三聚氰胺的检测液相法PPT课件

.,1,三聚氰胺,分子式：C3H6N6分子量：126.15英文名：Melamine,.,2,三聚氰胺-结构式,.,3,三聚氰胺,俗称蜜胺、蛋白精，又叫2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种重要的有机化工原料。,.,4,三聚氰胺,三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g/cm3(16)。在水中溶解度随温度升高而增大,在20时，约为3.3g/L，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。,.,5,三聚氰胺,遇强酸或强碱水溶液水解，胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。,.,6,三聚氰胺检测过程,.,7,检测_选择方法,原料乳与乳制品中三聚氰胺的检测方法：GB/T22388-2008饲料中三聚氰胺的测定：NY/T1372.29-2007,.,8,检测_试剂,甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。氨水:浓度25%-28%。三氯乙酸溶液10g/L：称取10g三氯乙酸加水至1L。,.,9,乙酸铅溶液(22g/L):称取22g乙酸铅,用约300mL水溶解后定容至1L。氨水甲醇溶液：量取5ml氨水，溶解于100ml甲醇中。20%甲醇溶液：200ml甲醇加入800ml一级水中，混匀。方法所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。,.,10,检测_标准品,三聚氰胺标准品（纯度99%）。,.,11,检测_标准品,标准储备液准确称取100mg（精确到0.1mg）三聚氰胺标准品于100mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4避光保存。,.,12,检测_标准品,标准品中间液精确吸取标准储备液5.00mL于50mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度，配制成浓度为100g/mL的溶液，于4避光保存。,.,13,检测_标准品,标准品工作液精确吸取标准中间液0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL于5个100mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度.于4避光保存。,.,14,检测_标准品,.,15,检测_标准品,标准工作液浓度可根据所测样品中的具体含量调整。如果只做单点标样，请选择与样品浓度最接近的一个点。,.,16,检测_标准品谱图,.,17,检测_标准品曲线,.,18,检测_样品预处理,原理：样品沉淀脂肪和蛋白质，调PH至中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。,.,19,检测_样品预处理,准确称取610g样品于50ml容量瓶中。加入三氯乙酸溶液约20ml，要徐徐加入，并摇动容量瓶，超声提取10-20分钟，加入2ml乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀释至刻度。静置30分钟，用滤纸过滤，滤液（如不需净化）经滤膜(0.45m)过滤，滤液供液相测定用。,.,20,检测_样品预处理,如需净化，按以下步骤操作:小柱活化：依次用3mL甲醇和3mL水活化小柱。上样：准确吸取10mL（可根据实验情况调整）滤液转移至固相萃取柱中。,.,21,检测_样品预处理,净化：再用3mL水和3mL甲醇分别洗涤，抽至近干。洗脱：用6mL氨化甲醇溶液洗脱，收集全部洗脱液。控制流速在1mL/min以内。,.,22,检测_样品预处理,洗脱液于50下用氮气吹干，残留物用1mL流动相（或20%甲醇水溶液）溶解，涡旋混合1min，供液相测定用。,.,23,检测_色谱条件,色谱柱：C18或C8柱，或同等性能的柱子；4.6mm250mm，5m。流动相：称取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液900ml加入100ml乙腈，混匀。,.,24,检测_色谱条件,流速：1mL/min。进样量：10L。检测器：紫外检测器，波长240nm。根据保留时间定性，外标峰面积法定量。,.,25,检测_样品谱图,.,26,检测_调节流动相,水相乙腈=9010适宜大多数的样品。适当增加水相的比例可推迟出峰时间，使分离度变大。,.,27,结果,计算检出限,.,28,结果_计算,原理：外标法C标A样D单点法公式：XA标mC样D多点法公式：Xm,.,29,结果_计算,式中：X-样品的含量，mg/kg；C标-标准使用液浓度，g/ml；C样-样品浓度，g