《动物细胞融合与单克隆抗体》课件

动物细胞工程动物细胞融合和单克隆抗体,1.动物细胞工程常用的技术手段有？最基础的是哪个技术？2.动物细胞培养的过程；原理。3.动物细胞体外生长的特点；什么是细胞株和细胞系。4.体细胞核移植技术的过程和原理。,回顾复习,2,生物种间杂交想像图,3,温故知新,问题思考,Q1,Q2,获得白菜-甘蓝利用了什么技术？,植物体细胞杂交,此技术的过程？,4,？,再分化,一、原理：细胞膜具有流动性细胞的全能性,二、诱导方式：物理法、化学法,三、用途：获得杂种植株,温故知新,脱分化,5,思考,不同种动物体细胞能否杂交？过程如何？与植物体细胞杂交相比有何不同？已成功的动物细胞融合实例有很多，如人小鼠、人兔、人鸡、鸡鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌鸡、人胡萝卜等细胞的融合。请阅读课本P52，填写下表,6,比较,获得杂种植株,灭活的病毒,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,结果,诱导方法,7,病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏病原体的抗原结构。,补充1.灭活病毒诱导细胞融合的原理：,8,2.诱导融合的方法,物理法：化学法：生物法：,电激,聚乙二醇（PEG),灭活的病毒,3.意义和用途：（1）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,（2）最重要的用途是制备单克隆抗体,9,单克隆抗体,什么是抗体?由什么细胞分泌产生？是否具有特异性？,10,动物体内,抗体,（抗原不纯）,血清抗体（抗体不纯）,筛选单一浆细胞,不能无限增殖,抗原,浆细胞,血清,人们获得抗体的传统方法：,11,人们获得抗体的传统方法,小结,向动物体内注射_，使之产生抗体。,抗原,从动物_中分离抗体。,血清,(1)方法：,(2)缺点：,产量低、纯度低，特异性差,12,思考,怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？,B淋巴细胞能分泌特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交细胞,设计方案：,（不能无限增殖）,（不能产生抗体）,13,杰出的成果-单克隆抗体,科勒GeorgeKohler,米尔斯坦CsarMilstein,荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖,14,单克隆抗体,杂交细胞,细胞融合,骨髓瘤细胞,经免疫的小鼠,提取,杂交瘤细胞,第一次筛选,克隆化培养和抗体检测,第二次筛选,产生专一抗体的杂交瘤细胞群,体外培养,体内培养,提取单克隆抗体,选择性培养基,单克隆抗体,B淋巴细胞,15,B，瘤，BB，B瘤，瘤瘤，,1.细胞融合后培养液中有几种细胞？,单克隆抗体,思考：,3.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？,2.为什么要对小鼠注射抗原？,获得产生相应抗体的B淋巴细胞（浆细胞）,细胞融合技术、细胞培养技术,16,单克隆抗体,杂交细胞,细胞融合,骨髓瘤细胞,B淋巴细胞,经免疫的小鼠,提取,杂交瘤细胞,第一次筛选,克隆化培养和抗体检测,第二次筛选,产生专一抗体的杂交瘤细胞群,体外培养,体内培养,提取单克隆抗体,4.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？,5.单克隆抗体的优点？,特异性强，灵敏度高，可大量制备。,选择性培养基,单克隆抗体,17,（1）作为诊断试剂最广泛应用准确、高效、简易、快速,（如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）,单克隆抗体的应用,18,（2）运载药物,生物导弹=单克隆抗体+药物（治疗肿瘤）,(“生物导弹”单抗导向，药物为弹头),单克隆抗体的应用,19,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的淋巴细胞,A,2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞,D,考考你,20,3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）APEGB灭活的病毒C电刺激D离心,B,考考你,21,5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特