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文档简介
植物生物学实验,实验二植物组织水势的测定(小液流法),1,1.了解测定植物组织水势的方法及其优缺点2.学习用小液流法测定植物组织水势的方法,目的要求:,植物组织水势的测定,2,水势表示水分的化学势,象电流由高电位处流向低电位处一样,水从水势高处流向低处。植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。,植物组织水势的测定,3,液相平衡法:小液流法、称重法、质壁分离法压力平衡法:压力室法气相平衡法:露点法,植物组织水势和渗透势的测定方法:,水势测定,冰点降低法,渗透势,蒸气压渗透压计法,植物组织水势的测定,4,一、液体交换法测定植物组织水势小液流法,小液流法测定植物组织水势的原理?,问题:,植物组织水势的测定,5,(一)原理1、当植物组织与外液接触时发生水分交换:植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水,外液浓度变大;植物S若两者相等,则水分交换保持动态平衡,外液浓度保持不变;植物S,植物组织水势的测定,6,2、同一种物质浓度不同时其比重不一样,浓度大的比重大,把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时,液滴下沉;反之则上升。3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。,植物组织水势的测定,7,【实验原理】,植物组织水势的测定,8,9,溶液渗透势的计算:S=iCRT式中S溶液的渗透势,以MPa为单位;R0.008314MPaLmol1K1T绝对温度,即273+t;C溶液的摩尔浓度,以molkg1为单位i溶液的等渗系数,蔗糖=1。,植物组织水势的测定,10,(二)实验材料,植物组织水势的测定,11,【用具】试管架;试管;打孔器;毛细管;镊子;青霉素瓶【试剂】蔗糖溶液甲烯蓝粉末,植物组织水势的测定,12,(三)操作步骤1.配制不同浓度的蔗糖溶液2.用打孔器在绣球花的不同部位打100-200片,混匀,每个青霉素瓶各放入15-20片,(打孔要迅速,避开叶脉,选边缘整齐无破损的叶片)3.从配制好的试管中各取2ml(量准确?)到相应的青霉素瓶或称量瓶中(用一只移液管由低高,不要润洗)。放置2030min,期间摇动数次,以加速水分平衡。,植物组织水势的测定,13,4.染色:用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中,摇匀,溶液变蓝。(干燥针头先用蒸馏水湿润,加入的甲烯蓝量一定少,使各瓶中颜色基本一致)5.观察液滴升降:用毛细吸管取青霉素瓶有色液插入相应试管中部缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴蓝色溶液,轻轻取出滴管,观察蓝色液滴的移动方向并记录。(用白纸划一直线置于试管背面,方便观察),植物组织水势的测定,14,毛细管放置稳定,挤出小液滴,取出毛细管观察液滴升降,15,静止不动,液滴,植物材料,溶液浓度变大,溶液浓度变小,溶液浓度不变,wS,w=S,16,6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。,植物组织水势的测定,17,18,具有平衡浓度结果,植物组织水势的测定,19,无平衡浓度结果,植物组织水势的测定,20,错误结果,植物组织水势的测定,21,结果是否正确,为什么?,植物组织水势的测定,22,结果是否正确,为什么?,植物组织水势的测定,23,注意事项:,所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。试管、移液管和毛细管等要洗净烘干,移液管与毛细移液管应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。甲烯蓝不宜加得过多(溶液呈稍深的蓝色即可),否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要摇匀,时间放久了的蔗糖溶液会分层,影响结果。叶片打孔及投入青霉素瓶中要快,防止水分蒸发影响实验结果。释放蓝色液滴时要缓慢,防止过急挤压冲力影响液滴移动。,24,思考题:1试述小液流法测定植物组织水势的原理。2
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