第十章 亲子鉴定

第十章亲子鉴定。第一节总结亲子鉴定：亲子鉴定是指运用医学、生物学和人类学的方法，检测遗传标记，并根据遗传理论对其进行分析，从而科学地确定受试者之间是否存在生物亲缘关系。亲子鉴定：判断父母和孩子之间是否有血缘关系的方法叫做亲子鉴定。亲子鉴定：在亲子鉴定中，确定母子关系需要判断有争议的父亲和孩子之间是否存在亲子关系。(1)亲子鉴定的类型，(1)涉及民事纠纷的亲子鉴定，(1)涉及抚养婚生或非婚生子女或继承财产的责任的诉讼，(2)涉及妇产医院涉嫌错误转移婴儿的诉讼，(2)涉及刑事案件的亲子鉴定，(1)在强奸或违纪犯罪中确定孩子(或胎儿)的生父， (2)在肢解案件中确定尸体来源(3)在杀婴、绑架和其他案件中确定儿童的尸体来源(3)，涉及行政事务的亲子鉴定(1)国外移民的公证(2)失散亲属的亲属关系鉴定(3)对计划外出生负责的人的身份鉴定及其子女户籍登记。 其次，亲子鉴定的依据包括遗传性状、孕期、性交能力和生殖能力。遗传特征是亲子鉴定最重要的基础。遗传特征：它是生物体所有形态特征、生理特征和代谢类型的统称。单位性状：一种可以通过遗传检测和决定的性状，可以以预期的方式从一代传到下一代，在遗传学上称为单位性状。遗传标记：这种相对不同的单位字符被用作识别携带它的个体、细胞和染色体的标记，或用于研究细胞、个体、家族和群体的遗传模式，称为遗传标记。应用于法医学的遗传标记可大致分类如下：血细胞(红、白、血板)表面基因产物水平的遗传标记血液蛋白质水平的遗传标记DNA水平的遗传标记DNA水平的遗传标记DNA长度多态性的遗传标记。与环境无关的简单遗传特征，如血型、DNA多态性、耳垢类型、味觉能力等。2.由多个基因座控制的复杂遗传特征，也受环境、营养状况、疾病等非遗传因素的影响。例如身体形状、外观、肤色、皮肤纹理等。单基因遗传分析是亲子鉴定最可靠、最基本、最常用的方法。亲本和子代基因型之间的关系子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型子代基因型孩子不能有父母都没有的等位基因。3.除非父母双方都有相同的基因，否则孩子不会是纯合的。4.如果父母中有一方是纯合子，孩子就会有一个。亲子鉴定的基本原则如下：1 .如果某个基因必须来自生父，而生父没有这个基因，就可以排除父子关系。2、在肯定一个基因必须来自生身父亲，并假设父亲有这个基因时，不能排除亲子关系。根据遗传标记，确定父系血型组合的父亲可以排除母亲和子女的基因，但父亲和父亲除外，aaxaaabbaaababbbbaabbbbbbaabbbbbbbababa，aaabbb，鉴定人资格：鉴定人必须取得相应的资格，具备相应的遗传学、分子生物学等学科知识，掌握相关的检测技术，并有具有一定工作经验的专业人员对检测结果进行解释和判断，并做出相应的结论。2.认证机构条件：认证机构必须经相关部门批准，具有标准化的实验方法和可靠的实验室质量控制体系。3.被评估人要求：成年被评估人应自愿接受评估，14岁以下者应获得其监护人的同意。第二节亲子鉴定中常用的遗传标记1。基因产物水平的遗传标记适合用于亲子鉴定的血液遗传标记。一般来说，应该满足以下条件：1 .遗传特征简单，遗传模式已被家庭调查证实。遗传多态性存在，基因频率分布均匀，亲子排除率高。3.建立了相应地区和民族的群体遗传数据。4.血型个体出现较早，不易受年龄、疾病和其他因素的影响。5.该测试方法操作简单，重复性好，结果清晰可靠。(1)红细胞1型，ABO血型已知抗体标准红细胞分型抗-A抗-BA型乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型肝炎-乙型因此，ABO血型也可以通过上述的样本试验来确定、2、MN血型MN血型有3种表型：m型、n型和MN血型，MN血型基因座位于4号染色体上，m和n等位基因是共显性基因。MN血型的M和N抗原以糖蛋白的形式存在于红细胞膜表面。MN血型可以通过用已知的抗M和抗N抗体检测未知的红细胞抗原来鉴定。3、Rh血型5种常见抗原D、C、C、E、E构成18种表型。RhD抗原具有很强的免疫原性，在输血、新生儿溶血和母婴妊娠不相容性方面具有重要意义。因此，根据RhD抗原的存在与否，临床上将其分为两种类型：RhD()和rhd (-)。Rh血型由位于1号染色体上的两个高度同源的RhD基因和RhCE基因控制，这两个基因分别编码RhD和RhCcEe蛋白。Rh血型抗原是包埋在细胞膜中的蛋白质，相应的Rh抗体大多是不完全抗体。因此，抗人球蛋白实验经常被用来鉴定Rh血型。红细胞酶型红细胞酶型是红细胞多态性同工酶个体间的遗传差异。亲子鉴定中常用的红细胞酶类型包括红细胞酸性磷酸酶、酯酶D、葡萄糖磷酸变位酶1、乙二醛酶I和谷丙转氨酶(GPT)等。红细胞酶型血型系统生理功能染色体等位基因表型定位基因EAP正磷酸单酯水2EAPaA型EAPABA型磷酸醇EAPbB型酯酶D型酯水13ESD11型11(静电放电)型ESDED 21-2脂肪酸醇2型葡糖磷酸变位酶-1-磷酸1GM 11 1 1，2-1酶M1 PGM 11-1-，2-1-PGM12 1-，2 (PGM1亚型)葡萄糖-6-磷酸PGM 12-2-1， 2-乙二醛酶甲基乙二醛6 GLO11型(GLO)GLOGLO22-1型S-乳酸谷胱甘肽2型谷氨酸丙氨酸丙酮酸16GPT11型GPTGPT22-1型(GPT型)酮戊二酸谷氨酸2型、概述：红细胞酶型通过电泳分离结合特定酶组织化学酶谱技术进行分类，即根据酶蛋白分子大小和所带电荷量的不同进行电泳分离。 酶活化用于催化底物反应以显示条带。根据电泳带的位置、数量和强度进行分类。常用的电泳分离方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术。血清蛋白质类型是由等位基因决定的人血清中同一蛋白质的个体差异，它表现为氨基酸序列的差异，导致蛋白质一级和二级结构的差异。用于亲子鉴定的常用血清型系统包括：触珠蛋白(HP)、维生素D结合蛋白(Gc亚型)1-抗胰蛋白酶(PiM亚型)、转铁蛋白(TfC亚型)、间-胰蛋白酶抑制剂(ITIH1型)、补体成分、同种异型遗传标记等。常见的血清型血型系统生理功能染色体基因表型结合珠蛋白HP蛋白和Hb结合成16Hp11型(Hp)复合物，因此Hp22-1型Hb中的铁可被储存和再利用来结合和转运维生素D4Gc1f1F、2-1F蛋白(g及其代谢产物Gc1s1S、1F1SC亚型)Gc22、2-1S转铁蛋白参与铁的吸收和转运，3TfC1C1(TfC亚型)与锌的吸收和转运有关。C1C21-抗胰蛋白酶维持蛋白酶和蛋白酶14 P1 m1之间的平衡，M2白酶(PiM抑制剂，PiM2M1M2亚型)保护组织免受PiM3M1M3 m2m 3m3酶m2m 3m-胰蛋白酶抑制多种丝氨酸蛋白水3ITIH111型、2-1酶抑制剂(ITIH122型、tih 1 3-2型)ITIH133型、白细胞型主要指人白细胞抗原(HLA)，也称为移植抗原或组织相容性抗原系统，这是最人类的人类白细胞抗原系统由6号染色体短臂上的人类白细胞抗原区域的多个基因座的多个等位基因控制。Hla-I: HLA-a，b，c，e，f，g，h，j，khlahla-ii: dr，DQ，DP特征：位于同一条染色体上，不同基因座的基因紧密连锁形成单倍型遗传。HLA抗原分型主要采用两种方法：检测HLA-A、B、C、DR和DQ位点抗原的微淋巴细胞毒性试验和混合淋巴细胞培养。前者用于检测HLA-DP位点的抗原。脱氧核糖核苷酸鸟嘌呤(A)(4)碱基鸟嘌呤(g)胞嘧啶(c)胸腺嘧啶(T)脱氧核糖核苷酸是一种生物遗传物质，其基本结构是由4个脱氧核糖核苷酸(核苷酸)通过磷酸二酯键聚合形成的多核苷酸链。细胞核的DNA分子由两条反平行的多核苷酸链组成，根据碱基配对原理(A和T，G和C)，它们通过氢键相互连接，并围绕同一中心轴螺旋形成双螺旋结构。生物遗传信息被表达为DNA中的核苷酸序列，以及DNA分子上以密码子形式编码的DNA的半保守复制。在细胞生命过程中，两条多核苷酸链中的一条作为模板将遗传信息转录成Mrna，然后Mrna将信息翻译成蛋白质，以确定蛋白质的特异性。脱氧核糖核酸多态性的分子基础脱氧核糖核酸多态性是指在脱氧核糖核酸区域内存在两种或多种形式的等位基因或片段，其本质是生物体进化过程中核苷酸序列变化的结果。长度多态性。长度多态性：指两条同源染色体上同源片段核苷酸排列数量的个体差异。重复序列：多拷贝形式的DNA序列被称为重复序列，主要存在于非编码区或基因附近。分散重复序列：当单拷贝DNA序列以单体形式分散在整个基因组中时，称为分散重复序列。由于其分布区间段的大小，不能分为短段型和长段型。串联重复序列：由特定重复单元组成的重复序列，每个重复单元首尾相连。也被称为卫星DNA。卫星DNA中卫星微卫星的反向重复序列：重复单元是在同一条DNA链上反向排列的互补序列。有间隔重复序列，没有间隔重复序列。2.序列多态性：脱氧核糖核酸序列多态性是指两条同源染色体之间的个体差异，其中同源脱氧核糖核酸序列长度相等，但存在单个核苷酸。由单核苷酸变异引起的DNA序列多态性称为单核苷酸多态性，是人类遗传变异中最常见的一种。由于碱基的取代、插入或缺失。单核苷酸多态性作为遗传标记具有以下优点：1 .单核苷酸多态性在人群中是双等位基因，其等位基因频率可以在任何人群中估计；2.它在基因组中的分布比微卫星标记要广泛得多。3.与串联重复微卫星位点相比，单核苷酸多态性高度稳定，尤其是单核苷酸多态性；在编码区；4.部分位于基因中的SNP可能直接影响产物蛋白的结构或基因表达水平，因此，它们可能是疾病遗传机制改变的候选位点。5.易于进行自动分析，缩短研究时间。DNA指纹技术分为类似聚合酶链式反应的DNA芯片技术。1. DNA指纹是指人类基因组DNA经限制性内切酶消化、电泳分离、萨森印记转移，然后根据碱基互补原理用已知序列的小卫星DNA探针与未知基因组DNA杂交后，由一系列具有不同距离和间隔的多重电泳条带组成的高度多态性模式。图谱中的每个条带代表一个特定长度的DNA片段，不同个体之间的差异主要表现在条带位置、数量和密度的不同。DNA指纹的本质是基因组DNA的限制性片段长度多态性。其个体差异取决于所用限制性酶识别序列的特异性和探针的特异性。(1)DNA指纹图谱的基本操作流程(1)DNA提取：提取的原则是尽可能保持DNA分子的完整性，尽可能从样品中去除蛋白质、多糖、脂类和其他成分。2)限制酶消化：这种DNA多态性被称为限制片段长度多态性，因为被DNA限制酶识别的序列的核苷酸结构改变，导致限制位点的产生、消失或置换。3)电泳分离：通过电泳技术，酶片段可按分子量由大到小进行分离。4) Sassen印迹转移：通过电泳将酶解的DNA片段分散在凝胶的不同位置。由于凝胶介质的低机械强度，分离的DNA片段从凝胶原位转移到固相滤膜上。这一过程称为萨森印迹转移。分子杂交是一个过程，其中在复性条件下，特异性探针和等待侧的多态性DNA片段形成稳定的异源DNA双链。DNA探针：一种已知的核苷酸片段，被一种指示剂(同位素或非同位素)标记，可以与互补的靶核酸序列退火和杂交。多位点探针的分类：在低强度杂交条件下，能够同时检测多个VNTR位点的探针，得到的DNA图谱是一个DNA指纹。单位点探针：在高强度杂交条件下只检测到一个VNTR多态性片段的探针，获得的DNA图谱为DNA印迹。6)指纹图谱显示，同位素标记探针后，杂交信号是通过同位素辐射在x光胶片上的成像效应来检测的，这被称为放射自显影。(2)DNA指纹的基本特征1)体细胞稳定性：同一个体的血液、唾液、精液以及组织和器官的DNA指纹是一致的，对于同一健康人的一生将保持不变，这是法医学应用的基本前提。2)个体高特异性：不同个体DNA分子水平上的遗传本质差异决定了相同的限制性内切酶消化基因组DNA，并且一个体和另一个体的等位基因片段在数量和长度上不能相同，从而产生具有个体特异性的DNA指纹图谱。3)根据孟德尔遗传定律的遗传：后代的DNA指纹中的所有等位基因带都可以在父母的指纹中找到，片段的遗传符合孟德尔遗传定律。聚合酶链式反应(1)基本原理：聚合酶链式反应技术的基本原理是在耐热的DNA聚合酶的作用下，利用一对特定序列的短片段DNA作为引物，利用加热和冷却的交替循环，选择性地扩增基因组中的一个小片段。聚合酶链反应的循环是变性的：通过加热使氢键断裂，形成两条退火的单链DNA:温度下降，人工合成的寡核苷酸引物与靶DNA的双面结合，根据原理进行扩增延伸：在存在DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸底物和Mg2的情况下，聚合