ISO15189方法学评估概述

ISO15189:方法学评估概述、李志付2014-08-18、CNAS、中国合格评定国家认可委员会(chinanationalaccreditationserviceforconformityassessment ) :根据中华人民共和国认证认可条例的规定， 国家认证认可监督管理委员会成立和认可的国家认可机构，统一负责认证机构、实验室和检验机构等有关机构的认可。 根据国际要求授权实验室是建立授权系统的依据标准： ISO/IEC17011 合格评定机构认可机构通用要求 ILAC (国际实验室授权合作组织)、APLAC要求(亚太实验室授权合作组织)授权活动的依据标准：iso/iec17025检测和校准实验室能力的通用要求iso/iec17020各类检查机构能力的通用要求iso/ IEC准则43标准物质生产者能力的通用要求 iso 15189医学实验室质量和能力的具体要求 iso 15190医学实验室安全要求 iso 15195医学参考测量实验室的要求 ilac、APLAC要求、授权和认证：合格评定机构具有执行特定合格评定能力的第三方认证：定义：认证机构认证产品、服务、管理认证，只是向顾客保证某组织具有有效的质量、环境、安全管理体系，认证不适合实验室和检验机构。 问：如何在ISO15189认证实验室中为供应商提供更好的服务？ 文件提供：仪器校准和性能验证报告书、仪器校准SOP文件、仪器SOP文件、试剂SOP文件、试剂项目跟踪性和不确定度文件、仪器操作卡、仪器维护卡服务提供：技术支持咨询服务，ISO15189医学实验室-提出质量和能力专用要求，按ISO1519要求检测仪器实验室设备5.3.4提出的仪器每年都有校准和验证的要求，贝克曼呼叫公司一直认真执行，如瑞金医院、曙光医院、同济医院等工程师和技术支持人员每年给予一两次仪器校准。 5.5.3C在检测程序中提到了性能参数，如线性、精密度、以测量不确定度表示的准确性、检测极限、测量区间、测量真实性、分析灵敏度和分析特性。 医院检验科按不同仪器执行性能参数验证。 同样，我们也提供仪器校准后的性能验证报告。 那么，不同设备的校准和性能验证方案也不同，大的方向是一致的，即“ISO15189的5.5.2明确要求：实验室证明仅在确认的程序中使用的检查程序适合其期待用途，是否应该尽可能地满足规定用途实验室应记录得到的结果和使用的程序。 应评价所选择的方法和程序，证明应用于医学检查前取得满意结果。 实验室负责人或指定人员应当开始审查手续和定期审查。 审查通常每年进行一次。 审查应该文件化。 按照CNAS-GL21：2008医学实验室质量和能力认可准则在临床生物化学检验领域的指南的要求，按照生化仪器校准报告模板，按照YYT0654-2008全自动生化分析仪行业标准进行仪器硬件校准，并发行校准合格报告。 免疫仪器校准报告模板、特定蛋白仪器校准报告模板、测量系统的性能验证内容、精度准确度分析测量范围(线性范围)参考区间灵敏度特异性，指测量系统分析性能验证、一、精度性能验证概念：指在规定条件下得到的独立测量结果的接近程度，不精度反映。 常用的标准偏差和变异系数。 分为批内精度、批间精度、日中精度、室内精度(总精度)。EP5-A2、实验方法:(EP5-A2定量测定方法的精密度性能评价 )在整个评价过程中使用相同批号的试剂和校正品。 选择稳定的血清基质质量控制品。 推荐2种浓度，尽量选择接近厂家主张的浓度或接近“医学决定水平”的浓度。 2220方案：每天检查2批次，批次间隔1小时，批次间隔2次，共计20天计算80个有效数据：批次内、批次间、天间、总不精度判断：进行偏差值检查后计算批次内精度和室内精度，与厂家提供的性能参数相比，95%区间EP15-A2，实验方法(EP15-A2用户对精密度和准确度性能的核实 )样品必须模拟患者的样品基质(质量控制品、校样品、分析的患者样品和生产厂家精密试验使用的物质均可使用)，尽量选择接近“医学决定水平”的浓度或接近生产厂家提供的浓度，或者选择报告范围内的1天分析1批、2浓度，每浓度重复测定4次，连续计算5天：批内精度、总精度的判断：与制造商宣言比较，大于制造商宣言计算验证值，与验证值比较，验证值需要验证制造商宣言，否则需要调查原因。 二、准确度性能验证概念：准确度(trueness ) :测量准确度可以完全表达，是多个检测结果的平均值与真值的一致度。 用“偏差”表示。 精度(accuracy ) :完全表现为测量精度，是测量结果与测量的真值的一致度。 用“deviation”表示。EP15-A2、EP9-A2、实验方法1 :方法论比较(CLSIEP9-A2 用患者样本进行方法学比对及偏倚评估）实验方案：选取至少40份临床病人样本，其浓度应尽可能均匀分布于分析测量范围内。分别用实验方法和比较方法（可以是参考方法，或厂家声明的方法或者用户目前使用的常规方法，且其准确度已经得到确认）检测，每天检测8个样本，每个样本重复测定2次，重复测定时样本的顺序应颠倒，共进行5天。统计判断：进行离群值检验和偏倚恒定评估，对x值合适范围进行检验，通过线性回归计算预期偏倚，并与允许偏倚比较，判断是否可以接受。接受标准：1/2CLIA88允许总误差（TAE），或者以生物学变异导出的分析质量目标，,实验方法2：方法学比对（CLSIEP15-A用户对精密度和准确度性能的核实实验批准指南 )实验方案：收集20个患者样本，其浓度分布在整个线性范围内，不要使用超出线性范围的样本，分别用实验方法和比较方法进行测量，1天即可全部测量，34天统计判断：计算偏差和百分比偏差，如小于厂家声明，验证厂家声明。 实验方法3 :测定值的基准物质的实验方案：通过测定值的基准物质计算回收率或偏差进行验证。 值参考物的来源： a、参考方法或决定方法决定值的新鲜冻人血清能否从美国国家标准局(NIST )和CAP获得b、能力比较试验(proficiencytest，PT )获得参考物，如CAP和卫生部临床检测中心提供的房间质量评价控制品？ c、厂家提供的正确度确认物和品质管理品，也可以使用不同批号的校正品。 三、分析测定范围性能验证分析测定范围(AMR ) :指患者样品未经处理(稀释、浓缩或其他预处理)的检测系统直接测定的可靠结果范围，在此范围内，一系列不同样品的分析物测定值与其实际浓度(真值)呈线性比例关系。 AMR的评价有助于发现方法学原理、仪器、校准品、试剂、操作程序、质量控制计划等多个方面的误差来源。 临床可报告范围(clinicalreportablerange，CRR ) :指定定量检查项目可报告临床的检查范围，患者样品可以稀释、浓缩或其他预处理。 对CRR大于AMR的检测项目进行最大稀释度验证试验，结合临床决策水平和功能灵敏度，共同决定该项目的CRR。 实验方法： a .平均梯度法采用最小二乘法直线回归作为统计分析方法。 线性回归方程式： Y=b0b1X，b0:y轴截距，表示一定系统误差，尽可能以0 b1:倾斜度表示比例系统误差，由于很多仪器校正时的样品的样品量误差，优选有5个以上的系列浓度的样品，浓度范围扩大到期望的测定范围，各实验样品中包含的分析物浓度收集分析了测定范围下限(l )和上限(h )浓度水平的分析物的患者样品，以6个浓度操作为例： 1L、0.8L 0.2H、0.6L 0.4H、0.4L 0.6H、0.2L 0.8H、1H . b .线性检验品检验：线性检验品来源：制造商、美国病理学家协会(CAP )、卫生部临床检验中心分析物浓度或活性复盖分析物可报告范围，样品6份，样品1份测定2次，计算平均值。 (卫生部临床检测中心规定分析物的浓度和活性复盖分析物的可报告范围，共测定5个样本，每样本4次，计算平均值)用线性1 :多项式回归分析判断多项式拟合数据时的线性和非线性，最佳多项式为线性拟合模型时，判断为直接线性。线性2 :如果非线性多项式拟合数据点优于线性，则可以首先查看最佳多项式与线性拟合之间的平均线性偏差(ADL )，并且如果ADL小于方法学上可接受的线性偏差，则将其处理为线性。 EP6-A、c.EP6-A的实验方法： EP6-A采用双线性回归、二次和三次曲线回归统计处理，根据统计估计值与实际检测值的差异(统计误差)进行判断，统计误差最小的是最佳直线或曲线。 并在分析过程中与临床应用密切相关，设定临床允许偏差。 线性评估的结果在统计上被认为是非线性的，但在线性处理患者的结果时，所引入的误差不超过临床允许误差，被接受为线性处理，称为临床允许线性。 选择适当的高、低浓度混合血清，按比例制备系列浓度样品。 验证测量范围：57个样品，每个样品重复2次测量。 改良方法：创建79个样品、每个样品重复23次测量的测量范围：911个样品、每个样品重复24次测量。临床可报告范围：可报告范围=定量检验界限分析测定范围(线性范围)最大稀释倍数、最大稀释度实验：实验室可从日常测定的样品中选择13个浓度高的样品(接近线性范围上限)。 用厂家提供的稀释液(即日常检查用的稀释液)以厂家提供的可稀释倍数进行稀释。 然后测定稀释后的样品浓度，将测定值与预期值进行比较，判定美国CLIA88能力验证计划的分析质量要求是否可接受，如果在可接受范围内，则验证该稀释倍数是可靠的。 四、分析灵敏度性能验证空白界限(limitofbla