Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的表达及临床意义

Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的表达及临床意义,学生姓名： 高晓玲导师： 邱明学科： 口腔医学,前言：,口腔鳞状细胞癌是口腔内发病率最高的癌症 口腔鳞癌,早期： 采取外科手术诊治,晚期：结合放疗，化疗，生物疗法配合治疗,前言：,临床检查方法：触诊和强化CT,深部的恶性肿瘤有时触诊很难鉴定，临床上经常结合CT来确诊肿瘤，但在晚期恶性肿瘤会出现转移或原发灶较小因此出现诊断偏差。所以，及时准确的诊断和处理出恶性肿瘤是首要工作，有利于提高生存率,Waltimo在2003年提出了：,（1）epithelial- mesenchymal transition使上皮细胞从形式上改变并具有间充质的特性，可以脱离细胞向远处转移。 （2）E-cadherin是一种抑癌因子, E-cadherin的下降可以调节细胞的极性,前言：,对E-cadherin7,8的阻滞可以降低肿瘤迁移，近年发现的snail因子引起了大家的关注 。Snail是转录抑制子中的Snail超家族中的一种，除Snail 外，还包含SIPI、Slug等因子。它能够启动E-BOX，阻滞E-cadherin的转录，从而降低该蛋白的水平，促进细胞之间脱落和转换。,综述：,snail与E-cadherin扮演着及其重要的角色，口腔鳞癌的肿瘤细胞的转移与二者的作用密不可分。,1. Snai的结构及特点：,Snail具有四到六个锌指结构，这些结构中存在羧基末端等，其中Cys-Hs锌指结构中的两个半胱氨酸和两个组氨酸残基能同锌离子组成配建，进而通过结构特有的DNA连接构象发挥功能 。（1）snail在EMT的驱动中是作为核心的地位，综合协调不同的信号通路。（2）Snail直接作用的位点是E-cadherin的表达基因，通过直接阻滞E-cadherin钙黏的表达，使上皮细胞转变为间充质细胞。（3）Snail对启动子活性的抑制，进而抑制mRNA的表达 。（4）snail可能并不是直接作用于MMPs的转录，而是另有其他途径，目前尚不明确 （5）snail还有阻滞细胞发生坏死的功能，对相连接的蛋白的表达具有一定的阻滞功能,综述：,2. 1E-cadherin的结构及特点 ：,E-cadherin又叫可作L-CAM，基因定位于染色体16p22.1，是上皮细胞组织中的一种120KDa的跨膜糖蛋白分子 。,细胞外区,跨膜区,细胞内区,借助HAV序列组成的黏附分辨位点来进行分辨和介导同源细胞间的黏连现象,形成E-cadherin-环连蛋白/-环连蛋白-环连蛋白复合体,综述：,2. 1E-cadherin的结构及特点 ：,E-cadherin的主要生理作用包括促使细胞与细胞之间进行黏附，使细胞之间形成中间连接，保持组织的结构和维持其完整性 。,E-cadherin表达能力的下降以及黏连细胞能力的丧失是肿瘤细胞侵袭和转移的开始，并同时证明了E-cadherin对于抑制肿瘤细胞的转移具有实用价值。,E-cadherin蛋白的表达与肿瘤侵染的严重程度呈现负相关，口腔鳞癌的病理分期越晚，E-cadherin的表达下降水平越低。,综述：,3. Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的功能作用：,（1）Snail在EMT的作用,snail通过与smad相互作用蛋白竞争性与E-cadherin的E-box结合，从而抑制E-cadherin基因的表达，使细胞间出现松弛现象，进而诱导EMT机制的运行。,具体过程：,snail通过降低E-cadherin的表达，而降低了细胞间的黏附作用，触发EMT产生，使上皮细胞转化为间质细胞。,2.进一步地向淋巴结或者更远处转移、扩散，除了降低E-cadherin的表达，还可以抑制claudin-7和claudin-1的表达，增加间叶标志物的表达,综述：,3. Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的功能作用：,（2）E-cadherin的功能,，E-cadherin作为一种细胞间的黏附分子，是保持上皮细胞结构的完整性和保护正常组织不受肿瘤细胞的浸润，并在人体的新陈代谢中起着不可忽视的功能。,当E-cadherin的表达过度时，可以抑制细胞的扩散和增殖并诱导细胞发生凋亡,当E-cadherin的表达水平下降时，细胞之间的连接就会松散，细胞的游走能力就会加强，并且有利于细胞的损伤修复,动态调整,综述：,3. Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的功能作用：,（2）E-cadherin的功能,，E-cadherin作为一种细胞间的黏附分子，是保持上皮细胞结构的完整性和保护正常组织不受肿瘤细胞的浸润，并在人体的新陈代谢中起着不可忽视的功能。,当E-cadherin的表达过度时，可以抑制细胞的扩散和增殖并诱导细胞发生凋亡,当E-cadherin的表达水平下降时，细胞之间的连接就会松散，细胞的游走能力就会加强，并且有利于细胞的损伤修复,动态调整,综述：,3. Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的功能作用：,（2）E-cadherin的功能,在人体内发生肿瘤33-35的病理状态下，使E-cadherin结合而成的复合体丧失功能或者对其造成损伤的的原因 ：（1）癌基因方面： （2）编码E-cadherin的基因发生了突变 （3）-连接素的表达产生下调现象或者缺失情况,现已证明，在E-cadherin表达较多的肿瘤细胞中，其分化一般稍好，上皮结构的组织一般稍多，因而，E-cadherin的阳性水平降低，与肿瘤的分化情况高低有关。,综述：,4. snail和E-cadherin在口腔鳞癌中应用表达：,EMT机制触发因素，目前已经基本确定是由snail的作用，才使得EMT机制能够正常运转,snail在口腔鳞癌中应用价值应该会给口腔鳞癌患者带来莫大的福音,Snail的高表达可以抑制体内E-cadherin的表达水平，并进一步的使细胞间的黏连作用减弱，增强肿瘤细胞的游走和浸润能力，破坏细胞间的黏附作用，甚至对细胞之间的紧密连接也有一定的影响,E-cadherin介导的细胞黏连作用可能与肿瘤细胞的发生有关，,综述：,5. Snail与E-cadherin在口腔鳞癌中的临床应用 ：,E-cadherin表达量的下降可能与肿瘤细胞的入侵和转移密切相关。口腔鳞癌属于上皮性肿瘤，上皮-间质转化过程中E-cadherin蛋白表达下调则促进上皮细胞向间质化转变即更易导致正常细胞肿瘤化，且使细胞更易转移和扩散。,在口腔鳞癌中Snail的表达增加则出现E-cadherin蛋白表达下调，和口腔鳞癌转移扩增的趋势 ，而E-cadherin蛋白表达上调会增加细胞之间的粘附度使其不易转移，所以能够抑制口腔鳞癌细胞的转移与扩散，即找到使 E-cadherin蛋白表达上调的方法途径是临床需要探究的方面,综述：,6. 存在问题及发展前景 ：,1.Snail作用机制仍需进一步深入探究 2. Snail在口腔鳞癌细胞中的具体传导途径和其所介导的传导通路尚有待研究 3.对EMT做进一步的研究，并着力于通过不同的方法来改变EMT的调节途径，从而降低肿瘤细胞的转移。我们有理由相信，随着我们对EMT机理更深入的探究，能够为口腔鳞癌以及其他上皮性肿瘤的治疗奠定更坚实的理论基础。,资料与方法：,1. 材料收集 ：,收集来自就诊于大庆油田总医院20 12年12月一2014年3月行口腔鳞癌根治性切除术活检组织38例，男性21例，女性17例，手术前并未对其进行相关诊治，手术后每例标本皆经病理确诊 。年龄从29 -79不等, 平均为（546.9）岁。32例口腔正常组织对照实验，其中15例男性，13例女性，年龄从32-73岁，平均年龄56岁，根据UICC2002年标准对38例进行临床TNM分类，T1T2分类为26例，T3T4分类为12例。口腔鳞癌转移：在38例口腔鳞癌患者中20例转移，18例无转移。按组织分化可分为：分化较高的组织共八例，中等分化的十八例，分化较低的十二例。,资料与方法：,1. 材料收集 ：,资料与方法：,2. 实验试剂 ：,资料与方法：,3. SP免疫组化染色法：,资料与方法：,4.结果判断标准 ：,在临床和病理均双盲条件中，试验所用切片均由3名资深医生进行辅助观察，随机选取至少10个切片在X100个高倍视野下观察，对免疫组化结果进行分析。E- cad 与Snail抗原阳性物质均为相同的颜色，不同的是前者主体位于肿瘤的细胞膜内，后者主体位于细胞质内。根据颜色深浅可分为四级（p），无染色（0分）浅黄色（1分）深黄色（2分）。棕黄色（3分）。依据相应的比例, 0分：0；1 分:1% - 25% ；2分: 26% - 50% ； 3 分: 大于50%。,5.统计学处理 ：,应用SPSS19.0软件进行分析，利用X2卡方检验,结果：,正常组织为32例，Snail阴性表达为22例，阳性表达为6例，38例口腔鳞癌组织Snail阴性表达8例，阳性表达为30例，结果表明口腔鳞癌组织Snail阳性表达高于正常组织Snail阳性表达，有统计学意义,结果：,Snail 与E-cadherin的表达与口腔鳞癌患者临床病理特征之间的联系 E-cadherin随着肿瘤的分化降低而下降，高中分化组阳性表达率明显高于低分化组( P 0.05)。,结果：,Snail 与E-cadherin的表达与口腔鳞癌患者临床病理特征之间的联系,结果：,Snail 与E-cadherin的表达与口腔鳞癌患者临床病理特征之间的联系,结果：,Snail 与E-cadherin的表达的相关性,本实验表明随着E-cadherin的阳性降低Snail的阳性升高，Snail 蛋白和E-cadherin 蛋白表达为负向相关关系 ( r = - 0.71，P0.05）,口腔鳞癌细胞在分组、分化程度、临床分期和颈淋巴结转移方面，以及E-cadherin表达阳性率方面相比，差别显而易见（P0.05）。在不同组织分化组中，E-cadherin的表达随着分化程度的提高而提高，表达位置从细胞膜向细胞质转变。,在低分化组织中，未出现染色，仅仅见到细胞浆染色。在不同组织分化组中，E-cadherin的阳性率分别为62.5%、83.3%、75.0%。,讨论：,3、 Snail和E-cadherin在口腔鳞状细胞癌中表达的相关性,Snail的阳性不断升高，E-cadherin的阳性显著下降，两者之间口腔鳞癌中的表达方面，表现为负向相关关系，即r=-0.5690，P0.01。,EMT可以概括为以下：,（1）EMT促进相邻细胞的分离,（2）EMT使得癌细胞向邻近组织的迁移。,（3）EMT分子标志的改变,讨论：,3、 Snail和E-cadherin在口腔鳞状细胞癌中表达的相关性,讨论：,4、 Snail、E-cadherin与上皮性肿瘤浸润、扩散的联系,临床实验结果显示,正常细胞、组织上皮细胞中均能测定出较强的E-cadherinm蛋白的表达,在转移潜能高的纤维细胞、低分化的上皮性癌细胞中，很难检测到E-cadherin与蛋白表达正常细胞、组织上皮细胞中均能测定出较强的E-cadherinm蛋白的表达,本试验结果显示：低分化口腔鳞癌组织中，E-cadherin的表达大部分为阴性少部分细胞的细胞质中出现E-cadherin的弱表达，但未见细胞膜表达,讨论：,5、 nail在口腔鳞癌中的表达及与口腔鳞癌发生发展的关系,Snail在口腔鳞癌中的高表达可能与口腔鳞癌的相关变化密切相关，并且随着Snail的水平的上升，其癌细胞的分化愈发减弱，从而促使其出现转移的几率增加，表明癌症出现一定程度的恶化。所以通过检测Snail蛋白的表达可对口腔鳞癌的恶性程度和患者的预后进行相关的推断。,讨论：,6、 E-cadherin在口腔鳞癌中的表达及与口腔鳞癌发生发展的关系,E-cadherin在口腔鳞癌中的表达降低可能与口腔鳞癌的的相关改变有关，E-cadherin的表达越低口腔鳞癌的恶性程度越大，患者预后不佳。Snail的表达强度与组织分化程度和淋巴结转移相关，E-cadherin的表达程度除与组织分化程度和淋巴结转移相关外，还与T分级和临床分期相关，考虑可能是在口腔鳞癌组织中E-cadherin除受到Snail的调控外，还可能受到其它因子的调控,讨论：,7、口腔鳞癌中