实验3-细菌的简单染色和革兰氏染色

，细胞的结构，一般结构：一般细菌的结构，特殊结构：一些细菌拥有的或一般细菌在特殊环境下拥有的，革兰染色，识别C.Gram(革兰)在1884年发明的各种细菌的染色方法。用碱性染料结晶紫进行细菌涂层早期染色，用碘溶液媒染，提高染料和细胞之间的相互作用。通过乙醇或丙酮清洗脱色。经过脱色后，结晶紫是细胞内残留的革兰阳性细菌，革兰阴性细菌的结晶紫被洗掉，细胞无色。用结晶紫和其他颜色的碱性染料涂上涂层。沙黄原是无色的革兰阴性杆菌用红色表示，革兰阳性菌继续保持深紫色，实验三种细菌的简单染色和革兰染色。测试细菌的简单染色和革兰染色，一个目的是报告两个基本原理3实验材料4无菌工作过程5个步骤6个步骤中的7个测试问题，一个目的是学习1种染色膜技术，学习简单染色，学习革兰染色原理，了解配色机制。学习和掌握无菌手术技术。3熟悉简单的染色革兰染色法，正确地染色4，巩固显微镜油镜的使用。(a)细菌的简单染色原理，(b)革兰染色的基本原理，第二基本原理，细菌细胞体积小，水分含量高，在普通光显微镜下呈无色透明，不易观察，必须染色处理，给细胞上色，便于观察。简单染色可用单个染料染色，观察细菌的形态、大小和排列。染色前一般需要固定细胞，其目的是杀死细菌并将其粘在幻灯片上，可以提高细菌的上色能力。加热法和化学法都是固定的，无论使用什么方法，都要保持细胞原来的形态。(a)细菌的简单染色原理，(b)革兰染色的基本原理，革兰染色是细菌识别的重要染色方法。根据革兰氏阳性细菌、阴性细菌细胞壁结构、构成，使用了一系列染色剂，显示出差异。首先用结晶紫和碘溶液对细菌进行首次染色，然后对乙醇脱色，再用利盐剂重新染色，这是染色方法。最后染成红色的是革兰氏阴性细菌。紫色的是革兰阳性细菌。占细胞壁10%的细胞壁90%，1，细胞壁，革兰阳性细菌的细胞壁。革兰染色和细胞壁：革兰阳性，革兰染色原理：第一阶段：结晶紫，菌体形成紫色第二阶段：碘和结晶紫形成大分子复合体，分子大，被细胞壁阻断。第三阶段：酒精脱色，细胞壁成分和结构不同，出现不同的反应。g细菌：细胞壁厚度、肽聚糖含量、交联度高、乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径小，结晶紫碘复合物被细胞阻断，细胞不被酒精脱色，仍然是紫色的。细菌：肽聚糖层薄，交联松散的乙醇脱色不能收缩其结构。脂质含量高，乙醇溶解脂肪，间距变大，结晶紫-碘复合物溶解在细胞壁中，酒精使细胞脱色，细胞无色，番红再染色，就会变成红色。1，2，3，4，3种实验材料，大肠杆菌(24h培养)斜芽孢杆菌(16h培养)，4种无菌工作流程，无菌工作：防止我们接种的微生物以外的微生物渗透的技术。(a)简单的染色工艺步骤，1涂层：幻灯片，无菌水，斜菌种，无菌工作，均匀薄层2干燥：3固定：加热固定4染色：结晶紫染色1分钟或泛红染料2-1min或煤酸复合红染色1分钟。5洗：6干：7显微镜：用低倍率镜观察，确定目标和范围，用油镜替换，观察图纸。步骤5，(2)革兰染色工艺步骤，1涂层：方法等单次染色后干燥，固定。2早期染色：结晶紫染色1分钟后用水冲洗。3介质染料：用碘化物冲洗1 - 2分钟，然后用水冲洗，扔掉残留物。4脱色：以95%的乙醇冲洗30秒(要严格控制时间和浓度)，立即用水冲洗。5重拍：翻拍为烧红或煤酸重拍红罩，扇红2 - 3min，煤酸翻拍1min。水洗晾干。6显微镜：先用低倍率镜观察，后用油镜观察。1，2，3，4，6根据实验报告，1编写实验目的2编写简单染色，革兰染色的基本原理3实验结果，绘制了简单染色和革兰染色的结果图。菌名：放大倍数：细菌简单染色结果也，细菌革兰染色结果也要求：显示菌名，颜色，阳性或阴性，放大：7个考试问题，1细菌简单染色工作中要注意哪些事项？2如果