骨髓细胞学检查PPT参考课件.ppt

骨髓检查,BoneMarrowExamination,1,Where?,2,血常规检查：RBC1.81012/L；WBC2.1109/L；PLT45109/L,How?,3,Why?,4,骨髓检查将带给你答案！,5,骨髓检查,细胞形态学检查造血干细胞培养骨髓细胞学检查细胞抗原检查遗传学分析等骨髓检查骨髓活检,形态学检查,细胞化学染色,6,概述（Introduction）骨髓:人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内,是红细胞，粒细胞和血小板生成的唯一场所，同时也产生淋巴细胞和单核细胞。,7,血细胞生成与发育,8,血细胞的分化、发育、成熟具有一定的规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面：胞体胞质量、颜色、内含物胞核大小、形状、结构、颜色、核膜、核仁核质比,9,胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小（除外巨核细胞系；早幼粒大于原粒）,10,胞质(浆):血细胞随着分化发育其胞质量由少到多（淋巴除外）色由深蓝到浅蓝或灰（红）颗粒由无到有（除外红细胞系,浆细胞一般无颗粒，小淋巴细胞可没有颗粒。）,11,胞核:血细胞随着分化发育其胞核体积由大到小（巨核胞核由小到大）形态由圆到不规则（红系核型规则而最终消失；淋巴细胞的核型改变不明显）染色质由疏松细致到紧密粗糙颜色由染淡紫色到深紫色,12,核仁:血细胞随着分化发育其胞核内的核仁从有到无。（除外淋巴系、单核系，一直有）,13,核质比：由大到小，即核大质少到核小质多（除外巨核系）,14,一、骨髓细胞形态学检查临床应用1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察如：白血病、再障、巨幼细胞贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿。,15,三、适应症、禁忌症，标本采集及送检（一）适应征：原因不明的发热、骨痛、恶病质；原因不明的肝、脾、淋巴结肿大；原因不明的外周血细胞数量、形态异常禁忌征：血友病患者、妊娠中晚期患者,16,（二）标本采集部位及方法：骨髓穿刺术常用取材部位：成人：髂前、后上棘（较易掌握分寸）；胸骨（阳性率高，有一定危险性）体位：胸骨及髂前上棘穿刺时取仰卧位；髂后上棘穿刺时取侧卧位。采集标本量:0.2ml以下,如需同时作细菌培养等其它检查，应先抽骨髓液涂片。,17,三、骨髓检查申请单的填写（详细）,各医院都有其自己设计印刷的骨髓检查申请单，格式大同小异，基本包括以下内容：1.病人基本情况姓名、性别、年龄、职业、门诊号、住院号、通讯地址或工作单位、就诊或住院的科室、病室。,18,2.标本采集情况（1）骨髓来源：注明髂前（左、右）、髂后（左、右）、胸骨、脊突；（2）取材是否顺利；（3）其它取材部位，第几次送检，上次标本编号等。3.临床诊断及送检目的。,19,4.主要症状及病史；主要体征：包括皮肤、淋巴结、肝、脾，其它。5.主要实验室检查记录，包括血液学方面及其他与疾病有关的各类检查结果的详细数据。6.取材时间、送检时间、送检医师签名。,20,四、骨髓细胞形态学检查程序,染色；低倍镜检查；油镜检查；（细胞化学染色）；计算、结合临床资料总结分析得出诊断意见及建议。,21,低倍镜检查,1.观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞2.判断骨髓增生程度共分五级；按照有核细胞与成熟红细胞的比,22,骨髓增生程度分级及临床意义,23,骨髓增生程度分级(高倍镜）,极度减低15/HP,增生减低520/HP,增生活跃2050/HP,明显活跃50100/HP,极度活跃100/HP,24,重要概念：,粒红比值：粒细胞的百分率总和与有核红细胞百分率总和之比。（M:E或G:E）正常值：2-4:1,油镜检查：1、有核细胞分类计数并观察有无形态异常2、粒/红比值计算,25,正常骨髓象,0.取材满意、骨髓小粒丰富，图片及染色良好。增生活跃1.粒系增生活跃，占有核细胞的4060，各阶段细胞比例适当，其中原始粒细胞2%，早幼粒细胞5%，中、晚幼粒细胞约15%，杆状核粒细胞多于分叶核粒细胞。嗜酸性粒细胞5%，嗜碱性粒细胞1%。各阶段细胞形态无明显异常。,26,骨髓取材满意的指标*1.抽吸骨髓时病人有特殊的酸痛感。图2.骨髓液可见骨髓小粒和脂肪滴。图3.镜下可见骨髓特有细胞如:巨核细胞、浆细胞、成骨细胞等。4.中性杆状核/分叶核高于外周血中此比值。,（二）骨髓穿刺方法,27,28,29,干抽(drytap)*指非技术原因，多部位、多次均抽不出骨髓液而言。常见于：骨髓纤维化；骨髓异常增生致骨髓填塞的白血病、真红等。,30,2.红系增生活跃，占有核细胞的20左右，各阶段细胞比例适当，其中原红胞：2%，早幼红细胞5，中、晚幼红细胞各约为10，细胞形态无明异常。成熟红细胸大小、形态及染色大致正常。粒/红约2-4:1。3.淋巴细胞占有核细胞20(小儿可达40)，单核细胞及浆细胞各4，大多为成熟阶段细胞，且细胞形态无异常。,31,正常骨髓象（低倍镜）,32,常用的化学染色,33,概念,细胞化学染色是以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质（糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。,34,铁染色,细胞外铁：骨髓小粒中贮存在单核吞噬细胞系统内的铁（幼稚红细胞之外的铁）细胞内铁:幼稚红细胞以内的铁，细胞核周围正常值：细胞外铁：1+-2+铁粒幼红细胞：12%-44%,35,铁染色（ironstaining）,36,用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断缺铁性贫血：内、外铁均减少铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多MA、HA、AA：正常或轻度增多,用途：鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病结果：粒系(+)；单核系()；淋巴系(),过氧化物酶染色(peroxidase，POX),37,中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP),鉴别：慢粒NAP，类白血病反应NAP化脓感染NAP，病毒感染NAP,38,CML,类白,39,非特异酯酶染色(-NAE)：,用途：鉴别急粒与急单结果：粒系（-）或弱（+）不被NaF抑制单核、巨噬(+)，可被NaF抑制,40,糖原染色（过碘酸雪夫反应，PAS)：,粒系中原粒