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文档简介
1090一2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程of 1090 准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分:标准编写的基本规定和物疾病诊断方法和疫苗使用标准手册而制定的。本标准参考了原中华人民共和国动植物检疫局编写的中华人民共和国进出境动物检疫规程手册,并结合了起草单位多年的检验检疫经验。本标准的附录标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人:王玉玲、朱世强。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 1090of 标准适用于羊种、牛种和猪种布氏杆菌感染家畜的检疫。2引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 试验用蒸馏水为 6682中的三级水。炭酸生理盐水(含。炭酸,化钠溶液)。检验羊血清时用含。炭酸的10%盐溶液(含0. 5%石炭酸,10%氯化钠溶液)。照说明书使用。使用时充分摇匀,用稀释液作1,20(工作浓度)稀释。用前用蒸馏水溶解至规定容积。干品,使用前用蒸馏水溶解至规定容积。玻璃试管:规格为13 底,洁净。清必须新鲜,无明显蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。免影响凝集价。若3用冷藏方法运送血清。操作方法4.,确定被检血清的稀释度牛、马、骆驼稀释用1:50,1,100,1,200,1,400(4个稀释度);猪、山羊、绵羊和狗用1;25,1:50,1:100,1:200(4个稀释度)。_ 1090牛、马、骆驼用1,50,1,100,猪、山羊、绵羊和狗用1,25,1:50,为测定强阳性血清效价,稀释度可以增加。羊、25 取被检血清。1 人第1管, 5 合均匀后,再从第2管吸取。. 5 此倍比稀释至第4管,从第4管弃去。.5 释完毕。,25,1,50,1,100,和骆驼血清的稀释牛、异是第1管加1. 2 5 1:20)加入已稀释好的各血清管中,并振摇均匀,猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1 : 25,1 : 50,1 : 100,1,200,牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1,50,1,100,1 200,1:400。各反应管反应总量为1 阴性血清对照阴性血清的稀释和加抗原的方法与被检血清同。抗原的方法与被检血清同。3抗原对照在0. 5 0. 5 ,20,为判定凝集反应程度的依据,先将抗原(1 : 20)用等量稀释液作一倍稀释,然后按表1配制比浊管。表1比浊管的配制试管号12345抗原稀释液1,40。炭酸生理盐水清亮度/%050+;+注:+十完全凝集,菌体100%下沉,上层液体100%清亮;+十几乎完全凝集,上层液体75清亮;+凝集很显著,液体50环清亮;+有沉淀,掖体25 %清亮一无沉淀液体不清亮感作所有试验管充分震荡后,置37现+以上凝集现象的最高血清稀释度为血清凝集价。 ),阳性血清的凝集价达到其标准效价士1个滴度,则证明试验成立,可以判定。否则,试验应重做。和骆驼于1:10。血清稀释度,猪、山羊、绵羊和狗于1:50血清稀释度出现“+”以上的凝集现象时,被检血清判定为阳性反应。按照附录N/T 1090准的附录)国际凝集单位国际凝集单位与血清效价的换算见式( 000二”二二(中:Y国际凝集单位,X被检血清效价(凝集价),际标准血清的效价。注:国际标准血清是由规定国际标准血清每安瓶含有1 000个所使用方法测定国际标准血清的最终效价为1/800(5000凝集),而某一被检血清的最终凝集效价为1/400(50写凝集),代人式(。1 000义400800=500(IU/该被检血清的效价用国际凝集单位表示为500IU/本标准方法和指定单位生产的布氏杆菌凝集抗原测定国际标准血清时,
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