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文档简介
DNA和RNA的细胞化学,Brachet反应,实验原理,甲基绿派洛宁(Methylgreen-Pyronin)为碱性染料,它能分别与细胞内的DNA、RNA结合而呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时,甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色,但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。即RNA对派洛宁亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,被染成蓝绿色。,实验准备,(一)器材显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸(二)材料洋葱鳞茎表皮(三)试剂1Unna试剂:甲基绿派洛宁(Methylgreen-Pyronin)染色液配制注意事项:(1)Pyronin可加热助溶。(2)Methylgreen批号不同,染色效果差别很大。商品Methylgreen常混有甲基紫,影响染色效果,应先把药品放在分液漏斗中,加入足量的氯仿,用力振荡,然后静置,直到洗脱甲基紫为止,最后干燥备用。,【方法与步骤】,1用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块,置于载玻片上。2滴一滴Unna试剂,染色30min。3蒸馏水洗两次,吸水纸吸去多余的水分4盖上盖玻片,镜检。对照片:撕取洋葱鳞茎内表皮,经5%三氯醋酸中90水浴处理15min。再经70%乙醇洗片刻,然后按步骤2-4制片观察。,实验预期结果,
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