血涂片的制备_第1页
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文档简介

.血涂膜的制备和细胞大小的测定,目的是:1.掌握血涂膜的制备方法;2 .认识红细胞和各种白细胞的典型形态;3 .掌握微表的使用方法。 实验原理、涂层技术是制作血样最常用的技术。 以血样为单层细胞涂片,染色后可以对血液中的各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测定等工作。实验用品,1 .器材:医用一次性采集针,酒精棉球,镊子,脱脂清洗的载玻片,双凹片(压片)。 2 .试剂: Wrights染液:溶于Wrights色素粉末0.1g、甲醇60ml中。 方法和程序,1 .血涂片的制备和血细胞的观察2 .微尺度的使用,采血前用70%酒精棉球消毒、采血人指腹,第一滴血中含有大量单核白细胞,故弃第一滴血。 挤出片:将第二滴血挤出载玻片右侧,取另一边缘光滑的双凹片,倾斜放置于血滴前缘,先稍向后移动接触血滴,使血液沿玻璃边缘呈线状扩散。3045、两玻璃板的角度适宜为3045,将两玻璃板轻轻向前等速前进,涂抹血液膜。染色,涂膜在空气中完全干燥后,滴加几滴Wrights染色液,直至复盖血膜,染色13min。 然后,滴加等量的蒸馏水,与染液均匀混合,静置1015min。 用蒸馏水冲洗染液,用吸水纸吸取,用镜子检查。 淋巴球、单球、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、显微测微尺度的使用,显微测微尺度是用于测量显微镜观察物体长度、面积的工具,包括载物台测微尺度、目镜测微尺度两部分。 在使用中,级测微计发挥标定的作用,可以确定目镜测微计的旋钮上的各单元表示的实际长度。 目镜测量微尺度测量完毕后,可用于细胞样品的测量。, 2 .将载物台测量用千分尺的盖子放置在载物台上的一个面上,用低倍镜观察,调整焦距观察载物台测量用千分尺的刻度3 .一边移动载物台测量千分尺一边旋转目镜,使目镜测量千分尺与载物台测量千分尺平行然后,从左向右看2尺刻度线的另一个重合,记录重合线之间的目镜测微计和载物台测微计的格子数。 用下式计算目镜测微计的各晶格为几m。目镜测微尺度的标定,naX=M,X:目镜测微尺度的实际长度a:载物台测微尺度的实际长度n:载物台测微尺度的刻度数。 M:目镜测量微尺度的刻度数。4.载物台测定用微尺度、血液交换用涂层、目镜测定用微尺度测定细胞所占小晶格数x目镜测定用微尺度的每小晶格的实际长度=被

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