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文档简介

IgG抗A（B）测定,安徽省合肥市第一人民医院输血科,一、试验原理二、试剂三、操作步骤四、注意事项五、临床应用,一、试验原理,待检血清,2-me(巯基乙醇),IgM抗体分子裂解,IgG抗体分子不被灭活,保持血清学特性(致敏相应红细胞),IgA抗体分子部分灭活,失去与相应红细胞凝集的作用,三、试剂,0.2mol/L2-巯基乙醇应用液。受检者血清。5%A型和B型红细胞生理盐水悬液（标准红细胞）。抗人球蛋白血清。,四、操作步骤,1、吸取受检者血清0.4ml，加2-me应用液0.4ml，混合，将试管口塞紧，置37水浴中2h（充分破坏IgM类抗体）。2、排列小试管（10mm60mm）两排，每排10支，第一排每管各加生理盐水0.4ml。,3、第1排第1管加2-me处理血清0.4ml，混合，吸出0.6ml，移0.2ml至第2排第1管内，其余0.4ml移入第1排第2管内，混合。以此类推，作倍量稀释至第10管，每管内留有12,14,1:1024不同稀释度的血清各0.2ml。,4、第1排每管各加5%A型红细胞悬液0.2ml，第2排每管各加5%B型红细胞悬液0.2ml，置37水浴温育1h。5、结果观察：如在前几管内发现有红细胞凝集者，是由于高效价IgG抗A(B)或IgA抗A(B)所引起，称为“盐水效价”。,6、其余红细胞未见凝集的试管，再以生理盐水洗涤3次，除去洗涤液，留取压实红细胞。7、每管各加生理盐水2滴，混合。8、每管各取1滴，分别移至另一排小试管中，再各加抗人球蛋白血清1滴，混合。,9、1000r/min离心1min。10、轻轻摇动试管，观察结果，红细胞凝集的最高稀释度的倒数即为IgG抗A或抗B效价。,五、注意事项,加入2-me后应塞紧盖子，防止其挥发影响而试验结果。置于37水浴箱应水浴2小时。作倍量稀释时应充分混匀血清，倍量稀释的加样量应准确。,二硫苏糖醇（dithiothreitol,DTT）也可用于灭活IgM抗体，以测定IgG抗体。DTT制备方法：0.01mol/LDTT(0.77gDTT溶于500ml等渗盐水)与等量受检者血清混合，置37水浴30min，再以此处理血清进行试验。DTT的优缺点:无恶臭味，反应快速，但对强抗体灭活效果较差。,六、临床应用,常应用于ABO血型的IgG抗A或抗B效价的测定，如A
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