血常规检查从业参考培训.ppt

血常规检查(BloodRoutineTest)复旦大学附属华山医院检验医学中心陈淑英（ph.D),血常规检查的方法,手工法直观、计数异常需进行手工计数,仪器分析法测定参数多、速度快、结果准确可靠、重复性好、性能稳定,镜检的重要性,贫血？,红细胞（RedBloodCell）,生理性：高原地区居民、胎儿、新生儿病理性：红细胞增多症、肺功能不全、紫绀型先天性心脏病、脱水,红细胞增多,红细胞减少,生理性：儿童、妊娠中后期孕妇、老年人病理性：贫血、白血病、失血,原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，滴入血细胞计数板中，然后于显微镜下计数一定体积内的红细胞，经换算，得每升血液中的红细胞数。,（一）、红细胞（RBC）直接计数法,实验步骤,1、取康氏试管1只，加红细胞稀释液2ml2、取血10ul，放入稀释液中，混匀3、用滴管取已混匀的红细胞悬液1滴，滴入干净的细胞计数池中。4、静置2-3分钟，待细胞下沉后，用高倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。,计数顺序和原则：1.按一定顺序计数；2.压线细胞数上不数下数左不数右,5个中方格内的RBC510200106=RBC/L成年男性：(4.05.5)1012/L成年女性:(3.55.0)1012/L新生儿:(6.07.0)1012/L,计算公式,参考值,（二）、红细胞（RBC）形态检查,在贫血或其他血液系统疾病时红细胞除有数量变化外，往往伴有形态改变，表现在红细胞大小、形状、染色性质和内涵物的异常。因此，红细胞形态检查对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。,低倍镜：,制备血涂片,染色,镜检,检查区域：体尾交界处，细胞分布均匀，红细胞紧密排列但不重叠。,估计细胞分布和染色情况，浏览全片是否存在异常细胞。,观察红细胞形态。,红细胞形态检查方法,油镜：,双凹圆盘形，淡桔红色，中央1/3为生理性淡染区，呈正常色素性。红细胞直径为6.77.7m，平均直径7.2m左右，厚约2m。无核，胞质内无异常结构。除健康人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和部分白血病。,正常红细胞形态,红细胞大小异常红细胞形状异常血红蛋白充盈度与着色异常红细胞内出现异常结构红细胞排列异常有核红细胞,异常红细胞形态,1小红细胞(microcyte)：直径10m。最常见于缺乏叶酸和维生素B12所致的巨幼细胞性贫血（MA），也可见于溶血性贫血（HA）、骨髓增生异常综合症（MDS）。3巨红细胞(megalocyte)：直径15m。常见于巨幼细胞性贫血（MA）和骨髓增生异常综合症（MDS）。,红细胞大小异常,4红细胞大小不均(anisocytosis)：指红细胞之间直径相差一倍以上。见于严重的增生性贫血的血涂片中。巨幼细胞性贫血尤为明显，与骨髓造血紊乱有关。,红细胞大小异常,小红细胞(microcyte)大红细胞(macrocyte)巨红细胞(megalocyte)红细胞大小不均(anisocytosis),红细胞大小异常,1球形红细胞(spherocyte)：直径小于正常，厚度增加大于2m。无中心淡染区。常见于遗传性球形红细胞增多症（HS）和伴有球形细胞增多的其他溶血性贫血如AIHA、HDN等。,红细胞形状异常,2椭圆形红细胞（elliptocyte）：细胞呈卵圆形、杆状，长度可大于宽度34倍。这类红细胞成熟后在高渗、等渗、低渗及正常血清内，其椭圆形保持不变。常见于遗传性椭圆形红细胞增多症（HE），可高达25%75%（正常人为1%）。也见于巨幼细胞贫血。,红细胞形状异常,3靶形红细胞（targetcell）：红细胞中心部位染色较深，其周围为苍白区域，而细胞边缘又深染，形如射击之靶。常见于各种低色素贫血（主要是地中海贫血，珠蛋白生成障碍性贫血）。可能因HbA含量贫乏而又分布不均所致。应注意与在血涂片制作中未及时固定而引起的改变相区别。,红细胞形状异常,4口形红细胞（stomatocyte）：红细胞中央苍白区呈扁平状，颇似张开的嘴巴或鱼口。血涂片中口形红细胞增多，见于遗传性口形红细胞增多症（HST），常10%。也可见于酒精中毒、小儿消化系统疾病引起的贫血等。,红细胞形状异常,5镰形红细胞（sicklecell）：呈狭长形，形如镰刀，两端尖锐，正常情况下少见。主要见于HbS病，是由于红细胞内存在异常HbS所致。在缺氧的情况下，异常HbS溶解度降低，形成狭长的结晶体，使红细胞变形。,红细胞形状异常,6棘形红细胞（acanthocyte）：红细胞表面有针状或指状突起，间距不规则，突起的长度和宽度可不一。在-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中出现较多。也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症、溶性性贫血及重金属中毒。应与皱缩红细胞区别。,红细胞形状异常,7皱缩红细胞：也称钝锯齿形红细胞（echinocyte），主要由于高渗、制片不当等原因造成，红细胞周边呈钝锯齿状排列紧密，大小相等，长短一致。,红细胞形状异常,8泪滴形红细胞（teardropcell）：形如泪滴或梨状，正常人偶见。多见于骨髓纤维化。,红细胞形状异常,9裂片细胞（schistocyte）：为红细胞碎片或不完整的红细胞，系红细胞通过管腔狭小的微血管受牵拉、挤压所致。有各种形态如刺形、盔形、三角形及扭转形等。正常人血片中裂片红细胞2%。增多见于弥散性血管内凝血（DIC）、微血管病性溶血性贫血（MHA）。,红细胞形状异常,10红细胞形态不整（poikilocyte）：指红细胞形态发生无规律的明显改变。如泪滴状、梨形、棍棒形及新月形。最常见于具有巨幼细胞性贫血（MA）。可能是由于贫血严重而造血原料不足，在骨髓内粗制滥造所致。也可能是红细胞脆性较大，在推片时碎裂所致。,红细胞形状异常,球形红细胞椭圆形红细胞靶形红细胞口形红细胞镰形红细胞棘形红细胞皱缩红细胞泪滴形红细胞裂片细胞红细胞形态不整,红细胞形状异常,1.低色素性(hypochromic)：红细胞的生理性中心淡染区扩大,染色淡薄，甚至为环形红细胞，提示血红蛋白含量明显减少，常见于缺铁性贫血（IDA）、珠蛋白合成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血（SA）和某些血红蛋白病。,血红蛋白充盈度与着色异常,2高色素性（hyperchromic）：红细胞的生理性中心淡染区消失，整个红细胞着色较深，而且胞体也大，区别于球形红细胞，MCH增高。最常见于巨幼红细胞性贫血（MA）。,血红蛋白充盈度与着色异常,3嗜多色性（polychromic）：属于尚未成熟的红细胞，呈淡灰蓝色或灰红色，胞体大，相当于活体染色的网织红细胞。由于胞质中含有多少不等嗜碱性物质RNA与血红蛋白并存，因此呈嗜多色性。嗜多色性红细胞增多提示骨髓增生活跃，见于急性失血性贫血和溶血性贫血。,血红蛋白充盈度与着色异常,4细胞着色不一（anisochromia）：红细胞着色不一致，血红蛋白充盈度偏离较大，如同时出现低色素性和正常色素性红细胞，常见于铁粒幼细胞性贫血（SA）。,血红蛋白充盈度与着色异常,低色素性(hypochromic)高色素性（hyperchromic）细胞着色不一（anisochromia）嗜多色性（polychromic）,血红蛋白充盈度与着色异常,1嗜碱性点彩红细胞（basophilicstipplingcell）：简称点彩红细胞。在瑞氏染色条件下，胞质内出现嗜碱性灰蓝色点状物的红细胞。属于未完全红细胞，其颗粒大小不一、数量不等。重金属中毒者增多，常作为铅中毒的诊断筛选试验。,红细胞内出现异常结构,2豪焦小体（howell-jollysbody）：又称染色质小体。位于成熟或幼红细胞的胞质中，圆形，有12m大小，染成紫红色，有1至多个，是核的残余物。常见于巨幼细胞贫血、溶血性贫血、脾切除后和白血病。,红细胞内出现异常结构,3卡波环（Cabotring）：胞质内变性脂蛋白所致。位于成熟或幼稚红细胞的胞质中，呈圆形或8字形的细线圈状结构。见于脾切除后或巨幼细胞性贫血。常与豪焦小体并存。,红细胞内出现异常结构,4寄生虫。如疟原虫的环状体。,红细胞内出现异常结构,嗜碱性点彩红细胞豪焦小体卡波环寄生虫,红细胞内出现异常结构,1红细胞缗钱状形成（rouleauxformation）：当血浆纤维蛋白原和球蛋白含量增高时，可使红细胞表面负电荷降低，减弱红细胞之间的相互排斥力而互相连接呈缗钱状。常见于多发性骨髓瘤。,红细胞排列异常,2红细胞自凝现象（selfagglutinating）：血涂片上红细胞出现聚集、凝集成堆或成团现象，多见于冷凝集素综合症和自身免疫性溶血性贫血等。注意与血涂片较厚引起的红细胞堆积相区别，真正的红细胞自凝在涂片较薄处也存在。,红细胞排列异常,幼稚红细胞，存在骨髓中。正常成人外周血液中不能见到。一周以内婴儿血涂片中可见到少量。常见于各种溶血性贫血，由于大量成熟红细胞破坏后，骨髓增生，除网织红细胞大量入血外，还有一些有核红细胞提前释放入血，说明骨髓造血功能活跃。白血病、红白血病的外周血片中也可见到有核红细胞。,有核红细胞,白细胞（WhiteBloodCell）,（一）、血白细胞直接计数法,原理用稀醋酸稀释液，将血液稀释一定倍数，并破坏红细胞后，滴入计数室中。然后在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经过换算，即可求得每升血液中的白细胞（WBC）数。,取康氏试管1只，加入白细胞稀释液0.38ml。取血20l，放入盛稀释液的试管底部，吸取上清液吸洗吸管2次，然后混匀，避免产生气泡。用滴管或玻棒取已混匀的细胞悬液1滴，滴入计数室中，静置23分钟。用低倍镜计数细胞计数室内四角的4个大方格中的白细胞数。对于压线细胞，应采取数上不数下，数左不数右的原则，以免误差。,实验步骤,4个大方格内白细胞数41020106=WBC/L成人（4.010.0)109/L新生儿（15.020.0)109/L6个月-2岁（11.012.0)109/L,计算公式,参考值,（二）、白细胞分类,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。,白细胞,操作,血膜上先后加瑞氏染液A、B液各56滴，混匀后，染色8分钟后，用自来水缓缓地将染液冲去。,染色,中性杆状核粒细胞胞体直径10-15um，圆形或类圆形；胞核S形、U形或E形，核染色质粗糙呈块状，副染色质明显、透明，两端钝圆呈深紫红色中性分叶核粒细胞呈圆形，直径10-13um；通常2-3叶者居多，叶与叶之间以细丝相连；胞质呈淡粉红色，含紫红色中性颗粒,嗜酸性粒细胞胞体直径10-15um，圆形或类圆形；胞核S形、U形或E形，核染色质粗糙呈块状，副染色质明显、透明，两端钝圆呈深紫红色胞体呈圆形，胞质中充满粗大、均匀整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒,胞核常分成两叶，形似眼镜嗜碱性粒细胞呈圆形，直径10-12um；核结构不清,分叶不明显，粗而不匀淡橘红色量少,大小和分布不均,常覆盖核上,蓝黑色,小淋巴细胞胞体直径6-9um，圆形或类圆形；胞核类圆形或有小切迹；核染色质紧密呈大块状，核仁消失。胞质量极少，呈淡蓝色，常无颗粒。大淋巴细胞胞体直径12-15um，胞核椭圆形，常偏于一侧；核染色质致密均匀呈深紫红色；核仁消失；胞质较多，呈清澈的淡蓝色，常有少许嗜天青颗粒中淋巴细胞大淋巴细胞,单核细胞胞体直径12-20um，圆形或不规则，常可见伪足；胞核不规则，常呈肾形，马蹄形，或S形等；核染色质疏松，可呈条索状，小块状。胞质量多，呈灰蓝色半透明毛玻璃状。胞质内可见细小，分布均匀的紫红色颗粒，胞质内常有空泡。,杆状核13分叶核5570嗜酸性粒细胞13嗜碱性粒细胞01淋巴细胞2040单核细胞38,参考值,中性粒细胞增多：急性革兰阳性球菌感染或化脓性炎症、一氧化碳中毒、手术后或受伤后、慢性粒细胞性白血病、恶性肿瘤、急性溶血。减少：伤寒、副伤寒、麻疹、流感、疟疾、再障、粒细胞缺乏症、脾亢等。嗜酸性粒细胞增多：过敏性疾病、皮肤病、寄生虫病如钩虫病、肺吸虫病、血吸虫病等。减少：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。,临床意义,嗜碱性粒细胞增多：慢性粒细胞性白血病、淋巴网状细胞瘤、脾切除术后等。淋巴细胞增多：百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、结核病、水痘、麻疹、传染病的恢复期。减少：传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷病。单核细胞增多：黑热病、疟疾、血吸虫病、结核病恶化、亚急性细菌性心内膜炎、急性传染病的恢复期。,网织红细胞含有少量核糖核酸(RNA)，用煌焦油蓝染色时成浅蓝色或深蓝色网织结构故名网织红细胞。网织红细胞进一步成熟，RNA消失而为成熟红细胞。,网织红细胞（Reticulocyte）,网织红细胞增多：表示骨髓红细胞系统的增生旺盛。多见于各种增生性贫血，如溶血性贫血，特别是急性溶血性贫血，急性大出血引起的失血性贫血。当缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血治疗有效时，可出现短时间的网织红细胞大量增加，以后即降至正常或稍高于正常。网织红细胞减少：多见于骨髓增生低下，如再生障碍性贫血和某些溶血性贫血有再障危象时。阵发性睡眠性血红蛋白尿网织红细胞有所减少，但有些慢性再生障碍性贫血患者的网织红细胞并不明显减低。可以作为贫血治疗疗效的判断监察指标，用于观察治疗效果和判断病情变化。,临床意义,血小板（Platelet）,血小板是从骨髓成熟的巨核细胞胞浆解脱落下来的小块胞质。巨核细胞虽然在骨髓的造血细胞中为数最少，仅占骨髓有核细胞总数的0.05%，但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要。因血管创伤而失血时，血小板在生理止血过程中的功能活动大致可以分为两个阶段:第一阶段主要是创伤发生后，血小板迅速黏附于创伤处，并聚集成团,形成较松软的止血栓子；第二段主要是促进血凝并形成坚实的血栓子。,魏（Westergren）氏法是将抗凝血液加于特制的血沉管中，细胞在血浆中，借其本身重力向下沉降，在一定时间内（1小时）细胞下沉的毫米数，即为红细胞沉降率（ESR），简称血沉。正常值：男015mm/h，女020mm/h,红细胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR）,血沉作为急性时相指标之一，出现在C反应蛋白等应激反应之后，大多数结缔组织病、关节炎活动期都能出现血沉增快，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、幼年类风湿性关节炎、多肌炎彼肌炎、风湿热、大动脉炎、韦格纳肉芽肿病、结节病、脂膜炎等。,临床意义,血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无抗原或和抗原，将血型分为型