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,形成单链DNA,新的DNA分子,形成重组DNA分子,黏性末端或平末端,形成产物,碱基对间的氢键,磷酸二酯键,磷酸二酯键,磷酸二酯键,作用部位,DNA分子,脱氧核苷酸,DNA分子片段,DNA分子,作用底物,解旋酶,DNA聚合酶,DNA连接酶,限制酶,比较项目,为使目的基因与载体形成的相同DNA片段末端能够连接，通常使用同一种限制酶将二者切割，但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时，则两末端也可连接,对象要求,选择限制酶切割目的基因时，被选择的限制酶在目的基因的两侧都要有识别序列，这样才能切割出完整的目的基因,数量要求,限制酶切割位点所处的位置必须在标记基因外，只有这样才能保证标记基因的完整性,位置要求,过程,逆转录法,化学合成法,从部分基因文库，如cDNA文库中获取,从基因组文库中获取,人工合成,从基因文库中获取,方法,当温度上升到90 以上时，双链DNA解聚为单链,变性,图解,说明,过程,72 左右时，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新链由5端向3端延伸,延伸,温度下降到50 左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,复性,图解,说明,过程,
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