梳理,选考提升,2.划线分离操作的注意事项(1)第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。(2)灼烧的接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。(3)划线时,只能蘸取一次菌液,每次划线以上次的末端为起点,划线最后一个区不要与第一个区相连。,-17-,特色梳理,选考提升,分离以尿素为氮源的微生物1.菌种特点:含有脲酶,通过降解尿素作为其生长的氮源。2.培养基:以尿素为唯一氮源的培养基,以lb全营养基为对照。3.实验原理(1)筛选以尿素为氮源的微生物,可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基(功能)进行培养选择。(2)尿素在脲酶的降解下产生nh3,使培养基的ph由原来的中性变为碱性,于是培养基中的酚红由红黄色变成红色。,-18-,特色梳理,选考提升,4.实验操作,-19-,特色梳理,选考提升,典例精析(2017浙江金华期末)某同学为探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了如下实验。并通过该实验成功筛选出了能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请回答下列问题。,-20-,特色梳理,选考提升,-21-,特色梳理,选考提升,(1)制备培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、分装、加塞、包扎、灭菌等。(2)“目的菌”生长所需的氮源为培养基中的。用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基的原因为。为检测能降解尿素细菌的存在与否应在培养基中加入酚红指示剂,若存在,则菌落周围将形成色环带。(3)上图中为将细菌转接到固体培养基上,应采用法进行接种,获得单菌落后继续筛选。(4)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是。a.高压蒸汽灭菌b.紫外灯照射c.70%的酒精浸泡d.过滤,答案(1)调ph(2)尿素防止琼脂中氮元素对实验的干扰红(3)涂布分离(4)d,-22-,特色梳理,选考提升,解析(1)制备培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、调ph、分装、加塞、包扎、灭菌等。(2)目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素;用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基可防止琼脂中氮元素对实验的干扰;分解尿素的细菌能合成脲酶,将尿素分解形成碱性物质氨,在碱性环境下,酚红指示剂变红。(3)图示采用的接种方法是涂布分离法。(4)由于尿素加热会分解,a项错误;紫外灯照射只能起到消毒作用,b项错误;70%的酒精浸泡只能起到消毒作用,c项错误;由于尿素加热会分解,对尿素溶液进行灭菌最好用g6玻璃砂漏斗过滤,d项正确。,-23-,特色梳理,选考提升,知识强化1.选择培养基的选择方法(1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌,加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的化学物质是在主要营养成分完整的基础上加入的。(2)改变培养基中的某种营养成分。例如,缺乏氮源时可以分离出固氮微生物,石油作