重金属检查法.ppt

重金属检查法,2009-07-27,重金属检查法原理：,重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。在药典规定的情况下，在弱酸溶液中，如：Ag+、Pb+、Bi+、Cu+、Cd+、Sb+、As+、Sn+、Ni+、Co+、Zn+、Hg+等金属均能生成不溶性硫化物。在碱性溶液中，如：Hg+、Pb+、Bi+、Cd+、Cu+、Ni+、Co+、Zn+、Fe+Mn+等金属均能生成不溶性硫化物。,重金属检查法方法：,由于实验条件不同,分为4种检查方法。第一法适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中进行显色的重金属检查。第二法适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中进行显色的重金属检查。,重金属检查法方法：,第三法适用于供试品能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重金属。第四法用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金属限度较低的品种。检查时，应根据药典品种项下规定的方法选用。,第一法：,除另有规定外，取25ml纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释成25ml;乙管中加入按各药品项下规定的方法制成的供试液25ml；,第一法：,若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时（即对照管）,可取该药品项下规定的二倍量的供试品和试液，加水或该药品项下规定的溶剂使成30ml，将溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml；,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时（即对照管）,甲管中加入硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，经滤膜(孔径3m)滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量，加水或该药品项下规定的溶剂使成25ml；再分别在乙管中加硫代乙酰胺试液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比较，即得。,第一法：供试品如含高铁盐影响重金属检查时,可取该药品项下规定方法制成的供试溶液，加抗坏血酸0.51.0g，并在对照液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。,第二法：,除另有规定外，取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后;（或取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500600炽灼使完全灰化），放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，,第二法：,再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml；照上述第一法检查，即得。,第三法：,除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解后，置纳氏比色管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，与一定量的标准铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。第四法：微孔滤膜过滤法。,标准铅溶液的制备:,称取硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Pb）。配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。,重金属检查法的记录要求：,1、必须记录所采用的方法。2、供试品的取样量3、标准铅溶液取用量4、乙管与甲管比较，乙管中显出的颜色浅于甲管，判为符合规定。,重金属检查法的计算：,1、标准铅溶液计算：1mol硝酸铅Pb(NO3)2的质量为331.2g，含铅（Pb）为207.2g。称取硝酸铅0.160g配制成1000ml贮备液，含Pb量为：207.20.1601000331.21000=0.1000mg/ml贮备液依法稀释10倍后，所得标准铅溶液浓度为每1ml含10g的Pb。,重金属检查法的计算：,2、重金属限量计算：进行检查时，如取供试品1.0g，与标准铅溶液2.0ml制成的对照液比较，计算重金属的限量。标准铅溶液体积(ml)标准铅溶液浓度(g/ml)100%供试品量（g)=2.00.000010100%=0.0020%=百万分之二十1.0,重金属检查法的计算：,3、标准铅溶液取样量计算：根据取供试品量及限量计算。如取供试品2.0g，依法检查，规定含重金属不得过百万分之五，应取标准铅溶液（10gPb/ml）多少毫升？重金属限量供试品重（g）=0.0000052.0=1.0ml标准铅溶液浓度(g/ml)0.000010,实验举例,例如葡萄糖注射液中重金属检查：取本品适量（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录H第一法），按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。计算标准铅溶液取用量V=0.0000053=1.5ml0.000010,实验举例,【检查】重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（中国药典2005年版二部附录VIIIH第二法），与标准铅溶液ml制成的对照液比较，（规定含重金属不得过百万分之十）结论：,实验举例,氯化钠注射液重金属检查:取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录H第一法），含重金属不得过千万分之三。计算标准铅溶液取用量,实验举例,维生素C重金属检查:重金属取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法检查（附录H第一法），含重金属不得过百万分之十。V=0.0000101.0=1.0ml0.000010,重金属检查注意事项：,1、标准铅溶液应在临用前精密量取标准铅贮备溶液新鲜配制，以防止铅的水解而造成误差。配制与贮存标准铅溶液使用的玻璃容器，均不得含有铅。2、硫代乙酰胺试液与重金属反应的最佳pH值是3.5，故配制醋酸盐缓冲液（pH3.5）时，要用pH计调节。硫代乙酰胺试液加入量以2.0ml时呈色最深。,重金属检查注意事项：,第四法中的检测范围为2-5g的铅，且因体积小，所以硫代乙酰胺试液的用量为1.0ml。硫代乙酰胺试液显色剂的最佳显色时间为2分钟，除第四法由于检测限量低，且为了方便过滤，显色时间为10分钟外，第一、二法均为放置2分钟。,重金属检查注意事项：,3、为了便于目视比较，第一、二和三法中的标准铅溶液用量以2.0ml（相当于20g的铅）为宜，小于1.0ml或大于3.0ml，呈色太浅或太深，均不利于目视比较。4、如需将炽灼残渣项下遗留的残渣作重金属检查时，则炽灼温度必须控制在500-600。,重金属检查注意事项：,实验证明，炽灼温度在700以上时，多数重金属都有不同程度的损失。以铅为例，在700经6小时炽灼，损失达68%。某些供试品（如安乃近，诺氟沙星等）在炽灼时能腐蚀瓷坩埚而带入较多的重金属，应改用石英或铂坩埚操作。,重金属检查注意事项：,5、炽灼残渣加硝酸处理，必须蒸干，至氧化氮蒸汽除尽，否则会使硫代乙酰胺试液水解生成的硫化氢，而氧化析出乳硫，影响检查。蒸干后残渣加盐酸处理的目的，是使重金属转化为氯化物，可以在水中溶解。为了避免残留的盐酸影响供试品的酸度，要加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，此时再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，即可保证供试液的pH在3.5左右。,重金属检查注意事项：,6、微量高铁离子的存在，在弱酸性溶液中会使硫代乙酰胺水解生成的硫化氢进一步氧化析出乳硫，产生浑浊而影响重金属的比色，因此必须除去。药典中加入抗坏血酸使微量高铁还原成亚铁离子，因亚铁不干扰检查。,重金属检查注意事项：,7、如供试品本身能生成不溶性的硫化物时，则影响重金属检查。为了避免这些干扰，一般均加入其它试剂如氰化钾，洒石酸等，使能干扰的金属离子，产生稳定的络合物。,重金属检查注意事项：,如硫酸锌和葡萄糖酸锑钠中铅盐检查，即在碱性溶液中加入氰化钾，或在中性溶液中加入洒石酸，使锌离子或锑离子生成稳定的络合物后，用硫化钠