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文档简介
第二章,血液一般检验(手工法),主要内容,第一节白细胞检查第二节红细胞检查第三节血小板检查,第一节白细胞检查,一.白细胞计数二.白细胞分类计数三.白细胞形态检查四.嗜酸性粒细胞计数,返回,一、白细胞计数(WhitebloodcellcountingWBC),【概述】【检测原理】【方法学评价】【参考值】【质量控制】【临床意义】见白细胞分类计数,返回,【概述】,白细胞是指外周血中的有核细胞:(一)白细胞分类1、粒细胞2、淋巴细胞:B细胞,参与体液免疫。T细胞,参与细胞免疫。3、单核细胞:强大的吞噬功能、参与杀菌、免疫及抵抗肿瘤作用。(二)粒细胞动力学,中性粒细胞:防御功能嗜酸性粒细胞:限制过敏反应,参与蠕虫的免疫反应。嗜碱性粒细胞:形态功能与肥大细胞相似,参与超敏反应。,返回,(二)粒细胞动力学,返回,【检测原理】,白细胞计数:是指测定单位体积外周血(循环池)中各种白细胞的总数。目前白细胞计数的方法有显微镜计数法和血细胞分析仪法白细胞显微镜计数法原理:用白细胞计数稀释液(多用稀乙酸溶液),将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,滴入计数盘中,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。,返回,【方法学评价】,1显微镜计数法:设备简单、费用低廉;费时、重复性较差,结果的准确性取决于操作者的技术水平。2血细胞分析仪法:操作简便、效率高、重复性好,仪器较贵,准确性取决于仪器的性能。,返回,【参考值】,成人:(4-10)109/L新生儿:(15-20)109/L6月-2岁:(11-12)109/L儿童:(5-12)109/L,返回,【质量控制】,1.计数误差()技术误差:由于操作不规范或使用器材不准确、操作人员责任心不强等原因所造成的误差。通过熟练的操作及仪器的效正而显著减少甚至避免。()固有误差:包括计数域误差、吸管误差和计数室误差。根据统计学原理发现血细胞在计数池中的分布符合poison分布,和计数细胞的多少成反比。,下一页,、有核红细胞的影响,校正公式:校正后的细胞数/L=:校正前白细胞数y:在C时,计数100个白细胞的同时计数到有核红细胞数。,+y,下一页,3、经验控制,()与红细胞相对比较:正常情况下,红细胞白细胞数约为500:1、熟练的检验人员可很快的做出估计,判断白细胞计数是否正确。判断白细胞计数与显微镜白细胞分布的密度的一致性:,下一页,4.常规考核标准,超过下述标准为不合格,应重新充池计数。RCS=WBC4.0109/L,RCS30%WBC在(4.114.9)109/L,RCS20%WBC15109/L者,RCS15%。,返回,二、白细胞分类计数法,【概述】【检测原理】【方法学评价】【参考值】【质量控制】【临床意义】,返回,【概述】,由于各种白细胞所行使的功能不同,血液中它们的数量及形态变化所致的临床意义也不同,因此仅对白细胞总数计数是不够的,还必须对各类白细胞分别计数,即分类计数(DC)。有显微镜法和血细胞分析仪法两种方法。本节主要介绍显微镜分类法。,返回,【检测原理】,显微镜白细胞分类:是将血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,经瑞氏染色后于显微镜下观察,根据白细胞的大小、形态、核形、染色质、胞质的颜色及有无颗粒等情况综合分析,逐个分别计数,得出各种白细胞的相对比值或百分率,并注意观察其形态的变化。,返回,【方法学评价】,1、显微镜法:是白细胞分类计数经典方法。设备简单、费用低廉,但费时,且结果的准确性取决于操作者的技术水平。是白细胞分类计数的参考方法。2、血细胞分析仪法:用于白细胞分类的白细胞分析仪目前有两大类:三分群和五分类。其速度快,准确性高,易于标准化,是白细胞分类和筛查的首选方法。但是血液细胞分析仪法只能作健康筛查,而不能完全代替显微镜法对异常白细胞进行鉴别和分类。,返回,【参考值】,返回,【质量控制】,1血涂片制备;良好的血涂片标志:厚薄适宜、头体尾分明、两侧留有空隙。2镜检部位:细胞分布均匀多在片头至片层的3/4区域,分类常选择在体尾交界处,按一定方式有规律地移动视野。3染色:经瑞氏染色血膜外观呈淡紫红色。镜下观:红细胞呈粉红色。白细胞胞质中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩。细胞核染紫红色,核染色质结构清楚。4镜检的细胞数量:根据白细胞总数而定,一般要求在油镜下或高倍镜下分类计数100个白细胞当白细胞总数15109/L时,应DC计数200个WBC。当白细胞总数3109/L时,可多检查几张血涂片,DC计数50100个WBC。,下一页,5报告方式:,各种白细胞所占的比值或百分率表示(包括幼稚或异常的细胞)。如N0.68或68%。幼稚或异常的细胞,应分类报告,并包括在白细胞分类比值或百分率中。有核红应单独报告,不列入白细胞总数之内,应报告分类100个WBC,同时见到有核RBC数。寄生虫应报告。RBC、Pt有异常变化应报告。,返回,【临床意义】,(一)中性粒细胞数量变化的临床意义(二)嗜酸性粒细胞的临床意义(三)嗜碱性粒细胞数量变化的临床意义(四)淋巴细胞数量变化的临床意义(五)单核细胞数量变化的临床意义,返回,(一)中性粒细胞数量变化的临床意义,1.中性粒细胞生理性变化2.中性粒细胞病理性增多3.中性粒细胞减少,返回,1.中性粒细胞生理性变化,年龄:日间变化:早晨低,下午高.运动、疼痛和情绪的影响:妊娠与分娩:其他:吸烟者,返回,2.中性粒细胞病理性增多,急性感染:如化脓性感染扁桃体炎、阑尾炎轻度感染WBC总数可正常,分类时可见N分叶核增高。中度感染WBC总数常10109/L,伴轻度核左移。重度感染WBC总数常20109/L,伴明显核左移。感染过于严重WBC总数不增高,反而降低,核左移很明显。如中毒性休克。严重组织损伤及大量血细胞破坏:如严重的烧伤、较大手术后,心肌梗死、急性溶血。急性中毒:如安眠药、有机磷、糖尿病酮症酸中毒、慢性肾炎尿毒症。急性内出血:如脾破裂、宫外孕破裂。白血病及恶性肿瘤。类白血病反应:是指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。,返回,3.中性粒细胞减少,某些感染:伤寒、流感(暂时性)某些血液病:AA、非白血性白血病(持续性)慢性理化损伤:X射线、氯霉素药物自身免疫性疾病:系统性红斑狼疮脾功能亢进:,返回,(三)嗜碱性粒细胞的临床意义,1.嗜碱性粒细胞增多慢粒(CML)嗜碱性粒细胞白血病过敏性疾病骨髓纤维化2.嗜碱性粒细胞减少:临床意义不大。,返回,(四)淋巴细胞数量变化的临床意义,(1)淋巴细胞增多生理性增多病理增多:绝对增多某些传染病:如风疹、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症(传染性淋巴细胞增多症)百日咳;某些慢性感染:如结核病恢复期,急、慢性淋巴细胞性白血病。相对增多:如AA、粒细胞缺乏症。(2)淋巴细胞减少:接触放射线及应用肾上腺皮质激素之后。,返回,(五)单核细胞的临床意义,单核细胞增多某些感染如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染的恢复期、活动性肺结核;某些血液病单核细胞性白血病、粒细胞缺乏症的恢复期、恶组、淋巴瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)。单核细胞减少:临床意义不大。,返回,三、白细胞形态检查,在病理情况下,除白细胞计数和白细胞分类计数发生变化,有时白细胞的形态会发生改变。(一)外周血正常白细胞形态(表)图片见第一节(二)外周血异常白细胞形态1.中性粒细胞毒性变化2中性粒细胞的核系变化3.淋巴细胞形态异常4其他异常白细胞,返回,(一)外周血正常白细胞形态(表),返回,1.中性粒细胞的毒性变化,大小不均:(图)中毒颗粒:N胞质中出现粗大、大小不等、分布不均匀、紫黑色或深紫红色颗粒。(图)空泡:胞质发生脂肪性的结果。(图)杜勒体:是中性粒细胞胞质毒性变化而保留的局部嗜碱性区域。呈园形、犁形或云雾状,天兰色或灰兰色。(图)核变性:包括核固缩、核溶解、核碎裂。(图),返回,大小不均,返回,中毒颗粒,返回,空泡变性,返回,杜勒体,返回,中性粒细胞退行性变,返回,2中性粒细胞的核系变化(图),核左移(图)外周血中杆状粒细胞增多并出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞时称为核左移,再生性核左移:指核左移伴白细胞增高,表示骨髓造血旺盛,机体抵抗力强。如急性化脓性感染。退行性核左移:核左移伴白细胞总数不增高或减低,表示骨髓释放受抑制,机体抵抗力差。如伤寒。核左移根据程度分:轻度核左移:仅见杆状核粒细胞6%。中度核左移:杆状核粒细胞10%,有少量晚幼粒、中幼粒。重度核左移(类白反应):杆状核粒细胞25%,可见早幼粒、原粒,伴明显的中毒颗粒、空泡、核变性等质的改变。,(2)核右移(图),外周血中5叶核及5叶核以上的中性粒细胞3%时称核右移。核右移常伴有白细胞总数的减少,属造血功能衰退的表现。如营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血。,返回,中性粒细胞核象变化,返回,核左移,返回,核右移,返回,3.淋巴细胞形态异常,(1)异型淋巴细胞:又称“Downey”细胞按形态分三型:型(空泡型):浆细胞型(图)型(不规则型):单核细胞型(图)型(幼稚型):未成熟细胞型(图)异型淋巴细胞增多:如传染性单核细胞增多症,病毒性肝炎,流行性出血热、湿疹及过敏性疾病。(2)具有卫星核的淋巴细胞:常作为致畸、致突变的客观指标之一。(图),返回,4其他异常白细胞,巨多核中性粒细胞(图)棒状小体(图)皮杰畸形(Pelger-Huetanomaly)(图)切-希畸形(Chediak-Higashi)常染色体隐性遗传性疾病(图)AlderReilly畸形(图)梅-赫畸形(May-Hegglinanomaly)(图),返回,型异淋(空泡型),返回,型异淋,返回,型异淋,返回,具有卫星核的淋巴细胞,返回,巨多核中性粒细胞,返回,棒状小体,返回,Pelger-Huet畸形,返回,Chediak-higashi畸形,返回,AlderReilly畸形,返回,May-Hegglin畸形,返回,三.嗜酸性粒细胞直接计数,【概述】【测定原理】【方法学评价】【质量控制】【参考值】【临床意义】,返回,【概述】,由于嗜酸性粒细胞在外周血中百分率很低,故经白细胞总数和嗜酸性粒细胞百分率换算而来的绝对值误差较大,因此,在临床上需了解嗜酸性粒细胞的变化时,应采用直接计数法。,返回,【测定原理】,用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏红细胞和大部分其他白细胞,并将嗜酸性粒细胞着色,然后滴入细胞计数板中,计数一定范围内嗜酸粒细胞数,即可求得每升血液中的嗜酸性粒细胞数。保护剂:如乙醇、乙二醇、丙酮等破坏红细胞和中性粒细胞:碳酸钾或低渗溶液染色成分:如溴甲酚紫、伊红、石楠红等,返回,【方法学评价】,1、显微镜计数法:重复性差,精确性不如血液分析仪法;用血涂片分类时,由于嗜酸性粒细胞分布趋与边缘,其百分率的准确性决定于血涂片制备质量。嗜酸性粒细胞绝对值比百分率在临床上更有意义,间接计算得到的嗜酸性粒细胞绝对值不如嗜酸粒细胞直接计数法准确2、血液分析仪器法:,返回,【质量控制】,1、本试验应在0.5-1小时内计数完毕。2、在血液稀释混匀中,不要用力振荡。3、住院病人作嗜酸性粒细胞计数,应固定时间,以免受日间生理变化影响。4、注意与中性粒细胞区别。5、乙醇、丙酮易挥发,使结果偏低。,返回,【参考值】,(0.050.5)
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