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文档简介
谁能告诉我这是what?,能发光的水母,请您欣赏,能否能否让热带鱼也能发光?,设想,不能发光的热带斑马鱼,能发荧光的热带斑马鱼,普通热带斑马鱼是不发荧光的,基因工程及其应用,第1课时基因工程的原理,授课教师:杨灵芝,一、基因工程(geneengineering)又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。,基因重组,生物体外,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。,1、基因的,指“限制性核酸内切酶”,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割,特点:,“”,这个特点说明了:,酶具有专一性,二、基因操作的工具,例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。,被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?,思考:,这些黏性末端碱基是反向对称重复排列的,、基因的针线DNA连接酶,连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。,DNA连接酶的作用过程,3、基因的运输工具运载体,(1)常用的运载体:质粒、噬菌体和动植物病毒等,标记基因,便于进行检测。,质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.,(3)作为运载体必须具备哪些条件?,1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。2)具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。3)具有某些标记基因,便于进行筛选。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。,将外源基因转移到受体细胞中去利用运载体在受体细胞内对外源基因进行大量复制,(2)运载体的作用:,从细胞中分离出DNA,从大肠杆菌中提取质粒,提取目的基因,目的基因与运载体结合,DNA连接酶,目的基因导入受体细胞,目的基因的表达与检测,基因工程操作的基本步骤,例:将目的基因导入植物细胞,农杆菌转化法,特点:,能感染双子叶植物和祼子植物,对单子叶植物无感染能力,Ti质粒的TDNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上,转化过程:,Ti质粒目的基因,构建,表达载体,植物细胞,植物细胞染色DNA,新性状,农杆菌,为什么基因工程能够成功呢?,基因拼接的理论基础:规则的双螺旋结构基本单位都是脱氧核苷酸遵循碱基互补配对原则,外源基因在受体内表达的理论基础:生物界共用一套遗传密码,基因工程的操作工具,1.基因的剪刀限制性酶,2.基因的针线连接酶,3.基因的运输工具运载体,基因工程的操作步骤,1.提取目的基因,2.目的基因与运载体结合,3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与鉴定,基因工程的原理:,小结,基因重组,谢谢!,谁能告诉我这是what?,培育转基因大肠杆菌的简要过程:,
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