杂质检查(节)

杂质检查技术,.,2,第一节概述一、杂质检查的意义中药制剂的杂质一般是指无医疗作用且能影响制剂质量的或对人体产生危害作用的物质。,.,3,中国药典2005年版对杂质检查作出重大修订,收载了原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体质谱法等先进技术,对重金属、砷盐等危害人体健康的杂质进行检测；增加了有机磷类农药、除虫菊酯类农药残留量的检查项目。使杂质检查的整体水平和质量得到显著的提高。,.,4,二、杂质的来源（三个方面）一、是由中药材原料中带入；二、是在生产制备过程中引入；三、是贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生的。,.,5,收购和生产过程中就有可能混入掺杂物,如砂石、泥块、尘土等无机杂质；中药材的来源与药典规定品种相同,但其性状或部位与规定不符,如麻黄中引入麻黄根杂质；来源与规定不同的物质,如大黄中引入土大黄杂质。这些杂质如在制备前不除尽,则可能引进成品中。如大黄流浸膏中,所用原料药在收购过程中有可能引入土大黄,若将其作为原料药进行投料而在制备时尚未除去,就有可能在成品中引进土大黄苷杂质;大黄为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根及根茎土大黄为蓼科的钝叶酸模及红丝酸模两种。味辛、苦，性凉。一些中药材由于自身的原因或外来掺杂物如农药、化肥等都有可能带来重金属、有机磷、钾离子、钙离子、硫酸盐等杂质;在制剂的生产过程中常需加入试剂、溶剂等,它们的残留物也有可能引入产品中。,.,6,生产过程中使用污染的水来清洗中药原料,粉碎操作中的机器磨损,所用的金属用具、装置等也可能引进一些金属杂质和其他一些杂质;对于一些从中药材提取分离的单一成分制剂,由于植物中常含有多种与产品化学结构、性质相似的物质,在提取、分离、精制过程中不易除尽,也有可能引入产品中成为杂质；原料药制成制剂后,由于包装、运输、贮存、保管不当等可造成产品破损、分解、霉变、腐败以及鼠咬、虫蛀等现象,给制剂带来大量杂质；外界条件(日光、空气、温度、湿度等方面)影响或微生物作用下,可以使制剂内部成分发生聚合、分解、氧化还原、水解、发霉等变化而使制剂产生一些有毒物质。,.,7,国内室外大气含尘含菌浓度,.,8,洁净厂房是指对生产环境空气洁净度有一定要求的厂房。空气洁净度即是空气中所含污染物质的程度。污染物质是对产品质量直接造成不良影响的物质具体是指微粒和微生物。微粒（尘埃）：会导致热原反应，阻塞血管，造成血栓，异物肉芽肿。微生物（细菌和真菌）：使药品染菌、变质，存在范围广、生长速度快、生存能力强。,.,9,表1.4洁净室内微粒来源分析,.,10,操作者对洁净生产环境的干扰,.,11,三、杂质的分类,1一般杂质：是指自然界中分布比较广泛,普遍存在于药材之中,易在中药制剂的生产过程中引入的杂质。如酸、碱、硅酸盐(泥沙)、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、有机氯类农药、甲醇等。它们的检查方法均在中国药典05年版附录中加以规定。2特殊杂质：是指在制剂生产和贮存过程中,可能引入或产生的某种(类)特有杂质,而非大多数制剂普遍存在的。这类杂质被列入中国药典2005年版中有关品种检查项下。例如,大黄流浸膏中的土大黄苷、阿胶中的挥发性碱性物质和附子理中丸中的乌头碱等。从广义来说，制剂中的致病菌、热原等亦属杂质范畴，应根据药品标准对它们进行检查。,.,12,四、杂质检查的方法,一杂质的限量检查杂质限量是指药品中所含杂质的最大允许量,通常用百分之几（%）或百万分之几(mg/kg、ppm)表示。,.,13,杂质的限量检查通常采用比较分析法，即取一定量与被检杂质相同的纯物质或其他对照品配制成标准溶液，与一定量供试药物的溶液，在相同处理条件下，比较反应结果，从而确定制剂中杂质的量是否超过规定的限度。,二杂质限量计算方法,.,14,由于样品（S）中所含杂质的量是通过与杂质标准溶液进行比较来确定的,杂质的最大允许量也就是杂质标准溶液的体积（V）与其浓度（c）的乘积,因此杂质限量（L）可按下式计算。,.,15,例1阿胶砷盐检查的计算取本品2.0g,加氢氧化钙1g,混合,加少量水,搅匀,干燥后先用小火烧灼使炭化,再在500600炽灼使完全灰化,放冷,加盐酸3ml与适量的水使溶解成30ml,分取溶液10ml,加盐酸4ml与水14m1,依法检查（中国药典2000版一部附录F）。如果标准溶液（每1ml相当于1g的As）取用量为2ml,则阿胶中的砷限量为=21.010-6/2.0（10/30）100%=0.0003%,.,16,例2黄连上清丸中重金属检查取本品5丸，切碎,过二号筛,取1.0g,称定质量,照炽灼残渣检查法（中国药典附录J）试验,炽灼至完全灰化。取遗留的残渣,依法检查(中国药典附录E第二法)，含重金属不得过百万分之二十五。问应取标准铅溶液(1ml相当于10g的Pb)多少毫升?V=L*S/C=2.510-51.0/1.010-5=2.5（ml）,.,17,例3注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查取本品0.4g，加2%硝酸镁乙醇溶液3ml，点燃，燃尽后，先用小火炽灼使炭化，再在500600炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸5ml与水21ml使溶解，依法检查（中国药典2005版附录F）。如果标准砷溶液（1gAs/ml）取用量为2ml，杂质限量的计算如下：,.,18,中国药典检查杂质,也有不用标准溶液进行对比分析,而是在供试品溶液中加入检测试剂,在一定条件下,观察有无反应出现,即以该测定条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。如肉桂油中重金属检查:取肉桂油10ml,加水10ml与盐酸1滴,振摇后,通硫化氢气使饱和,水层与油层均不得变(棕黑)色。,.,19,中国药典中许多制剂未规定杂质检查项目,可能是在正常生产和贮存过程中不易引入杂质,或者虽然引入,但含量甚微,对人体无不良影响,也不影响中药制剂的质量,故未规定限量检查。有一些则是由于对杂质的来源和性质尚缺乏足够的认识,难以建立相应的检查项目和方法。凡药品标准中未规定检查的杂质,一般不需要检查,但遇到特殊情况,如检验某制剂时发现其外观性状不正常,检验过程中的反应也不正常时,则需考虑杂质的影响,并对其做进一步追踪检查。,.,20,第二节灰分检查法一、概述1灰分检查包括：总灰分检查和酸不溶性灰分检查。,.,21,中药材及其制剂的原料主要来源于天然植物、动物。若将较纯净的样品粉碎高温炽灼,动植物组织中的有机物全部氧化分解成二氧化碳、水等而逸出,所剩非挥发性物质(主要为药品本身所含各种盐类),则成灰分(烬)而残留。由此所得灰分称为“生理灰分”,即总灰分。例如,夏枯草中的钾盐,大黄、甘草、红花中的草酸钙等。,.,22,总灰分加盐酸处理,得到不溶于盐酸的灰分称为酸不溶性灰分。由于草酸钙等生理灰分可溶于稀盐酸,而泥沙(主要为硅酸盐等外来无机杂质难溶于稀盐酸,因此，对于那些生理灰分本身差异较大,特别是在组织中含草酸钙较多的中药,酸不溶性灰分能更准确表明其中泥沙等杂质的掺杂程度。如大黄的总灰分,由于生长时期不同,可从8%20%以上。在这种情况下,总灰分的测定就难以确证是否有外来无机杂质存在,还需要测定其酸不溶性灰分。中国药典根据不同的情况，规定了不同的灰分检查方法。,.,23,二、测定方法(一)总灰分测定法1.测定原理供试品在500600高温炽灼,使其中有机物质完全分解逸出,而无机成分生成灰分残渣,根据残渣质量,即可计算出供试品中的总灰分的含量。,.,24,2.仪器与试剂标准筛架盘天平(感量0.1g分析天平(感量0.001g马福炉恒温干燥箱精确至士1坩锅10%硝酸铵溶液变色硅胶(干燥剂)等。,.,25,3.操作方法供试品粉碎,过二号筛,混合均匀,取供试品25g(如需测定酸不溶性灰分可取供试品35g),置炽灼至恒重的坩锅中,称定质量（准确至0.01g）,缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至500600,使完全灰化并至恒重。根据残渣质量,计算供试品中总灰分的含量（%）。如供试品不易灰化,可将坩锅放冷,加热水或10%硝酸铵溶液2m1,使残渣湿润,然后置水浴上蒸干,残渣照前法炽灼,至坩锅内容物完全灰化。,.,26,4.注意事项（1）测定前,坩锅应洗净,干燥至恒重(连续两次干燥或炽灼后的质量差异在0.3mg以下)。供试品炽灼后也要至恒重。（2）取供试品23g35g,可用托盘天平(感量0.1g);称定质量（准确至0.01g）,应使用分析天平(感量0.001g)。（3）移动坩锅应使用坩锅钳或厚纸条,不得徒手操作；称量操作应准确无误,否则影响测定结果。（4）对马福炉的使用要严格按操作规程操作。（5）如供试品不易灰化,可将坩锅放冷,加热水或10%硝酸铵溶液2m1,使残渣湿润,然后置水浴上蒸干,残渣照前法炽灼,至坩锅内容物完全灰化。,.,27,（6）炽灼操作时,实验人员不得离去,并注意防止供试品燃烧或引起其他事故。5.记录与计算记录称量数据。总灰分含量（%）=m1/m100%m1：炽灼后供试品质量，gm：炽灼前供试品质量，g,.,28,6.结果判断将计算结果与药品标准进行比较,低于或等于限度的,总灰分符合规定；高于限度的,则不符合规定。,.,29,（二）酸不溶性灰分测定法1测定原理供试品在500600高温炽灼,使其中有机物完全氧化分解逸出,往残留灰分中加入稀盐酸,溶解其中的草酸钙等生理灰分,滤去酸水,得到难溶性残渣,根据残渣质量,即可计算出供试品中酸不溶性灰分的含量。,.,30,（2.仪器与试剂标准筛、架盘天平、分析天平(感量0.0001g)、变色硅胶(干燥剂)、表面皿、坩锅、马福炉、恒温水浴锅、恒温干燥箱(精确至士1)等。10%硝酸铵、稀盐酸、硝酸、硝酸银试液、无灰滤纸等。,.,31,3.操作方法供试品粉碎,过二号筛,混合均匀,取供试品25g（如需测定酸不溶性灰分,可取供试品35g）,置炽灼至恒重的坩锅中,称定质量（准确至0.0lg）缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至500600,使完全灰化并至恒重。根据残渣质量,计算供试品中总灰分的含量（%）。取所得的灰分,在坩锅中小心加入稀盐酸约10ml,用表面皿覆盖坩锅,置水浴上加热10min,表面皿用热水5ml冲洗,洗液并入坩锅中,用无灰滤纸滤过,坩锅,内的残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩锅中,干燥,炽灼至恒重。根据残渣质量计算供试品中酸不溶性灰分的含量（）,.,32,4.注意事项同总灰分测定法。5.记录与计算记录称量数据酸不溶性灰分含量（%）=m1/m100%式中m-炽灼前供试品的质量，g；m1-酸不溶性残渣的质量，g。,.,33,6.结果判断将计算结果与药品标准进行比较,若低于或等于限度,则酸不溶性灰分符合规定；若高于限度则不符合规定。,.,34,三、应用实例(一)阿胶的总灰分测定取阿胶5片,粉碎过二号筛,混合均匀后,取供试品1.0g,将其炽灼至恒重的坩锅中，称定质量（准确至0.01g）,缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时逐渐升高温度至500600，使完全灰化并至恒重，继续炽灼30min，称定灰分质量。计算供试品重总灰分含量，不得超过1.0。,.,35,(二)九味羌活丸的酸不溶性灰分测定九味羌活丸是由羌活、防风、甘草等九味中药制成的水丸,其中含有黄芪、甘草、地黄等多种根类药材,易带入泥沙等杂质。因此，中国药典规定了酸不溶性灰分检查。取九味羌活丸5袋,粉碎,过二号筛,混合均匀后,取供试品35g,置炽灼至恒重的坩锅中，称定质量（准确至0.01g