高通量测序技术平台流程与应用

IlluminaGenomeAnalyzer系统应用方向,DNAFragment文库测序DNAMate-pair文库测序SmallRNA测序数字化表达谱测序转录组测序DNA甲基化测序ChIP-seqMeta-GenomicsDNA测序血浆微量DNA测序,基因组DNA的随机打断DNA片段的末端修复将A碱基加入到DNA片段的3末端在DNA片段的末端加上特定接头PCR扩增连上接头的DNA片段文库检测DNA在ClusterStation的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息组装/分析,IlluminaDNAFragment文库测序流程,IlluminaMate-pair文库测序流程,基因组DNA随机打断特定大小片段（2-10kb范围可选）末端修复生物素标记环化获得来自大片段两端共计400-600bp的DNA片段修饰、加接头PCR扩增连上接头的DNA片段文库检测DNA在ClusterStation上的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息组装/分析,IlluminaSmallRNA测序流程,从总RNA中分离smallRNA5接头连接和纯化3接头连接纯化RT-PCR扩增SmallRNA文库的纯化文库的检测DNA在ClusterStation成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息学分析,Illumina数字化表达谱测序流程,mRNA的分离和cDNA第一链的合成cDNA第二链的合成限制性内切酶NlaIII的酶切连接GEXNlaIIIAdapter1限制性内切酶MmeI的酶切连接GEXAdapter2Adapter连接cDNA产物和PCR富集文库的检测DNA在ClusterStation上的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息学分析,TotalRNA的DNaseI酶消化mRNA分离和随机打断cDNA第一链和第二链的合成DNA片段的末端修复将“A”碱基加入到DNA片段的3末端在DNA片段的末端加上特定接头PCR扩增连上接头的DNA片段文库的检测DNA在ClusterStation上的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息学分析,Illumina转录组测序流程,基因组DNA随机打断DNA片段的末端修复将A碱基加入到DNA片段的3末端DNA片段末端加上特别处理的甲基化接头重亚硫酸盐处理去盐处理PCR扩增连上接头的DNA片段文库检测DNA在ClusterStation上的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息学分析,IlluminaDNA甲基化测序流程,染色质免疫共沉淀目的DNA片段DNA片段的末端修复将A碱基加入到DNA片段的3末端DNA片段末端加上接头PCR扩增加上接头的DNA片段文库检测DNA在ClusterStation成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息学分析,IlluminaChIP-seq测序流程,Meta基因组的提取DNA随机打断DNA片段末端修复将A碱基加入到DNA片段的3末端在DNA片段的末端加上接头纯化连接产物PCR扩增连上接头的DNA片段文库的检测DNA在ClusterStation的成簇扩增IlluminaGenomeAnalyzer上的测序生物信息组装/分析,IlluminaMeta-GenomicsDNA测序流程,收集10-15ml孕妇外周血提取血浆中游离DNAQ-PCR定量总DNA含量构建DNA文库Agilent和Q-PCR检测文库浓度Cluster制备和GenomeAnaly