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文档简介
.,志贺氏菌检验方法,.,志贺氏菌简介,志贺氏菌检验,1,2,.,生物学性状,志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌,菌体短小,长约2-3m,宽0.5-0.7m。不形成芽胞,无荚膜,无鞭毛,有菌毛。为兼性厌氧菌,在有氧和无氧条件下均能生长;最适生长温度为36,最适pH为7.27.4;36培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐,直径约2mm,宋内氏菌菌落一般较大,较不透明,并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长,无菌膜形成。,.,致病因素,志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素,外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面,继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内,一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌A群型及部分II型菌株还可产生外毒素,称志贺氏毒素。,.,志贺氏菌属(Shigella)是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。可经由食物,水,日常接触,苍蝇等传播。,.,抵抗力,志贺氏菌属在外界环境中的生存力,对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱,对酸敏感。一般在潮湿土壤中能存活34天,37水中存活20天,在粪便内(室温)存活11天。日光直接照射30分钟,56-6010分即被杀死,对高温和化学消毒剂很敏感,1%石炭酸中15-30分钟即被杀死,对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感,但易产生耐药性。,.,志贺氏菌检验流程图,检样25g(或25mL)样品+志贺氏菌增菌肉汤225mL,检样25g(或25mL)样品+GN增菌液225mL,.,XLD琼脂平板,志贺氏菌,沙门氏菌,菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心。,粉红色至无色,半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐,直径1mm2mm。,.,.,麦康凯琼脂平板,无色至浅粉红色,半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐,直径2mm3mm。,.,培养物中出现下述情况之一者即可弃去:a)在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长;b)发酵乳糖或蔗糖的;c)不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的;d)产气的(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体);e)产生硫化氢的;f)有动力的培养物,.,2志贺氏菌3沙门氏菌4大肠杆菌,.,.,血清学分型,凡疑为志贺氏菌,挑取营养琼脂斜面上的培养物,做玻片凝集试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查,如果由于K抗原的存在而不出现凝集,应将菌液煮沸后再检查;如果呈现凝集,则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用型因子血清检查。,.,4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株,可用鲍氏多价1、2、3分别检查,并进一步用115各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集,可用痢疾志贺氏菌312型多价血清及各型因子血清检查。,.,进一步的生化试验
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