HPV-基因分型检测的临床应用及意义科左中旗

HPV基因分型检测的临床应用,亚能生物技术（深圳）有限公司,技术服务部：王恩明,主要内容,HPV与宫颈癌HPV检测的临床应用HPV基因分型检测的优势HPV检测后的临床处理亚能HPV基因分型检测产品介绍,一.HPV与宫颈癌,HPV与宫颈癌的关系,“几乎所有宫颈癌患者的病理样本中均能找到HPV病毒，从而印证了HPV是宫颈癌的主要原因，也使宫颈癌成为目前人类所有癌症病变中唯一个病因明确的癌症。”,WalboomersJM,etal.JPathol.1999Sep;189(1):12-9,长期持续感染高危型HPV可以致癌，危害生命。近期欧洲及其它各地的人群随意HPV筛选结果证实，HPV可在99.7%的宫颈癌患者中发生。研究发现，除宫颈癌之外，生殖器恶性癌症如阴茎癌、外阴癌，以及肛门癌、口咽癌等都与HPV感染有关，全世界5.2%的现患癌症都与HPV有关。ParkinDM(2006)Theglobalhealthburdenofinfection-associatedcancersintheyear2002.IntJCancer118:3030-3044.低危型HPV可导致生殖器尖锐湿疣，影响生活质量。临床上约70%的尖锐湿疣患者可检测出HPV感染，主要为HPV6、11型等低危型。,HPV感染及相关疾病,潜伏感染期亚临床感染期临床症状期HPV相关肿瘤期,HPV感染途径：性接触传播：丈夫阴茎HPV的存在可使妻子宫颈受染的危险增加9倍，相同的HPV亚型可以在性伴侣中检出，与此相反，处女通常是检测不到HPV感染；非性直接接触感染：通过接触病变部位及病人分泌物感染；间接接触：通过病人的衣物和用品感染；母婴传播：母亲生殖道的HPV感染也可以传播至她们的婴儿的口腔中。,HPV与宫颈癌关系,高危型HPV的持续感染是宫颈癌的主要病因。HPVDNA的拷贝数（载量）并不与疾病进展直接相关。宫颈癌是一种感染性疾病，预防HPV感染就可以预防宫颈癌。HPV感染在30岁以下（1828）性活跃的年轻妇女是是比较常见的。对于性活跃女性妇女，宫颈至少感染一种HPV的终生累计概率可高达60%-70%。多数HPV感染是“一过性”的，并不引致宫颈病变。从HPV感染到宫颈癌的发生是一个相对缓慢的过程，一般需要510年时间。筛查是宫颈癌早诊早治的关键。,二.HPV检测的临床应用,WHO（2013）首次将HPV检测作为筛查的首选,WHO：世界卫生组织,宫颈癌筛查及早诊早治指南-中国癌症研究基金会,筛查对象：三年以上性行为或21岁以上有性行为的女性随访对象:细胞学LSIL、组织学CIN“特殊职业”人群、30岁以上高危HPV感染者,宫颈癌筛查新方案,EUROGIN：欧洲生殖道感染和肿瘤组织,NEnglJMed.2009Apr2;360(14):1385-94,日期：1999-2007年对象：131746人，30-59岁,HPV检测比其他筛查方法，能显著降低晚期宫颈癌的发病率和死亡率！,对ASCUS的分流处理,HPV检测和细胞学检查的对比研究,细胞学对ASCUS及以上的灵敏度为55%，而HPV检测的灵敏度是96%。,2006consensusguidelinesforthemanagementofwomenwithcervicalintraepithelialneoplasiaoradenocarcinomainsitu.www.AJOG.org,（三）宫颈病变及治疗后的随访（1）,HPV基因分型检测在产前检查中的作用,妊娠期HPV感染率明显高于非妊娠期健康妇女,且感染率随妊娠进展而逐渐上升,其中高危亚型尤为明显,对HPV分型检测，对于评估和预防宫颈病变有一定的临床意义，需要引起临床重视。以下是文献论证。,妊娠与人乳头瘤病毒感染及其处理（综述）,妊娠期HPV感染对孕产妇及胎儿、婴幼儿的影响由于妊娠期母体的免疫功能受抑制,加之阴道分泌物增多和外阴部湿润温暖,因此一旦感染HPV,患尖锐湿疣,疣体增长迅速,复发率高,可对继续妊娠造成影响。妊娠期HPV感染可导致婴儿感染,可能造成新生儿喉乳头瘤等疾病。临床上常可观察到HPV引起的生殖道疣在妊娠期迅速增大,甚至发展为巨型疣(Buschke-loewenstein瘤)；多数研究表明,妊娠期妇女由于受胎盘激素、免疫及血管系统变化的影响,疣体常迅速增大,其亚临床感染率亦较非孕期显著增高；,上海市卫生局科技发展基金(034053)资助项目,JournalofShanghaiJiaotongUniversity(MedicalScience).Vo.l26No.12Dec.2006,妊娠期及产后妇女高危型人乳头状瘤病毒感染结果分析,妊娠组与对照组(P0.05),5个年龄阶段感染率呈现先高后低再度升高的感染趋势,结论：妊娠期进行HPV感染的检测是必要的、安全的，对于评估和预防宫颈病变有一定的临床意义.,中国医药导报2013年2月第10卷第4期,三.HPV基因分型检测的优势,JNatlCancerInst，2005;97:10729,一项大样本（20810人）研究表明：30岁细胞学阴性的女性，在10年的前瞻性研究中，HPV16或18阳性妇女CIN3+的累积发病率分别为20.7%，17.7%，而其他高危型阳性的妇女，CIN3+的累积发病率仅仅为1.5%。结论：HPV16，18比其他高危型更具致癌风险,（一）不同高危型HPV致癌风险不同,分型检测有助于明确致癌风险、指导临床处理,处理方法也不同,JNatlCancerInst，2005;97:1072-9,二、分型检测有助于提示治疗后复发风险,研究表明：21岁的高危型HPV持续感染者中，大约有44.6%会在LEEP刀手术后出现复发病情。复发患者中单一HPV感染者比例高达94.6%，各基因型感染率如下表：,16、18型HPV持续感染手术后更易复发！,AmericanJournalofObstetrics325:572.,四、分型检测可以更准确地预测病变发展,五、HPV分型检测是流行病学调查的必要手段,浙江省宫颈人乳头瘤状病毒感染情况筛查报告赵湘婉，舒淑娟，石一复等。中华妇产科杂志，2009，44（8）：621-627,六、分型检测是HPV疫苗研制及使用的重要依据,四.HPV检测后的处理,五.亚能HPV基因分型,人乳头瘤病毒（HPV）基因检测试剂盒（PCR-反向点杂交法）,国食药监械(准)字2008第3400994号,亚能HPV基因分型试剂盒性能指标,检测通量：同时分型检测23种HPV基因型18种高危型：16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，83，825种低危型：6，11，42，43，81,HPV基因分型检测流程,采样前准备,月经正常妇女，在月经来潮后10-18天为最佳检查时间，经期不宜检查；(减少受检者损伤）检查前三天内不要做阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物；（可能会抑制PCR的反应）检查前24小时内不应有性行为；检查前不进行醋酸或碘液涂抹。（可能会抑制PCR的反应）,标本采集及注意事项,样品保存：室温下放置时间不超过12h，4保存不超过7天，-18保存不超过3个月,亚能HPV基因分型试剂盒性能指标,灵敏度：1.0103copies/mL准确性：98%以上特异性：98%以上重复性：98%以上稳定性：有效期内完全能满足以上指标检测通量：同时分型检测23种HPV基因型18种高危型：16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，83，825种低危型：6，11，42，43，81,HPV基因分型检测的适用人群,三年以上性行为或21岁以上有性行为的女性细胞学结果为ASCUS的患者宫颈病变及宫颈癌患者尖锐湿疣患者,卫生部PCC项目指定产品中国检验医学“十大先进试剂”获WHO/IARC中国研究项目临床验证的HPV分型产品2011国家重点新产品广东省自主创新产品产品覆盖800多家医院，分型检测单品年销售过百万人份200余篇专业文献，服务临床应用,亚能-HPV基因分型（23型）检测试剂盒,业界肯定,卫生部“PCC”项目：指定使用亚能生物HPV基因分型检测试剂,2009年中国检验医学“十大先进试剂”20