果蔬中农药残留的快速检测【果蔬中有机磷农药残留快速检测技术】

果蔬中农药残留的快速检测【果蔬中有机磷农药残留快速检测技术】 摘要有机磷农药残留的检测是农残检测的重点，介绍了用酶试剂法对果蔬中有机磷农药残留进行快速检测的技术，以供参考。 关键词果蔬；有机磷农药残留；快速检测；酶试剂法；仪器使用；样品测试 TS255.7；X835 B 1007-5739（xx）03-0177-01 周口市是一个农业大市，粮、油总产多年来均居全省第1位。近年来，由于周口市工农业的发展，农药、化肥用量激增，农产品污染日益严重。如果人们长期食用残留一定农药的蔬菜、水果则会造成慢性中毒和其他不良反应，甚至因食用带有残留农药的蔬菜导致中毒死亡。另外，周口市农药市场的现状是杀虫剂占农药市场的70%，杀虫剂中有机磷产品占70%，有机磷农药中高毒农药占70%。因此，有机磷农药残留量的检测是农产品检测的重点。 国家对有机磷类农药残留的检测普遍采用的方法为：先用50 mL乙腈提取，用无水NaCl吸取样品中的水分，充分混匀后静置，待分层后提取上层乙腈相，80 水浴，N2吹近干，加丙酮定容后用气相色谱测定1-2。有机磷类农药在前处理时损失严重，回收率低；前处理用有剧毒的乙腈作提取相，对人体损害大，且检验比较繁琐。如何对蔬菜、水果中的有机磷农药残留快速准确地进行测定成为监管工作的关键。笔者用酶试剂法对有机磷农药残留进行检测，与气相色谱检测结果相比较，在检出的30份样品中，阳性结果的符合率均在80%以上，效果较好。现将该方法介绍如下。 1酶试剂法的原理 在一定条件下，有机磷类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，它会抑制人体中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响其正常传导，使人致死。其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412 nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷类农药的存在3。 2试剂的配制 一是缓冲溶液的配制。取11.9 g无水磷酸氢二钠与3.2 g磷酸二氢钠，1 000 mL蒸馏水溶解，制成pH值为8.0的缓冲液。二是显色剂的配制。取160 mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6 mg碳酸氢钠，20 mL缓冲液溶解，4 保存。三是底物的配制。取25.0 mg硫代乙酰胆碱，30 mL蒸馏水溶解，摇匀后置4 下保存备用。四是乙酰胆碱酯酶的制备。用缓冲液溶解，3 min的吸光度变化值应控制在0.3以上。摇匀后置4 下保存备用，保存期不超过4 d。 3仪器使用 仪器为厦门市信仪科技有限公司生产的PR-203-6T型农药残留快速测试仪。它有6个通道室，进行样品检测时，必须先做对照测试。首先开机预热15 min。使用时先进行参数设置，显示方式在“透光度”、“吸光度”、“透射比”和“吸收比”4个参数间选择，显色时间19 min，数据传输到“打印机”，自检则检测各通道的光能量。进行对照测试时，试样室第1通道放置对照试样，第26通道可放置样品试样，试样放入试样室后，合上试样室盖，按【对照】键，仪器进行测试，同时显示屏第1通道序号左边显示“*”号（表示该通道为对照试样），显示屏下方提示栏显示：“对照测试，显色时间”。进行样品测试时，试样室第16通道均可放置样品试样，试样放入试样室后，合上试样室盖，按【样品】键，仪器开始测试，同时显示屏下方提示栏提示：“样品测试，显色时间”。 4果蔬中农药残留的测试 一是对照测试。取酶液100 L，缓冲液2.5 mL，加入1 cm的比色皿中，混匀，再加入显色剂100 L，底物100 L，摇匀后及时放入仪器，按【对照】键进行对照测试。注意：试样放入试样室前应按【100%T/ABSO】键使透光度值为100.0或吸光度值为0.000。二是样品提取。取2 g果蔬样品放入三角瓶中，加入10 mL缓冲液，振荡提取2 min后过滤即为待测样品。葱、蒜、萝卜和一些叶绿素含量较高的蔬菜中，含有的植物次生物质对酶的活性产生影响，容易产生假阳性。必须进行处理，对于葱，先去掉须根，再把其根部剪掉，用天平称取重量，放入三角瓶中，吸取缓冲液的毫升数是其重量数的5倍，振荡后过滤即为待测样。蒜、萝卜、叶绿素含量高的蔬菜，先称取整株的重量，再用毫升数是其重量数5倍的缓冲液浸泡，振荡后过滤即为待测样品。三是样品测试。取酶液100 L，待测液2.5 mL，加入1 cm比色皿中摇匀，静置10 min后，加入显色剂100 L，底物100 L，摇匀后立即放入仪器中，按【样品】键进行测试。注意：当温度条件低于37 时，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长，当胆碱酯酶空白对照3 min的吸光度变化值在0.3以上，才可往下操作4。 5测试结果的判断 若被测样品的酶抑制率超过50%，则表明被测蔬菜中含有高剂量的有机磷农药，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。 6 _ 1 唐勤学，陶小林，黎司.有机磷农药残留检测技术的研究进展J.化工时刊，xx，22（9）：68-72. 2 李?辛，董全.有机磷农药残留检测技术的研究进展J.中国食物与营养，xx（4）：12-15. 3 邱朝坤，刘