高二生物细胞融合和单克隆抗体

细胞融合和单克隆抗体，思考：1。什么是动物细胞融合？2.促进细胞融合的方法有哪些？3.细胞融合技术的最大优势是什么？4.植物体细胞杂交和动物细胞融合有什么异同？电场法(高效、损伤小、易操作)(离心、振动、电刺激)、聚乙二醇(聚乙二醇)、灭活病毒(灭活仙台病毒)、连接：病毒促进细胞融合，(1)动物细胞融合(细胞杂交)，概述：比较植物细胞杂交和动物细胞融合、细胞膜流动性、植物细胞全能性、细胞膜流动性、用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁、用胰蛋白酶分散细胞、物理和化学方法、物理、化学和生物方法获得部分或全部植物，主要用于制备单克隆抗体。复习1。抗体的化学本质？2.什么细胞产生抗体？3.抗体作用的特征？4.抗体的分布？(2)单克隆抗体的制备，思考：如何获得特异性抗体？(1)传统的抗体生产方法。用这种方法制备的抗体的特点是：产率低、纯度低、特异性差、抗体灵敏度低。如何获得大量化学性质单一、特异性强的抗体？1975年，英国科学家米尔斯坦和科尔设想：2。单克隆抗体的制备过程、自学和思考：1)在从小鼠体内提取B淋巴细胞之前，应该对小鼠做些什么？你为什么要这么做？2)我从哪里获得小鼠的B淋巴细胞？3)如果只考虑两种或两种融合，会出现哪种融合类型的细胞？4)所有杂交瘤细胞都能产生特异性抗体吗？5)由特异性B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞的特征是什么？6)最后，通过哪些渠道可以获得大量抗体？1、为什么选择小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合？小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖。b淋巴细胞可以产生抗体。细胞的同源性越接近，融合形成的杂交细胞就越容易存活。骨髓瘤细胞是癌细胞吗？具有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞。具有转移能力的肿瘤细胞称为癌细胞。因此，肿瘤细胞不能等同于癌细胞。2.单克隆抗体制备的思考与探索：如何获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞？(3)为什么要对整个制备过程进行两次筛选？第一次筛选获得杂交瘤细胞(多个)，第二次需要首先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的条件下开始培养，然后筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于细胞群是从单个杂交瘤细胞中克隆出来的，因此产生的抗体必须是具有单一化学性质和强特异性的单克隆抗体。单克隆在这里指的是单细胞克隆，除了被克隆的不是B淋巴细胞而是杂交瘤细胞。具有一定的流动性，c，丝，不变，抗体能与抗原特异性结合，而变体运动右图显示了细胞融合的一个短暂过程，请根据图回答：(1)如果a和b是植物细胞，它们在细胞融合之前已经被处理和去除；在从a和b到c单元的过程中，常用的物理方法是。如果A和B是植物细胞，那么所形成的D细胞应该用技术培养成植物。(3)如果甲和乙是动物细胞，通常从它们中取出，然后用于分散它们。在甲、乙到丙的过程中，与植物细胞不同的常用手段是形成的D被称为。(4)如果过程是制备单克隆抗体，并且A是小鼠，那么在获得细胞之前已经注射了小鼠。注射后，老鼠的身体产生了相应的。在图中，b是。(5)如果该过程仍是单克隆抗体的制备，则在甲、乙到丙的过程中形成的丙种应为用于培养的D细胞。选择它的方法就是培养它。获得D后，常用的培养方法是。?融合细胞在选择性培养基中培养后，活细胞为杂交瘤细胞。然而，这些杂交瘤细胞并不是所有能够分泌所需抗体的细胞，通常通过“有限稀释法”来选择。用多孔细胞培养板稀释和培养杂交瘤细胞，使得每个孔中不允许超过一个细胞通过培养增殖。然后检测每个孔的上清液中细胞分泌的抗体(通常使用酶联免疫吸附测定法)，其中上清液可以与特异性抗原结合的培养孔是阳性孔。不能保证阳性孔中的细胞来自单个细胞，并且选择阳性孔中的细胞进行有限稀释，这通常需要进行3-4次，直到每个孔中增殖的细胞肯定是单克隆细胞。这个过程就是杂交瘤细胞的克隆培养。单克隆抗体：特异性强，纯度高，灵敏度高，产量高，易于标准化生产。3、单克隆抗体的优点，4、单克隆抗体的应用，1、可用作诊断试剂：具有准确、高效、简便、快速的优点，2、可用于疾病治疗，3、可用于携带药物(作为“生物导弹”携带与疾病相对应的药物)。)“生物导弹”=单克隆抗体药物，概述，一种诱导细胞融合的新方法，一种新细胞，和一种优势，实施例2(1)当通过动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，将抗原注射入小鼠以获得(多重选择)a. t淋巴细胞b .效应器b .淋巴细胞c .抗体d .记忆细胞(2)在下面关于单克隆抗体的制备和应用的描述中， b淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合通常需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇来诱导b，融合后形成的杂交瘤细胞不仅可以无限增殖，而且可以产生单克隆抗体，体外培养时，b淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖。 细胞合成DNA有两条途径，d和s，其中d途径可被氨基嘌呤阻断。人类淋巴细胞有两种合成DNA的方式，但通常不会分裂和增殖。尽管小鼠骨髓瘤细胞中没有S通路，但它们可以持续分裂和增殖。将两个细胞在试管中混合，加入聚乙二醇以促进融合，获得杂交细胞。请回答：(1)除了融合的杂交细胞，试管中还有融合细胞。(2)设计一种从培养液中分离杂交细胞的方法(不考虑机械方法)，并解释其原理。方法：原理：向培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞，并在加入氨基嘌呤后，阻断d合成途径，因此只有d合成途径的骨髓瘤细胞或相互融合的细胞不能增殖，但杂交细胞可以利用淋巴细胞中的s途径合成DNA并增殖，实施例3右图是一位同学根据杂交瘤技术的方法设计的生产破伤风抗体的实验方案。根据图，回答：(1)计划能达到预期效果吗？原因是什么？(2)为什么流程如图所示？(3)图3中细胞培养的目的是什么？(4)图4中细胞培养的目的是什么？(5)破伤风杆菌的抗体最终可以从哪种抗体中提取？(6)这个计划的目的是什么？(2)动物细胞融合，1 .过程：(2)动物细胞融合，1 .过程：灭活的病毒颗粒粘附在细胞