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文档简介

生化实验（4）,血浆蛋白醋酸纤维膜电泳,实验目的,了解血浆蛋白质电泳分离的基本原理、操作基本方法及临床意义。,实验原理,电泳法在外电场的作用下，带电颗粒，将向着与其电性相反的电极移动，这种现象称为电泳。,带电粒子在电场中移动的速度取决于所带的电荷数量及质点的大小和形状；此外还受外界因素的影响如，电场强度、溶液的PH、离子强度等。,2、血浆蛋白：血浆中蛋白质的PI小于7.0，在PH8.6Buffer中解离成负离子，在电场中向正极移动。以此种方法能将血浆蛋白分离成:清蛋白、1、2、纤维蛋白原和-球蛋白六条带,操作,1、准备（1）电泳仪的准备（2）CAM准备划线（毛面，距一端1.5cm，铅笔划一横线）放入巴比妥缓冲液中浸泡20min,充分浸透,8cm,1.5cm,2cm,杨,2、点样（1）无光泽面朝上，吸去多余Buffer,（2）用盖玻片蘸取少量血浆，垂直印在划线处。注意：不能超出边缘；不能重复点样；必须与边缘平行,3、平衡：（5min)无光泽面朝下，点样侧位于阴4、电泳：打开电源，U160V或I1.6mAt=4550min；冬季1小时5、染色：氨基黑10B染色充分，510
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