GA-L性能说明新讲解检验科用2012ppt课件.ppt

露喜佳LucicaGA-L酶法糖化白蛋白（液状试剂）,澳斯邦生物工程有限公司,2012。6。28,1,露喜佳GA-L的开发历史露喜佳GA-L试剂性能介绍露喜佳GA-L试剂的优点,2,1976methodFlukigerR.,et.al1981FurosinemethodSchleicherE.,et.al1982FructosamineJohnsonRN.,et.al1982AffinitymethodDennisC.,et.al1985methodTanedaS.,et.al1988methodShimaK.,et.al1989ELISAmethodCohenMP.,et.alEIAmethodMiyakeY.,et.alEnzymaticmethod高妻.,et.al(LucicaGA)2004Enzymaticmethod高妻.,et.al(LucicaGA-L),露喜佳GA-L的历史（论文报告）,3,年代糖化血红蛋白年代血红蛋白A1c,GA和A1C的进化（商业上）,年代果糖胺,：葡萄糖,球蛋白等34%,66%,白蛋白,不稳定型A1c,年代稳定型HbA1c,年酶法糖化白蛋白,年糖化白蛋白,GA为血清蛋白(果糖胺)的进化型。其发展比血红蛋白(A1C)晚。,4,GSP/ALB(%),5,露喜佳GA-L的开发历史露喜佳GA-L试剂性能介绍露喜佳GA-L试剂的优点,6,露喜佳LucicaGA-L产品概述,用于自动生化分析,试剂全部为液体并分别包装,有效期:12个月,对白蛋白和糖化白蛋白的双向测定,保存方法：210,7,露喜佳GA-L反应原理（GA试剂）,专利,8,露喜佳GA-L反应原理（ALB试剂）,）白蛋白的前处理（ALBR-1）,）白蛋白的测定（ALBR-）,专利,9,露喜佳GA-L操作法和反应曲线,糖化白蛋白值(%)的计算用糖化白蛋白的浓度除以白蛋白的浓度，算出试料中的糖化白蛋白值(%)。,（日立为例）,糖化白蛋白反应曲线,0,25,50,75,100,125,150,0,5,10,15,20,25,30,35,测定点（日立）,灵敏度（）,健康者血清,患者血清,白蛋白反应曲线,0,50,100,150,200,250,300,0,5,10,15,20,25,30,35,测定点（日立）,灵敏度（）,低白蛋白,血清,健康者血清,10,露喜佳GA-L定量性(稀释直线性),GA浓度至.g/d有直线性。ALB浓度至.g/d有直线性。,用高浓度试样，以蒸馏水稀释；研究稀释直线性，取得测定上限浓度。,11,露喜佳GA-L测定范围,将高GA值(68.1%)试样和低GA值(3.2%)试样进行混合，测定各个混合试样的GA值，确认其直线性，并研究GA值的测定范围。显示良好的直线性，作为GA值在3.268.1范围能作正确地测定。,12,露喜佳GA-L同时重复性,用管理血清，健康者血清以及患者血清，同时测定次，研究重复性。同时重复性不管血清的种类，CV均在1以内，取得稳定的测定结果。,13,露喜佳GA-L日间重复性,用健康者血清和患者血清，32天内测定20次，研究日间重复性。不依靠校准方法，也能取得稳定的测定结果。,4.52,15.8,16.1,0.896,0.889,4.16,4.04,24.2,24.7,第26天,0.615,0.607,4.64,4.48,16.0,16.2,0.890,0.896,4.12,4.00,24.3,25.1,第29天,0.609,0.600,4.66,4.48,15.8,16.1,0.886,0.883,4.20,4.00,23.8,24.8,第30天,0.612,0.608,4.62,4.56,15.9,16.0,0.888,0.888,4.12,4.04,24.3,24.7,第31天,0.600,0.605,4.56,4.46,15.9,16.3,0.885,0.890,4.08,4.00,24.4,25.0,第32天,0.606,0.606,4.62,4.52,15.8,16.1,0.885,0.886,4.06,4.04,24.5,24.6,AVG,0.608,0.605,4.60,4.49,15.9,16.2,0.891,0.891,4.1,4.0,24.3,24.8,SD,0.004,0.003,0.040,0.029,0.109,0.091,0.004,0.004,0.038,0.025,0.182,0.166,CV%,0.66,0.53,0.88,0.65,0.68,0.56,0.49,0.44,0.92,0.63,0.75,0.67,患者血清,GA浓度(g/dl),ALB浓度(g/dl),GA%,GA浓度(g/dl),ALB浓度(g/dl),GA%,健康者血请,初次:只有初次测定时作校准每次:每次测定时都作校准,14,露喜佳GA-L共存物质的影响-1-,胆红素F的影响,0,20,40,60,80,100,120,0,5,10,15,20,胆红素F(mg/dl),影响率(%),-,胆红素C的影响,0,20,40,60,80,100,120,0,5,10,15,20,胆红素C(mg/dl),影响率(%),-,乳糜的影响,0,20,40,60,80,100,120,0,400,800,1200,1600,2000,乳糜（度）,影响率(%),-,葡萄糖的影响,0,20,40,60,80,100,120,0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,葡萄糖(g/dl),影响率(%),-,15,露喜佳GA-L共存物质的影响-,血红蛋白对LucicaGA-L的影响是跟LucicaGA同等水平。,血红蛋白的影响,0,20,40,60,80,100,120,0,100,200,300,400,500,600,溶血血红蛋白(mg/dl),影响率(%),-,Lucica-很大改善抗坏血酸的影响。,抗坏血酸的影响,0,20,40,60,80,100,120,0.00,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.12,抗坏血酸(g/dl),影响率(%),-,16,露喜佳GA-L抗凝血剂、解糖阻止剂的影响,研究采血时用的抗凝血剂、解糖阻止剂的影响。所有被研究的采血管标本，都适用LucicaGA-L。,从健康者名采血。表示血清值为100时的相对值。,100,101.3,102.7,100.3,101.1,0,20,40,60,80,100,120,血清,EDTA,柠檬酸,肝素,+EDTA,相对值（）*,17,露喜佳GA-L保存稳定性,本试剂在下保存，12个月内稳定。（表）开封后的试剂，在自动分析仪里（）保存，稳定个月。（表）,表-1试剂冷藏（）的保存稳定性,0,10,20,30,40,50,0,3,6,9,12,15,保存月数,值（）,管理血清L,管理血清H,表-2开封后试剂的保存稳定性（）,18,19,结论确认DCCT研究时使用的样品（存储19-23年）保存稳定性。存储23年的样品可使用于GA测定。ClinicalChemistry57-2286-290(2011),1986-90年时保存标本和2009年保存标本的相关公式没有显示有意截距和斜率。,20,露喜佳GA-L基本性能一览表,项目,功能,露喜佳Lucica-,既成品,测定功能,重复性：同时；,0.630.93,1以内,日间；,0.560.67,2以内,直线性：健康者群,良好,良好,患者群,良好,良好,测定范围（）,.,.,共存物质的影响,胆红素（）,.,.,胆红素（）,.,.0,（干扰检查；）,乳糜（浊度）,抗坏血酸（）,葡萄糖（）,Fructosyl-N-,0.007m,抗凝血剂、解糖阻止剂的影响,采血管,采血管,柠檬酸,添加试验,添加试验,胆素,均无影响,均无影响,21,露喜佳GA-L项目间演算式,对,Lot,倾斜度,截矩,G,/.,3.08,H,/.,2.80,I,/.,2.88,平均,/.,2.92,由该法和法的相关式研究该试剂项目间演算式。得到项目演算式值（）/.浓度/浓度2.9,相関,法,GA,-,L,（,Lot.,）,y=1/1.16x+3.08,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相関,HPL,法,GA,-,L,（,Lot.H,）,y=1/1.13x+2.80,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相関,HPL,法,GA,-,L,（,Lot.,）,y=1/1.14x+2.88,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相关,法,Lucica,GA,-,L,（,Lot.,）,y=1/1.16x+3.08,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,Lucica,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相关,HPL,法,Lucica,GA,-,L,（,Lot.H,）,y=1/1.13x+2.80,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,Lucica,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相关,HPL,法,Lucica,GA,-,L,（,Lot.,）,y=1/1.14x+2.88,=0.999,0,10,20,30,40,0,10,20,30,40,Lucica,GA,-,L,（,GA,）,HPLC,法（）,相关式【/.Lucica-.】项目间演算式值（）/.浓度/浓度.,(n=61),(n=55),(n=55),22,露喜佳GA-L使用时的注意事项,LucicaGA-LGAR-2（酶液）试剂由于交叉污染的原因，对一部分试剂有可能产生影响。希望能通过追加碱洗来避免污染。免疫法测定试剂（药物血中浓度测定用试剂等）以及胆汁酸测定试剂（循环酶法）要得到GA%值必须用以下的项目间演算式：1114如果使用的是有序排列系统，则有必要更改该系统。由于血红蛋白的负面影响，明显的溶血试样应先稀释再测定。关于管理血清，请使用GA管理血清L、H。,23,露喜佳GA-L的开发历史露喜佳GA-L试剂性能介绍露喜佳GA-L试剂的优点,24,25,26,露喜佳GA-L酶的选择,糖化白蛋白用酮胺氧化酶检出方法；过氧化氢基质；糖化氨基酸特征；对糖化蛋白质没有影响。,糖化白蛋白用蛋白酶检出方法；酮胺氧化酶基质；糖化白蛋白特征；对白蛋白以外的蛋白质没有影响。,按以下基准从数千种酶中进行选择。,27,露喜佳GA-L酶的选择,菌体破碎,酶的精制,土壤等,选择酶,培养,28,露喜佳GA-L对以前产品的改进,项目,露喜佳LucicaGA-L,以前产品,）剂型,液状品,冻干品,（可以直接使用）,（需要溶解处理）,）稳定性,个月（开封后）,周（溶解后）,（由于提高稳定性，可用于,（少量标本单位不适用）,标本较少的小规模单位）,）白蛋白试剂,新试剂,试剂,（不受Alb浓度的影响）,（受Alb浓度的影响）,）校准,次/周（点）,次/天（点）,（节约费用、操作简便）,）和HPLC法相关性,优良,可,（不受低标本的影响）,（受低标本的影响）,)输液的影响,有消失系统,无消失系统,（异常高值）,29,糖化氨基酸的消去反应避免特殊输液（糖化氨基酸）的影响,与管理血清添加标准糖化氨基酸，研究糖化氨基酸的影响。Lucica大幅度减少糖化氨基酸的影响。,添加糖化氨基酸的影响,0,200,400,600,800,1000,0.0,5.0,10.0,15.0,20.0,Z糖化赖氨酸添加浓度（M）,GA值(%),LucicaGA-L,LucicaGA,Z糖化赖氨酸,Lucica-,Lucica,(FZL)添加浓度,管理血清,管理血清,（）,值（）,值（）,0.00,15.2,16.6,0.25,15.4,43.6,0.50,15.4,69.9,0.75,15.4,95.3,1.00,15.5,119.0,2.00,15.6,219.5,4.00,15.9,405.1,10.00,16.1,980.5,15.00,16.0,1458.6,20.00,69.7,1845.4,100以内,Z糖化赖氨酸：Fructo-Z-Lysine,专利,30,2.共存物质的影响(糖化氨基酸、葡萄糖),GSP/ALB(BCG)同露喜佳GA-L相比，受糖化氨基酸的影响非常大,不能用于高卡路里氨基酸输液的患者。,（法）,（法）,31,共存物质的影响(脂质),（法）,（法）,GSP/ALB(BCG)同露喜佳GA-L相比，受血清脂質的影响非常大,针对乳糜样本或者脂肪乳剂注射(输液)患者不能反映正确的GA值。,32,共存物质的影响（胆红素）,GSP/ALB(BCG)同露喜佳GA-L相比，受到胆红素F、C的影响非常大。,（法）,（法）,33,共存物质的影响（维生素C）,GSP/ALB(BCG)同露喜佳GA-L相比，受到维生素C(ascorbicacid)的影响非常大。,（法）,34,糖化血清蛋白GSP(果糖胺)与露喜佳GA-L的区别,）血清蛋白中有66%的白蛋白。）GSP是用来测定血清蛋白中糖化物的絶対量的，而GA是用来測定白蛋白的糖化率的。,35,）不受白蛋白以外的蛋白影响。,）不受蛋白质浓度的影响。,露喜佳GA-L的特征,36,）不受白蛋白以外的蛋白影响GA用来测定血清中的白蛋白。GSP是测定血液中的糖化蛋白质。白蛋白以外大量的血清蛋白是免疫球蛋白，GSP可能因为多種原因发生变动。,球蛋白(11%)球蛋白(10%)球蛋白(13%)其它的血清蛋白质,糖化氨基酸、肽,测定结果,酮胺氧化酶,白蛋白特异的蛋白酶,GA的测定原理,37,）不受蛋白质的浓度影响GA的测定值是以白蛋白中的糖化白蛋白含有比率来表示的。而GSP的值是绝对量。蛋白质的浓度因人而异，疾患及治疗也会使之发生变动。而GA不受那些变动的影响。,GA酶法的测定原理,GA测定,ALB测定,用改良BCP法测定白蛋白。,计