GBT 15206-1994 食物中胆固醇的测定方法_第1页
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152061994 中华人民共和国国家标准 食品中胆固醇的测定方法 of in B/T 152061994 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用分光光度计测定各类动物性食品中胆固醇的方法。 本标准适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。 2 原理 当固醇类化合物与酸作用时, 可脱水并发生聚合反应,产生颜色物质。因此可先对食品样品进行提取和皂化,用硫酸铁铵试剂作为显色剂,测定食品中胆固醇的含量。 3 试剂 全部试剂除注明外均匀分析纯,实验用水蒸馏水。 31 石油醚。 32 无水乙醇。 33 浓硫酸。 34 冰乙酸:优级纯。 35 磷酸。 36 胆固醇标准物质。 37 胆固醇标准液。 371 胆固醇标准储备液(1 mg/:精确称取胆固醇 100 于冰乙酸中,并定容至 100 液至少在 2 个月内保持稳定。 372 胆固醇标准常备液(100g/:吸取胆固醇标准储备液 10 冰乙酸定容至 100 液用时临时配制。 38 铁矾显色剂。 381 铁矾储备液:溶解 g 硫酸铁铵 100 酸中,贮于干燥器内,此液在室温中稳定。 382 铁矾显色液:吸取铁矾储备液 10 浓硫酸定容至 100 于干燥器内,以防吸水。 3 9 50%氢氧化钾溶液: 称取 50 g 氢氧化钾, 用蒸馏水溶解, 并稀释至 100 310 5%氯化钠溶液:称取 5 g 氯化钠,用蒸馏水溶解,并稀释至 100 311 钢瓶氮气:纯度 4 仪器和设备 41 实验室常用设备。 42 721 型分光光度计。 43 电热恒温水浴。 44 电动振荡器。 45 具玻塞试管:体积 10 5 5 操作步骤 51 胆固醇标准线 中华人民共和国卫生部 19940810 批准 199 40810 实施 中华人民共和国卫生部 152061994 吸取胆固醇标准常备液 .0 别置于 10 管内,在各管内加入冰乙酸使总体积皆达 4 沿管壁加入 2 矾显色液,混匀,在 1590 ,在 560 575 长下比色。以胆固醇标准浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标做标准曲线。 52 样品测定 521 食品脂肪的提取与测定 根据食品种类分别用索氏脂肪 提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。并计算出每 100 g 食品中的脂肪含量。 522 食品胆固醇的测定 将提取的油脂 34 滴(约含胆固醇 300500g),置于 25 管内,准确记录其重量。加入 4 水乙醇,0.5 氧化钾溶液,在 65恒温水浴中皂化 1 h。皂化时每隔 203 0 摇一次使皂化完全。皂化完毕,取出试管,冷却。加入 3 化钠溶液,10 油醚,盖紧玻塞,在电动振荡器上振摇 2 置分层(一般约需 1 h 以上)。 取上层石油醚液 2 于 10 玻塞试管内,在 65水浴中用氮气吹干,加入 4 乙酸,2 矾显色液, 混匀,放置 15 在 560575 得吸光度,在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。 6 结果计算 1000111=式中:X样品中胆固醇含量,00 g; m测得的吸光度值在胆固醇标准线上显示的胆固醇含量,g; V石油醚总体积,取出的石油醚体积,称取食品油脂样品量,g; c食品样品油脂含量,g/100 g; 1/1000折算成每 100 g 食品中胆固醇毫克数。 7 平均允许误差 同一实验室同时或连续两次测定结果之差不得超过平均值的 10%。 8 标准曲线 0 100 150 2009940810 批准 199 40810 实施 152061994 测定时间 胆固醇,g 1985 1990 1991 50 00 50 00 :表中每个值均为三个测定值的平均值。 附加说明: 本标准由卫生部卫生监督司提出。 本标准由中国预防医学院营养与食品卫生研究所负责起草。 本标准主要起草人王春

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