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,目录,消除溶剂效应的方法,案例分享,溶剂强度对色谱行为的影响,进样体积对色谱行为的影响,1,-,样品溶剂：纯甲醇,样品溶剂：甲醇：磷酸盐缓冲液=45:55,峰展宽,格列吡嗪含量均匀度分析方法色谱柱：WatersNova-PakC-18，150*3.9mm,4um进样量：20uL波长：225nm流速：1.0mL/min流动相：甲醇：PH6.0磷酸盐缓冲液=45:55,2,-,中国药典2010版瑞格列奈左旋异构体液相方法色谱柱：ChiralAGPTM手性柱，100*4.0mm,5um进样量：20uL波长：240nm流动相A：pH7.0磷酸盐缓冲液流动相B：乙腈梯度洗脱：,样品溶剂：纯甲醇,样品溶剂：甲醇：磷酸盐缓冲液=60:40,3,-,什么是溶剂效应？,样品溶液的溶剂强度强于流动相溶剂强度时，可能会造成的峰展宽、峰分叉现象。,溶剂效应的现象,色谱图上较早洗脱的峰前沿或开叉，与此同时较晚洗脱的峰则较为正常。,溶剂效应,可能发生溶剂效应的情况,保留弱，出峰时间早进样量大溶解性差异，例如中国药典2000年版二部盐酸环丙沙星片含量测定时，用水作稀释剂时，色谱峰面积不稳定，峰面积重新性较差。中国药典2000年版二部改为用流动相为稀释剂后，峰面积重新性良好。电离状态差异，例如样品的稀释剂是pH6.8溶出介质，流动相中缓冲液是pH3.0的磷酸盐，这就可能发生保留时间不稳定及色谱峰变形的现象。,4,-,溶剂强度顺序,反向色谱中，溶剂强度洗脱顺序为：二氯甲烷丙醇四氢呋喃乙醇乙腈甲醇水（最弱）。,洗脱能力差异导致的色谱行为差异,溶剂强度对色谱行为的影响,样品溶剂强于流动相时，样品溶剂可看成流动相的一部分，溶解于强溶剂的洗脱带，一部分样品会被强溶剂迅速洗脱出色谱柱，另一部分在洗脱过程中溶于流动相，被流动相洗脱出，这样会造成色谱峰的展宽或分叉。,5,-,进样体积对色谱行为的影响,当样品溶剂不同于流动相时，进样体积对色谱行为影响较为显著。,6,-,当样品用流动相溶解时，进样体积对色谱行为影响较小。,7,-,消除溶剂效应的方法,尽量用与流动相比例相同或相近的溶剂溶解样品。对于梯度洗脱，采用初始的
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