蛋白质质谱样品污染及预防_第1页
蛋白质质谱样品污染及预防_第2页
蛋白质质谱样品污染及预防_第3页
蛋白质质谱样品污染及预防_第4页
蛋白质质谱样品污染及预防_第5页
已阅读5页,还剩3页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

生物质谱室生命科学研究中心1062室62731128,蛋白质组样品污染,污染来源角蛋白:皮肤,毛发,衣服,灰尘PEG:塑料试剂瓶,离心管,保鲜膜和PE塑料手套(PEG是塑料加工中的“润滑油”,国产离心管PEG残留可能较多)表面活性剂:蛋白提取液,清洗玻璃试剂瓶的残留(SDS,CHAPS,Triton,Tweens,ND-40),影响范围角蛋白:角蛋白质谱信号压制样品蛋白质谱信号,引起低丰度蛋白信号丢失。导致色谱柱污染和超载。PEG和表面活性剂:抑制多肽电离,降低样品信号强度,驻留色谱柱,降低分离效率。,角蛋白和PEG:污染SDS-PAGE胶和蛋白溶液表面活性剂:污染蛋白溶液,蛋白质组样品污染的影响,角蛋白污染无法根除,可通过如下方法缓解交叉污染:专用,分开储存的优质离心管环境污染:洁净的实验室空间,减少灰尘和空气流动接触污染:洁净的乳胶手套和实验服表面活性剂和PEG:使用超滤管(10kDa)去除,样品污染解决方法,4,样品污染问题,污染较少的SDS-PAGE样品酶解后的TIC图,严重PEG污染的的SDS-PAGE样品酶解后的TIC图,PEG污染信号,相对污染较少的SDS-PAGE样品酶解后的质谱图,严重PEG污染的的SDS-PAGE样品酶解后的质谱图,PEG污染信号,污染较少的SDS-PAGE样品蛋白鉴定结果:目标蛋白得分远高于角蛋白污染,蛋白鉴定结果,角蛋白污染结果,严重角蛋白污染的SDS-PAGE样品蛋白鉴定结果:角蛋白得分远高于目标蛋白,蛋白鉴定结果,角蛋白污染结果,2fmol,约0.1-0.2ng蛋白样品就能实现较可靠鉴定不必一味追

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论