HbAc基础知识培训PPT课件

.,1,HbA1c定义,HbA1c:葡萄糖与血红蛋白链氨基酸末端的6个氨基酸结合产生的一种特定的糖化血红蛋白血红蛋白被糖化后，氨基酸末端所带负电荷会增加HbA0：没有结合葡萄糖的血红蛋白链氨基酸末端的6个氨基酸HbA1c以百分比表示，即以和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例正常参考范围：4%-6%（NGSP/DCCT标化的方法）,.,2,糖化血红蛋白-血红蛋白的糖基化产物,葡萄糖进入红细胞，在内部与血红蛋白发生反应,血红蛋白,葡萄糖,红细胞,.,3,糖化血红蛋白的生物合成过程（两步）,血红蛋白,葡萄糖,中间产物-LA1cSchiff碱,HbA1c,第一部：快速反应，生成不稳定A1c（LA1c）第二步：缓慢反应，生成稳定的A1c（HbA1c）,.,4,糖化和非糖化的血红蛋白,成人血红蛋白分三种HbA为主要成人Hb,非糖化Hb,糖化Hb,血红蛋白,HbA1c是如何计算的？A1c%=A1c/A0+HbA1,.,5,离子交换色谱所分离的组分解释（非糖尿病样本）,胎儿血红蛋白在胎儿及出生6个月以内的新生儿体内为高浓度，6个月后基本降为成人水平妇产科HbA1c主要用于糖尿病妊娠的筛查,.,6,色谱图举例,HbA1a108(31-32):532-540.*河南省异常血红蛋白的调查与化学结构的分析研究,新乡医学院学报,1988,(02)9-12*中国丝绸之路地区血红蛋白病的遗传流行病学的特点，人类学学报，2001，V20,.,25,变异体对HbA1c准确性的影响,RossJ.Molinaro,TargetingHbA1c:standardizationandclinicallaboratorymeasurement.MLOJan,2008,.,26,血红蛋白变异体对HbA1c结果准确性的影响,对部分方法的检测结果准确性有影响例：A0后有变异体的糖尿病人样本，HbF正常G8标准模式试剂的检测结果偏低1%,G8Variant模式试剂（1.6分钟/test）,G8标准模式试剂（1.0分钟/test）,.,27,血红蛋白变异体与血糖监控,血红蛋白变异体会影响红细胞的寿命，红细胞的寿命会影响糖化血红蛋白的生成这些病人或许应该有不同的糖化血红蛋白的监控时间或者改用其他指标来评估血糖,.,28,小结,影响HbA1c检测结果的非方法学特异的干扰因素影响HbA1c检测的方法学特异的干扰因素有哪些？变异体与A0没有分离开的情况下会导致检测结果偏高还是偏低？为什么？变异体与A1c没有分离开的情况下会导致检测结果偏高还是偏低？为什么？血红蛋白变异体会通过两个方面影响糖化血红蛋白，请详述。临床上对于有血红蛋白变异体的病人有什么建议？实验室应该怎么满足临床的这一需求？,糖化血红蛋白实验室检测指南的要求,2013年中国糖尿病杂志8月刊,.,30,分析系统的要求,测定方法要求溯源到IFCC参考方法，如NGSP认证方法（NGSP认证的有效期是1年）2.实验室要知晓所选分析系统可能存在的干扰因素3.POCT方法的精确性不能满足临床要求，目前不能用于糖尿病的诊断,.,31,中国三级医院的实验室检测情况,数据统计于NCCL历年室间质评数据,采用NGSP标准化方法的实验室占比81%,.,32,HbA1c,TotalGHB,HbA1,在DCCT和UKPD结果发表之前，美国有800个试验室在做A1c检测，CAP实验调查显示在不同的实验室，用不同的检测方法得出的A1c结果存有巨大的差异。,.,33,HbA1c检测的标准化,美国从1996年起开展国家糖化血红蛋白标准化计划（NGSP），在HbA1c的检测值一致性方面取得了巨大成功在NGSP的中心实验室所采用的参考方法是离子交换HPLCNGSP由指导委员会和实验室网络组成。实验室网络包括一级中心参考实验室（CPRL）、一级参考实验室（PRL）和二级参考实验室（SRL）,.,34,目的:1.糖化血红蛋白检测项目实现标准化2.以使各临床试验室的检测结果与DCCT的报告结果具有可比性(该DCCT试验建立了平均血糖与糖尿病并发症的发病风险之间的关系),,.,35,NGSP程序,.,36,NGSP标准化对A1c检测的贡献从无序到有序,2008年调查显示2000多家CAP实验室间使用不同的检测方法的CVs在1.3-7.1%之间，基于A1c检测结果已经能够有效的标准化,.,37,IFCC标准化,2002年IFCC发表文件，正式推荐HbA1c检测的参考方法为HPLC-MS(质谱)或HPLC-CE(毛细管电泳)校准品为纯化的HbAo和HbA1c混合物，共6个浓度室内CV0.472.07%；室间CV1.352.27%,.,38,但是，NGSP和IFCC方法检测HbA1c值存在1%-2%的差异,非糖尿病范围,控制目标,需采取治疗措施,.,39,各个标准与IFCC之间的转换,JDS/JSCC%=0.927*IFCC%+1.73,NGSP%=0.915*IFCC%+2.15,Sweden%=0.989*IFCC%+0.88,.,40,HbA1c的检测必须在世界范围内标准化，包括参考系统和数值报告IFCC的参考系统是唯一的标准化参考系统HbA1c以IFCC单位(mmol/mol)以及转换的NGSPunits(%)报告，使用IFCC-NGSP换算公式需要确保基层糖尿病容易获得IFCC和NGSP转换公式杂志编辑和出版物建议采用SI(IFCC)和NGSP双重单位报告HbA1c糖化血红蛋白的标准化称谓为HbA1c，在指南或教育材料中也可以简写为A1C,2010年HbA1c标准化第二次全球共识(ADA、EASD、IDF、IFCC和ISPAD),2010inAnnalsofClinicalBiochemistry,ClinicalChemistry,ClinicalChemistryandLaboratoryMedicine,DiabetesCare,DiabetesResearchandClinicalPractice,Diabetologia,DiabeticMedicineandPediatricDiabetes.,NGSP=0.09148*IFCC+2.152,.,41,NGSP和IFCC之间的转换,NGSP=0.09148*IFCC+2.152,.,42,糖化血红蛋白HbA1c,HbA1c的临床应用与实验室检测相符相承,实验室检测标准化,血糖监控指标,糖尿病筛查与诊断,1993,2010,.,43,分析系统性能指标要求,报告结果：以HbA1c相当于HbA1c报告结果，因为只有这一个分析项目才有评估并发症发生的优良数据库。精密度：室内CV3%,以小于2%为宜；测定质量目标：0.5%HbA1c准确度：与可接受参考值的差值在0.5%HbA1c范围内准确度验证方法：1）参加室间质评活动2）检测有证参考物质；3）与运行经过认证系统的有资质实验室的测定结果进行比对,注意：没有直接的证据显示其它检查的数据与糖尿病长期并发症风险有关(例如：总糖化血红蛋白、果糖胺或糖化血清蛋白),.,44,实验室不精密度对检测结果变异性的影响,6.5%的HbA1c在不同分析不精密度水平下的95.5%离散程度,.,45,不同室内CV对A1C分析的影响（95%的可信区间）,正常人和病人无法区分,血糖控制好坏无法区分,HbA1c结果不准确对临床医生判断的影响,正常值与医学决定水平差值小HbA1c可诊断DM（只有室内CV3%,才能室间CV5%）,为什么A1c有严格的精密度要求？,.,46,部分仪器的国内外差距巨大,伯乐公司的三款仪器的CV%国内外表现一致而Primus、G7和Roche的仪器国内外精密度差异显著,数据来源：NCCL糖化等7项室间质评会（2011年）,原因？,超柱效与国际不同试剂型号日立开放试剂,.,47,5.色谱柱,适用于使用色谱柱方法实验室应