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文档简介
-,1,实验技术一微生物学实验须知与基础技能,一、实验须知(一)微生物实验室,-,2,-,3,实验室工作规则实验前做好充分准备;穿着消毒过的工作衣;实验室内应当安静,秩序井然;严格遵守操作规程,防止生物材料被杂菌污染;每一项实验尽量一次性完成,防止中途间断;做好实验纪录。,-,4,(二)微生物实验室主要仪器常用的玻璃仪器盛装有液体试样的玻璃仪器盛装固体样品的玻璃容器量取液体试样的玻璃仪器测量用玻璃仪器其他用途的玻璃仪器,试管、离心管、比色管、发酵管、三角瓶、烧杯、滴瓶、圆底烧瓶、蒸馏烧瓶、碘量瓶、试剂瓶,表面皿、培养皿、干燥器、秤量瓶,刻度吸管、容量吸管、微量移液器、容量瓶、量筒、量杯,血球计数板、血盖片、载玻片、盖玻片,过滤漏斗、染色缸、玻璃珠、玻璃管、玻璃棒,-,5,常用的仪器及设备,-,6,接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时,需要用到涂布棒。,-,7,接种和分离工具1接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀,-,8,二、基础实验技能(一)玻璃仪器的清洁方法新玻璃仪器用过的玻璃仪器玻璃仪器吸管、滴管带油污器皿2%NaOH热溶液浸10-15min水洗稀HCl洗水洗装有强碱或强酸容器,完后应立即用清水和蒸馏水冲洗即可,用毕立即放入盛有大量水的缸内,用水多次冲,最后蒸馏水洗,-,9,洗涤工作注意事项不应对玻璃器有所损伤;用过的器皿应立即洗涤;装有传染性微生物容器,先浸在5%石炭酸或1-3%次氯酸钠溶液内或蒸煮灭菌后,再洗涤;盛过有毒物品的器皿,不要与其他器皿放在一起;难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起;强酸、碱及挥发性有毒物品,必须倒在废水缸中,-,10,(二)洗液的配制和使用洗液的配制洗液的作用和使用注意事项,主要作用:将有机物氧化成为能溶解的物质;注意:洗液有很强的破坏作用,-,11,三、健康与安全,(一)实验室工作安全事项注意着装整齐;严禁在实验室吸烟、饮食或嬉戏;小心使用玻璃仪器,远离危险品存放地;使用化学药品时用量不要超出规定用量;严防致病微生物泄漏;严格按实验操作规程进行实验。,-,12,(二)实验室意外事故的处理,火险破伤火伤灼伤食入酸碱或腐蚀性物质吸入菌液,立即关闭电门、煤气门,使用灭火器、沙土和湿布灭火,除尽外物,蒸馏水洗,涂以碘酒或酒精,涂5%鞣酸、2%苦味酸或苦味酸铵苯甲酸丁脂油膏,酸性药品所致、碱性药品所致灼伤、石炭灼伤,食入酸、碱、石炭酸或苏来,吸入非致病性菌液;吸入葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等;吸入白喉菌,-,13,实验室常用消毒方法,75%酒精过氧乙酸碘伏84消毒液肥皂、洗衣粉,-,14,-,15,实验室常用灭菌方法,火焰灼烧法干热灭菌法湿热灭菌法紫外灭菌(消毒)过滤除菌法,-,16,火焰灼烧法常用于接种针、接种环、接种铲、接种钩和试管口的灭菌,灭菌,-,17,微生物实验的一般流程,-,18,-,19,-,20,-,21,-,22,-,23,常用的接种方法,)划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环,接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。)三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。除三点外,也有一点或多点进行接种的。,-,24,)穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时,用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是:用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。)浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。,-,25,)涂布接种与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长
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