微遗-同源重组的应用.ppt

同源重组应用，09活体下肠电，同源重组概述，同源重组(homologousrecombination)(即典型重组是执行染色体间遗传信息的方法之一)，几乎在所有生物中同源重组。真核生物减数分裂中染色体交换等细菌的结合、转化、普遍性转基因的基因重组属于同源重组。同源重组要求两个DNA分子的序列相动态，同源区域越长，重组越有利；同源区域太短，很难重建。由于依赖广泛的DNA上东西列联盟，负责DNA配对和重组的蛋白质因子没有碱基序列特异性，如果两个DNA序列相同或相似，重组可能发生在联盟部分的任何地方。当然，也有重建热点，其中有些序列比其他序列重建的概率高。同源重组是修复受损DNA的重要方法，即重组修复。同源重组应用，同源重组主要为基因敲除和基因敲除研究基因功能转基因动物的制备转基因动物的药物筛选，动物模型转基因动物为药物生产，基因敲除和敲除，基因敲除(外源DNA在受体细胞基因组中与序列相同或相似的基因同源重组，并整合到受体细胞基因组中，而不是受体细胞基因组中相同或相似的基因序列中。基因敲除：不在基因组中或被停用的细胞及其基因组的同族序列被称为基因同源重组，用于基因敲除。敲除和敲除的原理都用克隆的外源基因取代了同种重组，即野生等位基因。两个不同的是从基因敲除中带来的外源基因是停用、没有功能的基因，基因敲除使用活性及功能基因。因此，两个具体用途是不同的。敲除和敲除均可用于基因功能研究，基因敲除可用于突变基因修复。挖空是20世纪80年代末以后发展起来的新的分子生物学技术，是通过一定的途径停用或缺乏身体特定基因的技术。一般意义上的敲除主要利用DNA同源重组原理，用设计的同族片段取代目标基因片段，以达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同种重组外，还逐渐应用了新的原理和技术，将基因插入型突变和同工酶进行比较，也可以达到基因敲除的目的。小鼠敲除实验，基因敲除了实际操作的简要阶段：1，克隆目的基因及其两侧的DNA序列。2，通过插入抵抗基因或DNA缺失，使克隆的目的基因在体外通过基因操作克隆的目的基因失效。3、通过体外转化，将失活对象基因导入受体细胞，与野生型基因同族重组。这两个基因是利用内源性基因序列两侧或外部的裂口，将内源性基因替换成同族序列的目的基因。目前用于基因敲除的技术包括Cre/LoxP系统、FLPI系统等。这种方法可以产生准确的基因突变，也可以正确纠正身体的基因突变。基因功能研究，细菌和一些低等真核生物在进行基因置换时，可以将克隆的基因准确地插入染色体的同族部位，因此是研究基因置换的理想物质。基因替代法除了成功地用于细菌和酵母的基因分析外，还成功地应用于老鼠和鸡的基因功能分析。转基因动物的制造，转基因动物的应用领域，1，生物反应器：大量生产医药或食品蛋白质，即转基因动物制药；2、疾病的动物模型：研究、药物筛选、药物治疗、毒性试验；3、通过增加或删除基因，研究基因功能、调节和发展(如肿瘤基因、免疫系统等)。4、异种移植；5、家畜品种改良。转基因动物的应用领域，用于药物筛选的动物模型，诱导性或实验性动物模型，通过同族重组，致病因素作用于动物的组织、器官或全身，对动物的组织、器官或全身造成一定的损伤，类似于人类疾病的功能、代谢或毒可以引起动物的相应传染病还有化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。诱导性疾病动物模型具有在短时间内复制很多疾病模型，严格控制各种条件，使复制的疾病模型适合研究目的等特征，因此被现代医学研究所广泛使用，尤其是在药物筛选研究中。但是诱导模型和自然发生的疾病模型在某些方面存在一些差异。因此，要设计诱导动物模型，必须最大限度地克服其不足，发挥其特性。用于药物筛选的动物模型，用于药物筛选的动物模型：帕金森病动物模型，用于药物筛选的动物模型。建立丙型肝炎病毒药物筛选的动物模型。精神分裂症的动物模型和药物筛选。高尿酸血症动物模型的建立及抗痛风中药的筛选。要求：(a)相似性(b)重复(3)可靠性(4)适用性和可控性(5)简单经济。动物模型进行药物筛选，动物模型的重要性和优越性：(a)避免个人实验带来的危险。(b)临床上看不到的疾病可以随时被动物克隆。(3)人的某些疾病可以克服潜伏期长、经过和发病率低的缺点。(d)严格控制实验条件，提高实验材料的可比性。(e)可以简化实验工作和样品收集。(6)有助于更全面地了解疾病的本质。(。转基因动物可以用作生产药物的“生物反应器”。转基因动物的药物生产不仅开启了制药产业的新时代，也是转基因动物研究中最活跃的领域。基因工程药物第3阶段：1，通过细菌基因工程(即适当的改造)，将目标基因引入大肠杆菌，并将细菌等原核微生物表达的目的蛋白作为药物使用；2、将人类或哺乳动物的基因直接导入哺乳动物的细胞，生产具有生物活性的产品的细胞基因工程药物；3，其3是利用转基因动物生产低成本、高活性的药物。第一，转基因动物，转基因动物在动物的生殖细胞中引入外源基因，整合该细胞，然后发育成个体整合的外来基因，整合外来基因会影响其后代继承的动物。药用蛋白质基因细胞株表达细胞核，转基因动物生产药用蛋白质的基本过程，受体动物，供体动物受精卵细胞核受精卵组装的核细胞多细胞胚胎假怀孕，动物动物幼仔女性转基因动物牛奶药用蛋白质，2、简单的设备，非能源消耗，非循环镜子污染。3、生产周期短。4、生产成本低。据报道，截至2006年，我国已进入临床试验阶段，其中，乳铁蛋白、白蛋白、凝血因子等，第一批转基因动物生产的药品预计将在5年内上市。应该临床上说哪种转基因药最先出来.转基因动物通过人工将外源基因导入动物受精卵中，使其与动物自身的基因组整合，从而随着细胞的分裂，外源基因增殖，稳定地遗传到下一代。在此基础上，将预先提取的医药蛋白质注入牛或羊等，在下一代出生时，人们可以从其体内提取更多的药物蛋白。简而言之，就像在动物体内大量生产药物一样。此前，我们的科学家在上海成功地开发