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文档简介

.实验4红细胞渗透脆性测定,【实验目的】,1,本实验研究红细胞渗透脆性的测定方法。2、加深对细胞外液体渗透张力的理解,保持红细胞正常形态和功能的重要性。【实验原理】,在临床或生理实验中使用的各种溶液中,与血浆渗透压相同的等渗压溶液(如0.85%NaCI溶液)高于或低于血浆渗透压,相应地称为高渗压或低渗压溶液。将正常红细胞悬浮在不同浓度的NaCI溶液中就能看到。等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹型圆盘;在渗透压减少的一系列溶液中,红细胞逐渐膨胀,两边突出,体积增加30%时变成球形。体积增加45% 60%,细胞膜损伤导致溶血,这时血红蛋白从细胞外流失,称为溶血。实验原理,将红细胞悬浮在等渗NaCl液中,其形态不变。放在低渗透NaCl溶液中会发生膨胀和破裂,称为红细胞渗透脆性。但是红细胞对低盐溶液有一定的抵抗力,其大小可以用NaCl溶液浓度的高低来表示。不同浓度的低渗透NaCl溶液注入血液,开始出现溶血现象,NaCl溶液的浓度是该血液对红细胞的最低阻力。完全溶血现象出现时的NaCl溶液浓度是这个红细胞的最大阻力。前者表示红细胞的最大脆性(最小阻力),后者表示红细胞的最小脆性(最大阻力)。不同物质的等渗性溶液不一定保持红细胞的体积和形状正常,在那里悬挂的红细胞保持正常体积和形状的盐溶液称为登场溶液。所谓“张力”,实际上是指在溶液中不能通过细胞膜的粒子引起的渗透压力。例如,NaCI不能自由通过细胞膜,因此NaCI的0.85%是等渗溶液,也是背部溶液。但是尿素之类的东西是因为它可以自由通过细胞膜,将细胞外的部分变成低渗透溶液,从而产生溶血。1.9%尿素溶液渗透到血浆等,但红细胞放置在其中后立即溶血,因此不是登场溶液。实验材料,实验动物:动物种类不限。实验设备:试管架、小试管、滴管、吸管。药品和试剂:1%NaCl溶液,0.85%氯化钠溶液,蒸馏水,1.9%尿素溶液,1%肝素。实验方法,1 .低渗透NaCl溶液浓度不同的制造:10种不同的NaCl低渗透溶液(0.25%,0.3%,0.35%,0.4%,0.45%,0.5%,0.55%,0.6%)每个试管的总量为2.5ml或4ml,具体取决于试管的大小。取另外3个小试管,在3个试管中各编号11-13次,分别加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素、蒸发水2.5毫升或4毫升,与前面10个试管水量相匹配。2 .抗凝剂的制备:不同动物的采血方法不同,但使用了很多外周血。将血液放入含有肝素的烧杯中,搅拌均匀。1%肝素1ml抗10ml血。3.添加抗凝剂:用滴管吸收抗凝,然后在13个管内各放一滴,轻轻翻转,不要用力振动。一旦观察到11,12,13管的变化,其他10个试管在室温下放置1个小时。4 .观察结果以血液溶血为例,其现象可分为:(1)试管内的液体变成完全透明的红色,说明红细胞完全破裂,完全溶血。(。(2)试管内的液体下层是浑浊的红色,上层是无色的,意思是有些红细胞没有被破坏,被称为不完美的深层血液。(。(3)试管内的液体下层呈浑浊的红色,上层无色透明,显示红细胞完全没有受损。(。4 .观察项目(1)观察不同浓度低渗透NaCl混合物的颜色和透明度。(2)比较第11,12,13管溶血情况,分析其原因。实验结果,注意事项,1。每个试管内的血滴都要准确(只加一滴)。验证试管NaCl溶

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