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编号:编号:2010014081470120100140814701 LiaoningLiaoning MedicalMedical UniversityUniversity 论文题目:益生菌剂对肉用仔鸡营养免 疫促进作用 本科生毕业论文本科生毕业论文 学 院: 畜牧兽医学院 专 业: 动物医学 年 级: 2010 姓 名: 王凯 指导教师: 王术德 讲师 辽宁医学院教务处制辽宁医学院教务处制 0 0 厚德修身 精术济世 20112011 年年 1212 月月 目 录 中文摘要. 英文摘要. 1 前言.1 1.1 研究背景.1 1.2 益生菌的概念.1 1.3 益生菌的研究现状.2 1.4 研究的目的与意义.2 2 材料与方法.4 2.1 试验动物及分组.4 2.2 益生菌.4 2.3 日粮配方及营养水平.4 2.4 试验设计.4 2.5 试验时间与地点.4 2.6 饲养管理.4 2.7 主要测试指标与测试方法.4 2.8 数据处理.4 3 结果与分析.6 3.1 益生菌对生长猪生长性能及腹泻率的影响.6 3.2 益生菌对生长猪日粮养分消化率的影响.6 3.3 常见病发病情况.6 3.4 猪舍有害气体监测.6 4 讨论.6 4.1 益生菌对生长猪生长性能的影响.6 4.2 益生菌对生长猪日粮养分消化率的影响.6 4.3 益生菌对猪舍有害气体的影响.7 5 结论.7 参考文献.8 致 谢.9 益生菌对猪生产性能的影响 摘 要 本试验研究微生态制剂对肉仔鸡的作用效果,从而为微生态制剂的开发利用提供依据。 选取 1 日龄健康 AA 肉仔鸡 240 只,随机分成 3 组,即对照组、试验 1 组(添加 04的 微生态制剂)和试验 2 组(添加 02的微生态制剂),研究微生态制剂对肉仔鸡生产性能 和免疫功能的影响。结果表明饮水中添加微生态制剂能显著提高肉鸡的平均体重、免疫 器官指数和新城疫的抗体效价,降低料肉比、肠道发病率和死亡率。说明该微生态制剂 能显著影响肉仔鸡的生产性能和免疫功能。 关键词:益生菌;鸡;养分消化率;增重 Probiotics on production performance of pigs Abstract China is one of the worlds largest meat producer and cattle-raising country, however, the export of meat and production of only 0.91.2 of the total. Meat products in which the drug residue and contamination of pathogenic microorganisms that hinders the export of livestock and poultry products are two main issues. Anti-infective research and application of probiotics combined on the one hand a partial substitute for antibiotics in the reduction of drug residues. In the other hand, it can effectively control the infection of pathogenic microorganisms on poultry, improve the survival rate of young animals, reduce the incidence of diarrhea and colitis. The best ideal probiotic strains from the same kinds of animal gut. This study is based on this theoretical basis, to selected 42 of about 20kg of pigs then randomly divided into two groups of three to repeat, each repeat 7. Control group was fed basal diet, test group were fed the diet added 0.1% probiotics, a trial period of 30 days. Experimental results show that compared with the control group, the pigs which in experimental group the average daily feed intake and average daily gain an increasing trend, the average feed conversion reduced the rate of decrease diarrhea. In improving nutrient digestibility in growing pigs, antibiotics ande probiotics have the same effect. Key words: probiotic;pig;nutrient digestibility;gain 1 前 言 1.1 研究背景 我国是世界上较大的肉类生产国和家畜养殖大国之一,但肉类出口仅与生产总量的 0.91.2,其中肉类产品的药物残留和病原微生物的污染是制约畜禽产品出口的两大 主要问题。抗感染复合微生态制剂的研究与应用一方面可部分替代抗生素减少药物残留; 另一方面可有效控制病原微生物对畜禽的感染,提高幼龄动物的成活率,减少腹泻和肠 炎的发生。 抗生素作为饲料添加剂在畜牧业中的应用主要是起预防、治疗动物疾病及促进动物 生长的作用。但近年来研究发现,抗生素在抑制和杀灭病原菌的同时也抑制和杀灭了有 益菌群,破坏了肠道微生态的平衡,长期使用容易造成动物和人体产生抗药性或突变菌 株,使得动物免疫水平低下,对病原菌的抵抗力降低,而且造成抗生素在畜禽产品中残 留,危害到消费者的健康,降低畜禽产品在国际市场上的竞争力。因此,有关抗生素替 代品的研究与开发成为热点问题。 活菌制剂是由活体微生物制成的产品,它无毒、无副作用、无污染、不产生抗药性, 具有抗生素所无法比拟的许多优点,有望成为抗生素的替代品。国内外大量研究表明, 活菌制剂能有效调节鸡胃肠菌群平衡,改善胃肠的微生态环境,使鸡始终保持健康的体 质,提高成活率;对猪消化道疾病,如由梭菌、大肠杆菌等引起的细菌性疾病,均有十 分显著的防治作用;生长全期使用,可减少或替代抗生素的使用,提高猪饲料转化效率, 促进猪的生长生长;提高猪群体免疫力,有利于疫病的预防与控制;能明显降低鸡舍内 氨气等污染气体浓度,减少或消除粪便臭味,改善饲养环境,减少环境污染,有效预防 呼吸系统疾病。 1.2 益生菌的概念 “probiotics”又称为益生素、益生菌、活菌剂、生菌剂或促生素。早在 1907 年, Metchnikoff 就认为保加利亚农民长寿与他们经常服用大量微生物有关,并称该菌为“保加 利亚杆菌”,由此便引出了“有益菌”的概念。“probiotics”一词首先被 Lilley 和 Stillwell(1965)使用,含义为“由一种微生物分泌刺激另一种微生物生长的物质”,与以后的 含义有较大区别。20 世纪五、六十年代,由于抗生素使用中出现的药残、过敏及抗药性 等问题越来越受到重视,科学家们开始努力寻求其替代品,而益生菌就是其中的研究热 点之一。Fuller(1989)认为“probiotics”是一种可通过改变肠道菌群而对动物施加有利影响的 活的微生物饲料添加剂”,之后 Fuller(1991)对定义进行了补充:它是含生理活性菌,能通 过胃肠或定植在结肠或在肠道中增殖,调整肠道菌群从而提高机体免疫力的活的微生物。 现在,尽管对“probiotics”的概念进行了修订,但学者们对“probiotics”的认识仍然不一。 1996 年 Arameo 对益生菌剂的定义不再强调活菌,他说:“益生菌剂是含生理活性菌或死 细胞(包含代谢产物与细胞组成),摄取后可改善粘膜表面菌群或酶的平衡,或刺激机体的 特异性或非特异性免疫力的微生物制剂”。目前,虽然为活菌发酵物有一定是生理活性, 但基于其主要由活菌产生,故多数学者将重心仍然放了在活菌上,似乎将“probiotics”称 “益生菌”更为合理。经过数十年的发展,益生菌的含义日益完善,益生菌数量及其保健功 效方面也都得到进一步丰实(杨续金等,2005)。 1.3 益生菌的研究现状 1.3.1 微生态学概况 动物微生态学是研究有益微生物群之间,有益微生物与动物体内环境之间,动物体 与外界环境之间三者相互关系的多学科的相互交叉的一门新型学科。 1.3.2 微生态制剂的种类 根据有关资料的报道,目前在我国将微生态制剂分成三大类: (1)益生菌剂(Probiotics)是在动物微生态理论指导下,采用已知有益的微生物,经培养、 发酵、干燥等特殊工艺制成的用于动物的生物活菌制剂称为益生菌剂也称:微生态调控 剂、饲用微生物添加剂、益生菌剂、生物兽药、微生态制剂。 (2)益生元(Prebiotics),也称益生协同剂,是指对体内自身的益生菌和从体外分离进入 体内的益生菌等具有协同作用的有生命和无生命的物质。 (3)合生元(synbiotics),指益生菌和益生元按一定比例联合并用的制剂。 1.3.3 益生菌的含义 随着研究的深入,益生菌的定义也在完善和合理的修订,通俗讲:是一类对人或动 物有益的细菌。 对益生菌的定义曾经有不同的解释;如 1989 年 Fuller 认为是能够促进肠道菌群生 态平衡,起着有益作用的活的微生物制剂可以称益生菌。后来于 1994 年在德国召开的会 议上对益生菌的定义作了修改,认为益生菌是含活菌或死菌及其组成和产物的细菌制品, 经口或其它粘膜投入,目的是改善粘膜表面微生物或酶的平衡,或者刺激特异性或非特 异性免疫机制的。 1.4 研究的目的和意义 活菌制剂在国内外已被广泛应用,它在饲料上应用,主要作用是促进营养物质的消 化吸收,促进动物增重,生长发育,防治仔猪腹泻,提高饲料转化率和饲料报酬,提高 动物机体的免疫力和防病的能力,这是一些药物添加剂所无法替代的。 近二十年对活菌制剂的研究有了很大的发展。但由于活菌制剂在加工、使用、保存、 运输过程中容易失活,从而使生物活性降低,而且有些菌株在通过胃内低 pH 环境时,不 能有效地抵抗盐酸、胆盐等作用,不能到达肠道而发挥作用,所以开发一.些能够耐高温、 低 pH、胆酸盐,具有较好黏附性能的菌株成为当务之急。 随着肠道微生物的深入研究,在此理论下指导研制生产的活菌制剂将更具有针对性, 有更高的活性和安全性,从而为人类提供更好的菌株用于生产,提高畜禽的生产性能和 畜产品的质量。 抗生素在人畜保健、疾病防治、促进人类社会进步和发展诸方面发挥了极其重要的作 用。但随着抗生素最为饲料添加剂、兽药在畜牧生产和兽医临床上的广泛应用和滥用之 后,抗生素可能导致的耐药性及药物残留问题越来越引起人类的关注。益生菌无毒副作 用、无耐药性、无残留,对猪的生产性能有积极地影响。 目前关于益生菌在断奶仔猪生产中应用的报道较多,而在生长猪应用的报道很少,本 试验拟探讨益生菌对生长猪生产性能的影响,以便为益生菌在生长猪生产中的应用提供 科学依据 2 材料与方法 2.1 试验动物及分组:将 240 羽 1 日龄商品代 AA 肉鸡随机分成 3 组,每组 80 只,分 8 个重复,每个重复 10 只鸡。 其中 1,2 组为试验组,1 组在饮水中添加 04的 微生态制剂;2 组在饮水中添加 02的微生态制剂,按照全天饮水量计算加到饮水中, 每天 1 次, 使之尽量在 23 h 内饮完,使用前将制剂摇匀;3 组为空白对照组。网上 平养,干颗粒料饲喂,自由采食与饮水,每周称取鸡的体重和饲料余量,并观察记录每 日温度、湿度,试鸡的食欲、发病和死亡情况。发病鸡以观察到肛门周围被粪便污染, 精神 不佳为准,健康鸡采食、精神、排粪正常。试验结 束后,计算平均体重、耗料量、料肉 比以及发病率 12 将 ND 弱毒苗按 1 倍量接种肉用仔鸡,8 日龄首免,接种方式为点眼、滴鼻;21 日龄二免,接种方式为饮水。 2.2 益生菌:益生菌由大连翔大科技股份有限公司提供。益生菌主要成分为腊样芽孢杆 菌,为一种新型高效直接饲喂微生物,每克中含 109个有益活菌数,呈白色小颗粒状。 2.3 日粮配方及营养水平:基础日粮配方按 NRC 生长育肥猪(20-50kg)营养需要标准 (1998)结合猪场实际情况配置。基础日粮为不含抗生素的全价日粮,基础日粮组成及 营养水平见表 1. 2.4 试验设计:试验分两组,对照组使用基础日粮,试验组在基础日粮中添加益生菌 1000mg/kg 2.5 试验时间与地点: 试验时间:2009 年 10 月 19 日-2009 年 11 月 22 日 试验地点:辽宁省丹东市东港前阳镇某农户猪场 2.6 饲养管理:饲养管理及免疫程序同大规模养殖场。试验前所有试验猪只进行体内外 驱虫,注射防疫疫苗,预饲期 5 天,试验期 30 天;在此期间观察猪采食量。正试期试验 猪只自由采食、饮水,饲料每天称量记录数量。细心观察猪的采食、粪便和精神状况。 专人负责饲喂和栏舍卫生打扫及消毒,保证栏舍清洁干燥。 2.7 主要测试指标与测试方法:分别于试验开始和结束时称试验猪的个体体重及耗料量, 并分别记录,计算个体平均日增重、日采食量及耗料增重比 2.7.1 采食量:准确记录每栏试验猪耗料,计算采食量。 2.7.2 日增重:实验开始及结束前对试验猪进行空腹称重,计算每组全期平均日增重 2.7.3 料肉比:根据采食量和增重,计算料肉比。 2.7.4 腹泻率:每天记录猪只健康情况,腹泻率由公式计算得出。 2.7.5 养分消化率的测定:计算生长猪日粮中各养分的表观消化率,公式如下 日粮中某成分表观消化率 2.8 数据处理:饲养试验结果参照生物统计试验设计,运用 SAS 8.1 进行统计分析。 表 2 益生菌对生长猪生长性能的影响 Table 2 Effect of probiotics on performance and diarrhea ratio for growing pigs kg , % 指标 Items对照组 Control group试验组 Experiment group 初始重 Initial body weight 末重 End body weight 平均日采食量 ADF 平均日增重量 ADG 料肉比 FCR 腹泻率 Diarrhea Rate 24.42 1.72 39.81 3.88 1.39 0.04 0.52 0.08 2.71 0.45A 11.31 %0.66 % 25.18 2.55 40.98 3.68 1.40 0.07 0.59 0.07 2.37 0.17B 6.37 %1.13 % 注:同行数据肩注不同小写字母表示差异显著( P 0.05 ) ;不同大写字母表示差异极显著( P 0.05 ) 。下表同。 Note: Values with different superscript lowercases in the same row show significant difference( P 0.05),平均料肉比降 低了 0.34,但差异不显著(P0.05);腹泻率降低了 4.94%,差异极显著(P 0.05),脂肪以及粗纤维的消化率有提高的趋势(P0.05)。因此 ,在生长猪日粮中的干 物质、粗蛋白、脂肪、粗灰分、粗纤维、钙、磷的表观消化率方面,益生菌与抗生素组 具有同等作用。 3.3 常见病发病情况 试验组有 2 头猪患感冒,主要症状是咳嗽,4 天后停止咳嗽,病愈;而对照组有 4 头 猪发病,隔离后常规处理,6 天后病愈。由此可见,益生菌能减少感冒和胃肠炎的发生, 特别是对胃肠炎有很好的预防作用。 3.4 猪舍有害气体监测 试验组猪舍中 NH3、H2S 浓度比对照组的低,圈舍内臭味明显降低,有一种淡淡发酵 的乳酸味。 4 讨论 4.1 益生菌对生长猪生长性能的影响 本试验结果表明,在育肥猪饲料中添加益生菌,可提高肥猪日增重,提高饲料转化 率。原因是大量的微生物在猪消化道内和饲料中繁殖时生成了大量的生物活性物质,特 别是维生素和霉的大量产生,对消化系统有增强营养和消化的作用。其中的光合细菌能 利用体温进行糖和淀粉的合成,乳酸菌等微生物能将糖和淀粉生成有机酸并能分解粗纤 维,这样就提高了饲料的消化吸收利用率,促进了猪的生长。 干物质 Dry Matter 能量 Energy 粗蛋白 Crude Protein 粗脂肪 Crude Ether Extract 粗灰分 Crude Ash 粗纤维 Crude Fiber 钙 Ca 磷 P 无氮浸出物 Nitrogen Free Extract 83.69 1.86 83.47 1.97 79.07 3.19 66.50 3.51 65.07 2.33 31.40 13.09 72.36 2.61 69.77 4.58 94.49 0.35 82.75 1.26 82.90 0.94 75.82 3.02 70.04 3.23 63.38 3.63 36.73 1.73 68.17 4.19 64.49 10.26 93.68 0.56 4.2 益生菌对生长猪日粮养分消化率的影响 本试验中,相对于对照组,试验组对日粮中粗纤维、粗脂肪的表观消化率有提高趋 势,差异不显著(P0.05);其原因可能是益生菌中有益菌株产生的脂肪酶和纤维素酶降 低了动物体内其他内源酶活性或抑制了其他内源酶的分泌。益生菌作用效果受动物种类、 动物年龄、动物所处环境等一系列因素的影响,不同种类的益生菌对各种动物的作用效 果不同。在正常情况下,动物肠道微生物种群及其数量处于一个动态的微生态平衡,益 生菌添加过少或者过多都会使这种平衡被破坏,导致体内菌群比例失调,生产性能下降, 另外,益生菌中的有益菌在肠道产生过量的酶极有可能影响机体内源酶活性或者抑制内 源酶的分泌,整体上降低内源酶对营养物质的分解作用。 4.3 益生菌对鸡舍有害气体的影响 益生菌中的微生物能对肠道中的不良代谢产物起到转化和消除作用,特别是减轻了粪 尿臭味。试验证实添加益生菌能有效减少 NH3、H2S 气体的排放,降低污染,改善环境, 在实际生产中推广有着良好的经济效益和社会效益,是绿色养猪业发展的方向。 5 结论 与对照组相比较在生长猪日粮中添加 0.1%的益生菌具有改善生长猪生产性能的趋势; 添加 0.1%的益生菌能改善生长猪肠道微生态环境,使乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌增殖, 同时对大肠杆菌等有害菌的生长具有明显的抑制作用,并能显著降低生长猪的腹泻率。 应用益生菌饲喂生长猪,成本低廉、经济效益显著提高,能够大大改善猪肉品质。 由于不用抗生素,生产的产品是无公害产品,饲养环境得到显著改善,不生蛆、无苍蝇。 益生菌在猪的肠道中净化了有毒物质,粪便无臭味,推广这一技术可有效地解决城乡畜 禽养殖环境净化问题。 当今人们对畜禽产品的质量安全意识逐步提高,益生菌是替代抗生素和消毒剂等化 学药品的环保产品。随着抗生素时代的结束,研究推广应用益生菌技术将是畜禽饲养方 式的变革。作为一种新兴的添加剂,益生菌在生产实践中也存在着一些问题,如产品质 量不稳定、菌种单一、效果慢、受环境条件影响大等问题。这要求今后菌种的制作和选 育有待进一步改进,使益生菌能更好的为畜牧业生产服务。 参考文献 陈惠,朱继喜,吕道俊1994芽孢杆菌对生长育肥猪肠道菌群及酶活性的影响J四川农业大 学学报,S1:550553 阁敏1999微生态平衡的临床意义J华西医学,14(4):419 顾方鸿2003浅议动物体的微生态系统J浙江畜牧兽医,1:910 郭贵海,王崇文2002肠道菌群调节剂的研究进展J临床内科杂志,19(2):8890 郭兴华,杨洁彬主编2002益生菌基础与应用M北京:北京科学技术出版社,30 安永义活菌添加剂对肉仔鸡粪臭和肉仔鸡生产性能影响的研究J饲料研究,1996(12): 2-4 2002微生态态学原理(第二版)M大连:大连出版社,125126 罗克1999动物微生态学J福建畜牧兽医,21(3):4651 刘一尘,李德中,张谦2003益生菌剂与益生协同剂协同作用的研究及应用现状J河南畜牧 兽医,24(2):910 施晨璐,刘艳琴2001如何维持动物胃肠道微生态平衡J河北畜牧兽医,17(2):29 王佳丽,丁鉴锋2002微生态制剂在畜禽饲料中的应用及相关作用机制J饲料广角, 16:2223 王金全,蔡辉益2002动物营养微生态饲料添加剂的研究与应用进展J饲料广 角21:1116 苑建军,李金宝2002微生态制剂在畜牧主产内的应用和展望J四川畜牧兽医,37(29): 8385 Alander M., Satokari R., Korpela R., Saxelin M., Vilpponen-Salmela T., Mattila-Sandholm, T., Von Wright, A. 1999. 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